范蕾
- 作品数:2 被引量:22H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立被引量:5
- 2007年
- 将原核表达重组鸡γ-干扰素(rChIFN-γ)以100μg/只剂量免疫8周龄BALB/c小鼠,4次免疫后进行细胞融合,以昆虫细胞表达重组鸡γ-干扰素为检测抗原,筛选出阳性克隆株,经有限稀释,获得1株稳定分泌抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分泌抗体亚型为IgG1型,轻链为K链,命名为G1株。Western blot检测显示,该单克隆抗体与原核表达和昆虫细胞表达的rCbIFN-γ均具有良好的免疫反应原性。昆虫细胞表达rChIFN-γ经该G1单克隆抗体作用后,失去抑制水疱性口炎病毒(VSV)在鸡胚成纤维细胞(CEF)复制的能力?利用纯化的单克隆抗体和昆虫细胞表达rChIFN-γ建立相对定量ELISA检测方法,取吸光度值(Y)对昆虫细胞表达rChIFN-γ的抗病毒活性单位对数(X)作回归曲线,回归方程为Y=0.1164^*X-0.1281,回归系数R=0.9539,具有良好的线性关系.
- 李志中秦立廷王喜军陈伟业范蕾李培锋步志高
- 关键词:单克隆抗体
- 光滑型布鲁氏菌LPS单克隆抗体的制备及鉴定被引量:17
- 2009年
- 为制备抗布鲁氏菌单克隆抗体(MAb),本研究用灭活的布鲁氏菌疫苗M5-90株免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术获得杂交瘤细胞。以布氏杆菌疫苗株M5-90、S-19及小肠结肠炎耶尔森菌O∶9的脂多糖(LPS)分别作为抗原包被酶标板,对杂交瘤细胞进行筛选,获得两株稳定分泌抗光滑型布氏杆菌LPS(S-LPS)MAb的细胞4G6和16C5。特异性分析表明,MAb 4G6除与耶尔森O∶9全菌体有轻微的交叉反应外与其它革兰氏阴性菌无交叉,而16C5完全排除了与其他各菌的交叉反应。Ig亚型分析表明,所制备MAb的轻链亚类均为κ,4G6重链为IgM,16C5重链为IgG3。用Protein G亲和层析纯化MAb 16C5腹水并初步用于竞争ELISA方法,检测布氏杆菌抗体水平,结果表明了该实验方法的有效性。本研究制备的MAb 16C5具有高度的特异性和敏感性,排除了与其他革兰氏阴性菌的交叉反应,为建立一种诊断布鲁氏病的快速、有效、敏感的方法奠定了有力的基础。
- 王加兰胡森郑孝辉范蕾步志高
- 关键词:布鲁氏菌单克隆抗体