代海丽
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰抑制柯萨奇病毒B3复制的研究
- 目的：设计筛选针对柯萨奇病毒B3基因组有效的siRNA序列，同时探讨基因组的其它区域是否是设计siRNA的有效靶点，在体外细胞水平上探索RNAi在动物及人类病毒性疾病防治中的应用与机理。 方法：分别针对CVB3基因组的...
- 代海丽
- 关键词：RNA干扰抗病毒治疗
- 柯萨奇病毒B3的TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：4
- 2012年
- 目的:建立一种检测柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3)的实时荧光定量RT-PCR方法,为临床CVB3的快速、准确检测提供一种新的方法。方法:针对CVB3基因的VP4区和管家基因β-actin的核苷酸序列分别设计了特异性的引物和TaqMan荧光探针,以重组质粒pMD18-T-CVB3为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并构建CVB3的荧光定量RT-PCR标准曲线。结果:建立的方法在1.0×101～1.0×108copies/μl模板范围内具有良好的线性关系(r2>0.999),扩增效率高于98.0%,至少可检测10 copies/μl的阳性标准品。用CVB3感染HeLa细胞来模拟实际样品,灵敏度可达到1.0×101copies。结论:建立的荧光定量RT-PCR具有较高的敏感性、特异性和重复性,可作为CVB3的快速诊断方法,为CVB3感染的临床治疗提供快速可靠的诊断依据。
- 代海丽高铁磊朱琳曹威栾颖靳占峰
- 关键词：柯萨奇病毒B3
- 柯萨奇病毒B3的多克隆抗体制备
- 2011年
- 目的制备柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)的多克隆抗体。方法针对CVB3基因的VP1区设计特异性引物,RT-PCR扩增VP1基因并将其克隆到pGEX-6p-1中,经IPTG诱导表达后,以GST-VP1融合蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。采用ELISA、Western blot以及间接免疫荧光检测多克隆抗体的效价和特异性。结果 ELISA检测血清的效价不低于1∶64 000,Western blot和间接免疫荧光显示该抗体具有良好的特异性。结论成功制备了效价较高的CVB3多克隆抗体,可应用于CVB3蛋白的检测。
- 代海丽栾颖高铁磊朱琳靳占峰
- 关键词：柯萨奇病毒B3多克隆抗体原核表达融合蛋白
- FAP对体外内皮细胞增殖及其小管形成的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在体外对内皮细胞的增殖和小管形成的影响。方法应用不同浓度FAP(0、300、600、1 200 pmol/L)处理人脐静脉内皮细胞EA.hy926,采用MTT检测内皮细胞增殖,划痕愈合实验分析细胞迁移并使用三维胶模型研究内皮细胞的小管形成。结果与正常对照组相比,FAP可以诱导内皮细胞迁移和增殖(P<0.05),并促进内皮细胞小管形成(P<0.01),其中600 pmol/L浓度的FAP处理组作用较其他组明显增强(P<0.01)。结论 FAP在体外可促进人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成。此发现为进一步研究FAP在血管生成中的机制提供了理论基础。
- 朱琳张宁代海丽邵洪江赵艳靳占峰
- 关键词：内皮细胞成纤维细胞激活蛋白MTT小管形成
