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张春玲
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1
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供职机构:
中国科学院生物物理研究所
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相关领域:
生物学
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合作作者
许凌峰
中国科学院生物物理研究所
李雪梅
中国科学院生物物理研究所
回佳菡
沈阳农业大学生物科学技术学院
唐咏
沈阳农业大学生物科学技术学院
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2006
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人热休克蛋白转录因子1 DNA结合结构域的表达、纯化和晶体生长
2006年
目的:获得大量热休克转录因子1(HSF1)DNA结合结构域(DBD)蛋白,用于晶体生长的三维结构解析。方法:将DBD基因片段克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中并获得高效表达,经过Glutathione SepharoseTM 4B亲和层析、ResourceQ纯化后,蛋白纯度达到95%以上。结果:圆二色谱仪分析蛋白质的二级结构结果显示α螺旋占33%,β折叠占15%;采用悬滴气相扩散法得到了针状DBD晶体。结论:纯化的蛋白质与同源性达68%的Kluyveromyceslactis的DBD有相似的空间构象。获得的蛋白质晶体为进一步的三维结构解析奠定了基础。
回佳菡
唐咏
张春玲
许凌峰
李雪梅
关键词:
DNA结合结构域
蛋白质纯化
晶体生长
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