段明珠
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 供职机构：集美大学水产学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 日本鳗鲡抗菌蛋白BPI基因的克隆、鉴定与表达
- 2019年
- 为探究鱼类抗菌肽—杀菌/通透性增强蛋白(bactericidal/permeability increasing protein,BPI)的功能,从日本鳗鲡(Anguilla japonica)中克隆和鉴定了两个BPI基因,命名为AJBPI-1和AJBPI-2。这两个抗菌肽均具有BPI超家族特征性的LPS结合结构域和脯氨酸富集区,其中AJBPI-1和AJBPI-2的N-端碱性氨基酸(精氨酸和赖氨酸)的数量分别为12和35,表明前者对LPS的结合力较后者弱。Real-time PCR检测结果显示,AJBPI-1在正常养殖鳗鲡的肝脏中转录表达量最高,其次是头肾,而AJBPI-2则在中肾和头肾中转录表达量最高,其次是血液。Poly I:C和E.tarda诱导后,鳗鲡脾脏中AJBPI-1和AJBPI-2的表达量均显著上调(P<0.05),AJBPI-1约为PBS对照组的4.0倍和3.3倍,AJBPI-2为PBS对照组的2.3倍和1.7倍;经LPS、Poly I:C和E.tarda刺激后,鳃中AJBPI-2表达量显著上调(P<0.05),上调幅度最高可达到PBS组的2.5倍、17.0倍和7.0倍;而中肾只在LPS和Poly I:C刺激时,AJBPI-1和AJBPI-2的表达量显著上调(P<0.05),AJBPI-1约为PBS对照组的3.0倍和2.2倍,AJBPI-2为PBS对照组的2.0倍和2.2倍。
- 王佩段明珠黄贝熊静梁英黄文树
- 关键词：日本鳗鲡抗菌肽迟缓爱德华氏菌
- 日本鳗鲡抗菌肽β-defensin基因的克隆、表达及功能分析
- β-defensin又称为防御肽,是一类富含半胱氨酸分量小的阳离子多肽.本研究运用RACE-PCR技术获得日本鳗鲡的两个β-defensin序列,并分别命名为Aj-defensin1和Aj-defensin2.其中Aj-...
- 王佩段明珠梁英黄贝黄文树
- 关键词：日本鳗鲡抗菌肽荧光定量抑菌实验
- 日本鳗鲡肝脏表达抗菌肽2的克隆与表达
- 肝脏表达抗菌肽2(liver-expressed antimicrobial peptide,LEAP-2)是一种新型抗菌肽。本文通过RACE-PCR从日本鳗鲡(Anguilla japonic(a))的肝脏中扩增得到A...
- 段明珠黄文树黄贝
- 关键词：抗菌肽日本鳗鲡
- 日本鳗鲡肝脏表达抗菌肽2的克隆与表达
- 肝脏表达抗菌肽2(liver-expressed antimicrobial peptide,LEAP-2)是一种新型抗菌肽。本文通过RACE-PCR从日本鳗鲡(Anguilla japonica)的肝脏中扩增得到AjL...
- 段明珠黄文树黄贝
- 关键词：抗菌肽日本鳗鲡
- 文献传递
- 日本鳗鲡COX-2基因的克隆、鉴定及表达分析被引量：2
- 2015年
- 应用PCR及RACE技术从日本鳗鲡(Anguilla japonica)中克隆获得一个2463 bp环氧化酶基因(Cyclooxygenase-2,AjCOX-2)的cDNA序列.AjCOX-2前体为606肽,含有脊椎动物COX-2的保守结构域,以及加氧酶和过氧化物酶的活性位点.在正常生理条件下,AjCOX-2基因在日本鳗鲡的鳃、鳔和皮肤中高水平转录表达.脂多糖刺激后8 h,AjCOX-2基因在皮肤和鳔中的转录表达显著上调(P<0.05);多聚胞苷酸刺激后8 h,AjCOX-2在皮肤、鳔和鳃中的转录表达显著上调(P<0.05);迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)刺激后8 h,AjCOX-2在鳔中的转录表达也极显著上调(P<0.01).结果表明,AjCOX-2基因是对外来病原刺激的早期响应基因,参与机体抵抗外来刺激物的先天免疫应答.
- 张芳芳熊静段明珠李春艳彭喜霞黄文树
- 关键词：日本鳗鲡COX-2脂多糖迟缓爱德华氏菌
- 日本鳗鲡肝脏表达抗菌肽2基因的克隆与表达被引量：7
- 2016年
- 为探讨鱼类抗菌肽基因的生物学功能,研究应用RACE方法克隆获得了日本鳗鲡(Anguilla japonica)肝脏表达抗菌肽2基因(Liver-Expressed Antimicrobial Peptide 2,LEAP-2),即AJLEAP-2的cDNA序列,全长为450 bp,开放阅读框编码89个氨基酸。其成熟肽含有LEAP-2保守基序"C-X5-C-X4-C-X4-C"。AJLEAP-2基因组结构与其他脊椎动物LEAP-2相同,都包含有三个外显子。利用荧光定量PCR检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡不同组织/器官中的表达,发现其转录子在肝脏中表达量最高,是内参基因(β-acHn)的6倍;其次是肠道,但其表达量仅为肝脏的1/130。此外,还检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡玻璃鳗(Glass eel)阶段的转录表达水平,结果显示,玻璃鳗中AJLEAP-2的转录表达量仅低于黑仔期的肝脏,为黑仔鳗肠道表达量的2倍。LPS和迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda)刺激能显著上调鳗鲡血液中AJLEAP-2的转录表达,刺激16h后上调倍数最高,分别为对照组的86倍和12倍。此外,LPS刺激72h和E tarda刺激8h后,肠道中AJLEAP-2显著上调表达(P<0.05),为对照组的8倍。Poly I:C刺激24h后,血液中AJLEAP-2转录表达显著下调。结果表明,AJLEAP-2在日本鳗鲡抗细菌感染过程中起重要的作用。
- 段明珠黄贝梁英张芳芳聂品黄文树
- 关键词：抗菌肽日本鳗鲡迟缓爱德华氏菌
- 日本鳗鲡的C-型和G-型溶菌酶研究被引量：3
- 2017年
- 研究以日本鳗鲡(Anguilla japonica Temminck et Schlegel)为研究对象,根据其基因组数据库,预测并扩增出2类,共5个溶菌酶基因,包括1个C-型溶菌酶和4个G-型溶菌酶,分别命名为AJLys C、AJLysG1、AJLysG2、AJLysG3和AJLysG4。它们的cDNA全长分别为811、749、1352、1175和733 bp,编码143、193、185、185和187个氨基酸。Signal P预测表明,AJLys C和AJLysG1的N-端分别包括15和19氨基酸的信号肽,另外3种溶菌酶没有信号肽。基因组分析显示,AJLys C、AJLysG2、AJLysG3和AJLysG4的基因结构与其他鱼类的同类溶菌酶的基因结构相似,C-型溶菌酶具有4个外显子,G-型则具有5个。但是,AJLysG1的基因结构与其他鱼类G-型溶菌酶不同,具有6个外显子,与其他鱼类溶菌酶的蛋白序列比较,发现AJLysG1缺失其他G-型溶菌酶存在的第2个酶活性位点氨基酸,即天冬氨酸Asp。AJLys C与其他很多物种的C-型溶菌酶具有较高的同一性,如与牙鲆的同一性为72.7%。G-型溶菌酶中AJLysG2、AJLysG3、AJLysG4彼此之间以及与其他物种G-型溶菌酶的同一性相对较高;而AJLysG1与其他物种以及与其他3种G-型溶菌酶的同一性均不高,且都在50%以下。组织表达分析显示,所有5个溶菌酶基因在12种检测的组织中均有表达。C-型溶菌酶在胃及免疫相关组织的表达量较高;G-型溶菌酶在各组织/器官中的表达则差异较大,AJLysG1在皮肤和肌肉中的表达量最高,AJLysG2在免疫组织/器官如血液、头肾、体肾和鳃中表达量较高。经迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)刺激48h后,这5个溶菌酶基因在组织/器官中的表达量均有上调,其中在血液、肠道和头肾等的上调较为显著。此外,研究尝试重组表达这些抗菌肽,获得了AJLysG2、AJLysG3和AJLysG4基因在鲤上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprinid,EPC)细胞中的表达,重组蛋白表现出对溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)生长的明显抑制作用。文章较全面地研究了�
- 杨勇黄贝黄文树段明珠张芳芳聂品
- 关键词：日本鳗鲡溶菌酶重组蛋白抑菌活性
