田青
- 作品数：9 被引量：23H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家生猪现代产业技术体系建设项目上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 一株携带EGFP基因的重组伪狂犬病毒变异株的构建
- 2015年
- 本研究运用同源重组的方法,在伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株PRV JS-2012基础上,构建了一株携带增强型绿色荧光蛋白基因的标记重组伪狂犬病毒,命名为r PRV JS-2012-EGFP。经PCR方法鉴定及荧光显微镜观察分析,结果表明重组病毒构建成功,并能在感染细胞中稳定表达绿色荧光蛋白。生长曲线和空斑试验结果显示,r PRV JS-2012-EGFP与亲本株PRV JS-2012在体外具有相似的生长特性。将r PRV JS-2012-EGFP毒接种14日龄PRV阴性仔猪,能使实验猪100%发病,病死率高达40%,表明r PRV JS-2012-EGFP是一株具有强致病力的标记伪狂犬病毒变异株,在伪狂犬病毒变异株致病机制研究中具有一定的使用价值。
- 童武郑浩梁超刘飞曹艳云李林田青郑旭晨单同领李国新童光志
- 关键词：伪狂犬病毒同源重组重组病毒
- 猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)最小免疫剂量测定被引量：7
- 2017年
- 为了确定猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)的最小免疫剂量,本研究将25头14日龄仔猪(猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型病原抗体均为阴性)随机分成5组,每组5头。第1~4组分别接种猪伪狂犬病灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)0.5、1、2、3 m L/头,免疫28 d后各组参照第1次免疫的剂量分别加强免疫1次,第5组实验猪不做处理作为阴性对照。免疫后,每周采集各组猪血清检测抗体水平。待第2次免疫28 d后,5组实验猪均滴鼻接种PRV JS-2012株第5代强毒2 m L,含病毒105.0TCID50/头。结果表明:第1次免疫后14 d,第2~4组猪PRV g B抗体全部转为阳性,而第1组猪在第1次免疫后21 d全部转阳。攻毒后,第1组有1头猪发病,表现精神沉郁、厌食和轻微神经症状,其余4头猪有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为80%;第2~4组,实验猪只有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为100%;第5组猪在攻毒后48 h,体温迅速上升到41℃以上,并表现为明显的精神沉郁、厌食和神经症状,发病率为100%,死亡率为40%。由此确定猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株)最小免疫剂量为1 m L/头。
- 童武李国新李国新刘飞郑浩田青刘飞梁超田青李林曹艳云单同领王涛
- 关键词：伪狂犬病毒灭活疫苗最小免疫剂量
- 乙型脑炎病毒E-138(Glu/Lys)变异导致病毒神经毒力减弱
- 引言乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)能够感染人(主要为15岁以下儿童)和多种动物(如猪、马)的中枢神经系统,引发病毒性脑炎,危害严重。本实验室保存有猪源乙型脑炎病毒HEN07...
- 郑旭晨郑浩田青刘飞梁超童武童光志
- 猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-ΔgI/gE株)的制备及免疫效力评阶
- 童武李国新郑浩刘飞梁超李林田青曹艳云武吉强王涛郑旭晨童光志
- 伪狂犬病毒的microRNAs靶基因预测及功能鉴定
- 2016年
- 为研究猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)编码的微小RNA(micro RNA,mi RNA)的功能,本研究通过生物信息学预测结合双荧光素酶报告系统验证方法,对病毒mi RNA(virus mi RNA,vmi RNA)进行靶基因鉴定。结果表明,PRV编码的prv-mi R-LLT1、prv-mi R-LLT7和prv-mi R-LLT9对病毒转录极早期基因IE180有抑制作用,prv-mi R-LLT7对参与调控病毒复制的UL48基因有抑制作用。初步研究表明这些vmi RNA可能在病毒感染过程中具有基因调控作用,本研究结果为进一步研究PRV vmi RNA在病毒复制、免疫逃避及潜伏感染过程中的功能奠定了基础。
- 刘飞童武郑浩李国新梁超郑旭晨田青童光志
- 关键词：伪狂犬病毒微小RNA靶基因
- 猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)的制备及免疫效力评价被引量：7
- 2016年
- 本研究将猪伪狂犬病毒双基因缺失毒株（JS-2012-△g I/g E株）用0.15%的甲醛灭活后,与赛彼科公司MONTANIDE ISA201VG佐剂进行乳化,制备成猪伪狂犬病灭活疫苗。为了评价灭活疫苗的免疫效力,15头14日龄的健康仔猪（猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒Ⅱ型抗原和抗体均为阴性）随机分成3组,每组5头。第一组猪颈部肌肉接种猪伪狂犬病灭活疫苗（JS-2012-△g I/g E株）每头2 m L,接种后28 d,第一组和第二组同样方式同等剂量接种猪伪狂犬病灭活疫苗（JS-2012-△g I/g E株）,第三组猪作为对照。第二次免疫后d 28,三组实验猪均滴鼻接种PRV JS-2012第5代强毒,每头105.0TCID50/2 m L。攻毒后0~14 d,每日测量体温并记录临床症状。通过抗体检测和保护效率来评价猪伪狂犬病灭活疫苗（JS-2012-△g I/g E株）免疫效力。结果表明,两次免疫（第一组）PRV g B抗体水平明显高于一次免疫（第二组）,两次免疫提供了更好的保护效力。
- 童武李国新郑浩刘飞梁超李林田青曹艳云武吉强王涛郑旭晨单同领童光志
- 关键词：伪狂犬病毒灭活疫苗
- 猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)的制备及免疫效力评价
- <正>猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的高死亡率的急性传染病,该病以发热、奇痒、脑脊髓炎为主要特征。PRV的易感宿主有很多,但猪是该病毒主要的天然宿主、贮存者和传播者。不同年龄...
- 童武李国新郑浩刘飞梁超李林田青曹艳云武吉强王涛郑旭晨童光志
- 文献传递
- 猪伪狂犬病毒变异株单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2015年
- 为制备猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异毒株的单抗,以纯化灭活的PRV JS-2012毒株免疫BALB/c雌性小鼠。经间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)筛选,获得2株稳定分泌PRV单抗的杂交瘤细胞:4D8、4F10。2株单抗经亚型鉴定均为Ig G1亚类,轻链为κ链,腹水IFA效价均达1:51 200;IFA与IHC结果显示,二者均能与PRV毒株发生特异性反应;Western blot结果表明,4D8与PRV反应条带大小约为60 k Da,而4F10不与PRV发生反应,推测其可能针对PRV的构象性抗原表位。该单抗的制备对PRV的抗原变异及诊断研究均有重要意义。
- 刘飞童武杨莘郑浩李国新梁超田青童光志
- 关键词：伪狂犬病毒单克隆抗体
- 伪狂犬病毒实时荧光定量PCR方法的建立被引量：7
- 2015年
- 根据伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,RV)g B基因保守序列,设计合成一套特异引物和Taq Man探针,建立了一种快速、敏感和特异的检测伪狂犬病毒的实时荧光定量PCR方法。该方法可检测到相当于10 copies/μL的病毒DNA,比常规PCR检测方法高约100倍,敏感性较强;该方法检验猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型呈现阴性结果,特异性强;变异系数小于1%,具有良好的重复性。本研究建立的实时荧光定量PCR方法为临床上对伪狂犬病毒的检测和定量奠定了坚实基础。
- 田青郑浩童武刘飞梁超曹艳云郑旭晨童光志李国新
- 关键词：伪狂犬病毒B基因荧光定量PCR
