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猪伪狂犬病毒变异株全长基因组测序及遗传演化分析: 伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的以发热、奇痒、脑脊髓炎为主要特征的一种烈性传染病,它养猪业危害极大,常在猪群中爆发流行。2011年以来全国多个省份使用gE基因缺失活疫苗免疫的规...; 张青占童武刘飞郑浩周艳君童光志

猪伪狂犬病毒gB、gC和gD蛋白多抗制备及交叉中和抗体效价测定被引量：7: 2016年; 为研究猪伪狂犬病毒（PRv）主要免疫原性基因的抗原变异情况，本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔，对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价的i／n,4定。结果显示，JS．2012和Bartha．K61株的gC蛋白和gD蛋白多抗对PRVJS．2012变异株、SC经典强毒株和Bartha．K61弱毒疫苗株的交叉中和效价均无显著差异；而两个病毒株的2B蛋白多抗对JS．2012和sc株的中和效价较低，分别为1：29．0～56．7和1：56．2～137．0，对Bartha—K61株以及其他毒力基因缺失弱毒疫苗株的中和效价较高，分别为1：75．0--490．0和1：198．6～986．9，差异显著，推测该结果可能与PRV毒力基因缺失有关。本研究为进一步鉴定PRV流行株的抗原变异奠定基础。; 刘飞童武梁超杨莘郑浩童光志; 关键词：猪伪狂犬病毒多克隆抗体

表达海肾或萤火虫荧光素酶基因的PRRSV重组质粒的构建方法以及应用: 本发明提供了一种表达海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶基因的蓝耳病病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法，及其应用。基于反向遗传操作平台，将海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶基因插入到pHuN4‑F112基因组中，成功构建了pA‑Rl...; 高飞童光志周艳君姜一峰曲泽惠李丽薇虞凌雪郑浩; 文献传递

表达猪瘟病毒E2蛋白重组PRRS病毒基因工程疫苗的构建方法和应用: 本发明提供了一种表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法，以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗。基于反向遗传操作平台，根据猪瘟石门株和猪瘟兔化弱毒株C株的E2基因，以及高致病...; 童光志高飞姜一峰曲泽慧周艳君李国新虞凌雪李丽薇杨莘郑浩童武夏天奇

乙型脑炎病毒反向遗传系统的构建: 乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)属黄病毒科黄病毒属,是一种重要的蚊传人兽共患病病原。近年来,我国出现基因I型(genotype I,GI)JEV,并逐渐成为主要流行基因型。本...; 郑浩郑旭晨郭亦非童武童光志

一种非洲猪瘟病毒的抗原表位肽及其应用: 本发明公开一种猪瘟抗原表位肽，所述猪瘟抗原表位肽包括非洲猪瘟病毒蛋白p12和p17中的多个抗原表位，而且通过生物信息学分析，对其中个别氨基酸进行了替代或者改变，同时考虑到高级空间结构，个别抗原表位之间通过柔性linker...; 高飞童光志周艳君李丽薇童武郑浩刘长龙姜一峰李国新

利用BAC/gal K系统构建缺失潜伏相关转录物启动子LAP1的伪狂犬病突变病毒被引量：1: 2019年; 伪狂犬病病毒感染猪后,在耐过猪中均能形成潜伏感染。在潜伏感染期间,病毒基因组仅大量转录病毒潜伏相关转录物(latency-associated transcripts,LATs)。为了研究潜伏相关转录物启动子对LAT表达特征的影响,通过构建缺失LAT启动子LAP1、并添加绝缘子cHS4的供体质粒,利用感染性细菌人工染色体克隆(bacterial artificial chromosome,BAC)操作平台和galK(半乳糖激酶)正负筛选系统,获得BAC载体pBAC-JS-cHS4-△LAP1b,BAC载体与质粒pcDNA3.1-cre共转染Vero细胞后获得突变病毒vJS-cHS4-△LAP1b。空斑和生长曲线结果显示,vJS-cHS4-△LAP1b与亲本病毒具有相似的生物学特性。vJS-cHS4-△LAP1b感染Vero细胞后,RT-PCR检测显示表达大的潜伏相关转录本(large latency transcripts,LLT)。vJS-cHS4-△LAP1b的构建为深入研究LAT表达特征及功能提供了依据和基础。; 陈静张丽荣童武叶超童光志郑浩; 关键词：伪狂犬病病毒

猪SAMHD1基因、蛋白、单克隆抗体及其应用: 本发明公开了一种猪SAMHD1基因，该基因序列包含编码SEQIDNO.1所示氨基酸序列的核苷酸序列。本发明还公开了猪SAMHD1蛋白质，该蛋白质具有SEQIDNO.1所示氨基酸序列。本发明还公开了抗猪SAMHD1蛋白的单...; 童光志杨莘周艳君姜一峰单同领童武郑浩; 文献传递

猪圆环病毒3型Cap蛋白的原核表达被引量：4: 2021年; 为获得具有良好抗原性的猪圆环病毒3型(PCV3)Cap重组蛋白,根据本实验室已测序获得的1株全基因组序列设计特异性引物,以阳性病料中提取的病毒DNA基因组为模板,通过PCR方法扩增得到PCV3的去核定位信号的Cap蛋白基因,将目的片段插入到pCold TF载体中构建pCold TF-dPCV3-Cap重组质粒,然后将其转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,通过优化表达和纯化条件,最终获得纯度较高的Cap重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,该蛋白能够在上清液中大量表达,并且在IPTG终浓度为1 mmol/mL、16℃诱导20 h的条件下表达量最高;Western blot结果证实通过磁珠纯化后的目的蛋白与PCV3阳性血清能够发生特异性反应。因此,重组Cap蛋白具有良好的反应原性和特异性,可以作为研制PCV3多表位基因工程疫苗和血清抗体诊断方法的候选靶抗原。; 王帅勇汪琪朱世强姚云虞凌雪刘晓敏单同领郑浩周艳君童武李国新高飞童光志于海; 关键词：原核表达 CAP蛋白

伪狂犬病病毒变异株gE单克隆抗体的制备: <正>2011年以来,我国发生了由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株引起的猪伪狂犬病,给我国养殖业带来了巨大的经济损失。2012年我们分离到一株PRV变异毒株(JS-2012株),与经典强...; 武吉强徐晶晶叶超童武王涛郑浩李国新童光志; 关键词：杂交瘤细胞; 文献传递

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郑浩