付建平
- 作品数：9 被引量：13H指数：3
- 供职机构：江西师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 草鱼自噬相关基因Beclin1的克隆及其在MC-LR胁迫下的表达特征被引量：5
- 2019年
- 为评估微囊藻毒素-LR (MC-LR)对鱼类自噬的影响,根据转录组测序结果得到的EST序列,采用RACE技术获得了草鱼(Ctenopharygodon idella)自噬基因Beclin1 (CiBeclin1)的cDNA全长序列。该基因序列全长1590 bp,包括1344 bp的开放阅读框,编码447个氨基酸,分子量为51.2 kD,理论等电点为4.88。CiBeclin1包含1个BH3和1个ECD结构域。CiBeclin1氨基酸序列与其他物种的相似性为88%—98%,构建的进化树显示CiBeclin1与稀有鲫(Gobiocypris rarus)的Beclin1亲缘关系最近。实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测结果表明, CiBeclin1在肝、肾、脾等10种不同组织中均广泛表达,但在肝脏组织中的相对表达量最丰富,显著高于相对表达量最低的头肾组织(P<0.05)。在不同剂量(25和100μg MC-LR/kg BW) MC-LR胁迫24h、48h、72h和96h后,草鱼肝脏中CiBeclin1表达量均显著低于对照组的表达水平,研究结果表明, MC-LR能抑制草鱼CiBeclin1的表达,但MC-LR是否在该剂量下诱导了草鱼的自噬还有待于进一步研究。
- 何丽阮记明刘毅付建平刘林隗黎丽
- 关键词：草鱼BECLIN1克隆MC-LR
- 试误法在生物化学实验设计中的应用
- 2020年
- 生物化学实验是生命科学领域重要专业基础课之一,在训练学生基本技能、实践和创新能力上起到重要作用。以温度、激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响为例,通过“试误法”认识操作细节、唾液淀粉酶用量、反应时间等基本因素对实验成功的重要性后引导学生设计严谨的实验方案探讨温度、激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响,以培养学生动手能力、发现问题和解决问题的能力以及培养严谨的科学态度,为科研创新人才培养奠定基础。
- 付建平王伟英刘毅赵昕
- 关键词：生物化学唾液淀粉酶酶活性
- 草鱼幼鱼肝胰脏抗氧化系统对MC-LR胁迫的响应被引量：3
- 2019年
- 为了研究微囊藻毒素(MC-LR)对草鱼(Ctenopharygodon idella)幼鱼肝胰脏抗氧化防御系统的影响,本研究通过腹腔注射的方法(剂量为25、100μg MC-LR·kg-1,分别称为低剂量和高剂量),对草鱼幼鱼进行染毒,于胁迫24、48 h和72 h后分离其肝胰脏,随后采用分光光度法检测了草鱼幼鱼肝胰脏中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;同时采用荧光定量PCR方法分析了SOD、CAT、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽还原酶(GR)基因相对表达量的变化。结果显示:高剂量MC-LR诱导24 h和48 h后,草鱼幼鱼肝胰脏SOD活性显著增加(P<0.05),而SOD在低剂量组中活性没有显著变化(P>0.05);低剂量MC-LR对CAT活性没有显著影响(P>0.05),而高剂量MC-LR诱导24 h后可使草鱼幼鱼肝胰脏CAT活性显著增加(P<0.05),随后其活性又下降,但差异不显著(P>0.05)。在MC-LR胁迫过程中,SOD、CAT、GPx基因表达在两个剂量组中均显著低于对照组(P<0.05),而GR基因在低剂量MC-LR胁迫24 h后相对表达量显著上调(P<0.05),尽管在72 h相对表达量上调,但差异不显著(P>0.05),而高剂量组中GR基因在胁迫24 h和48 h后,其表达量被抑制,但不存在显著差异(P>0.05)。进行抗氧化酶活性和基因表达相关性分析发现,SOD和CAT酶活性与SOD和CAT基因表达不相关。上述研究表明MC-LR对草鱼幼鱼肝胰脏抗氧化系统产生了明显的胁迫效应,但MC-LR对机体抗氧化酶活性与基因编码调控之间的相互作用机制还有待更深入的研究。
- 隗黎丽何丽阮记明刘毅付建平钟其旺
- 关键词：微囊藻毒素-LR草鱼肝胰脏抗氧化
- 草鱼凋亡相关基因Caspase9基因克隆及镉胁迫下的表达
- 细胞凋亡是鱼类发育过程中的一种生理性保护机制,在鱼类生长发育过程中具有重要作用。本研究采用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术首次扩增出草鱼凋亡相关基因Caspase9的cDN...
- 付建平隗黎丽李海军丁红秀刘毅张明
- 关键词：草鱼CASPASE9克隆原核表达
- 文献传递
- 中华鳖IRF4基因克隆及免疫功能研究被引量：1
- 2019年
- 干扰素调节因子IRF4基因仅表达于免疫相关细胞,在先天性免疫和特异性免疫中发挥重要作用。本研究根据中华鳖高通量测序预测的IRF4基因序列(GenBank登录号:XM_014581444),设计特异性引物扩增片段验证其编码区;通过荧光定量检测IRF4基因在健康中华鳖中组织表达情况以及脂多糖、聚肌胞苷酸诱导后在外周血淋巴细胞中的表达情况;构建真核表达载体p3xflag-IRF4,检测过表达IRF4基因后细胞对中华鳖虹彩病毒的敏感性,以及对干扰素启动子、NF-κB启动子的活性。试验结果显示,IRF4基因编码区和GenBank中序列完全相同,其推测的氨基酸序列含有1个DNA结合结构域和1个IRF相关结构域;荧光定量结果分析显示,IRF4基因表达于所检测的组织和器官,其中在血液、肝、脾中表达较高,脂多糖和聚肌胞苷酸均能诱导外周血淋巴细胞中IRF4基因的表达;过表达IRF4基因后降低细胞对中华鳖虹彩病毒的敏感性,过表达IRF4基因能显著诱导干扰素启动子活性,抑制NF-κB启动子活性。上述结果为更深入研究中华鳖IRF4参与机体免疫应答提供基础。
- 付建平陈丹婷赵昕刘毅
- 关键词：中华鳖干扰素NF-ΚB
- 草鱼凋亡相关基因BCL-2基因克隆及在镉胁迫下的表达
- 凋亡相关基因BCL-2定位于细胞内质网膜、核膜和线粒体外膜上,在抑制线粒体应激发生内源细胞凋亡中发挥重要作用。本研究采用RACE(rapid amplification of cD NA ends)技术首次扩增出草鱼凋亡...
- 付建平隗黎丽李海军丁红秀刘毅张明
- 关键词：草鱼BCL-2克隆原核表达
- 文献传递
- 镉胁迫对草鱼肝抗氧化酶系统与显微结构的影响
- 镉进入动物体内能诱导机体通过不同途径产生大量的活性氧自由基（reactive oxygen species,ROS）,扰乱抗氧化系统并导致细胞氧化损伤。本研究在光镜下观察草鱼肝脏石蜡切片的显微结构,并检测了肝组织中过氧化...
- 付建平隗黎丽李海军丁红秀刘毅张明
- 关键词：草鱼镉胁迫抗氧化酶
- 文献传递
- 三角帆蚌热休克蛋白70基因克隆及其表达分析被引量：3
- 2017年
- 对三角帆蚌HSP70基因序列进行全长克隆及其分子生物学分析,并检测其在不同水温刺激下鳃组织中的表达变化。通过高通量转录组测序获得三角帆蚌HSP70基因(Hc HSP70)长片段,采用3′RACE对其进行了3′末端克隆,经拼接得到Hc HSP70 c DNA全长序列。采用多种分子生物学软件对Hc HSP70 c DNA全长序列进行了特征分析,采用实时荧光定量PCR技术检测了其组织分布,并结合Western-blot技术检测蚌鳃中该基因m RNA与蛋白经不同水温刺激后的表达变化。结果显示,Hc HSP70 c DNA全长为2298 bp,其中开放阅读框为1974 bp,编码657个氨基酸。预测分子量大小为71.6 Ku,p H7.0时的理论等电点为5.61。氨基酸序列分析表明,Hc HSP70氨基酸序列含HSP70家族的3个标签序列(I9DLGTTYS16、I197FDLGGGTFDVSIL210和I336VLVGGSTRIPKVQK350),与长牡蛎及泥蚶的HSP70同源性最高(91%)。实时荧光定量PCR检测结果显示,Hc HSP70在鳃、性腺、肝胰腺、外套膜及肌肉等5种被检组织中均有表达,以肝胰腺中的表达水平最高。实时荧光定量PCR与Western-blot技术检测皆表明,蚌鳃组织中Hc HSP70基因与蛋白的表达量在37℃时达到最高,而在40℃水温刺激下表达水平下调至正常值,表明其在适应高温刺激时发挥了重要作用。
- 吴圣楠隗黎丽李海军付建平刘毅
- 关键词：三角帆蚌热休克蛋白70基因表达
- 强心合剂对糖尿病心肌病大鼠心肌结构及胶原蛋白表达的影响被引量：2
- 2019年
- 目的构建糖尿病心肌病(DCM)大鼠模型,探讨强心合剂对DCM大鼠心肌组织胶原蛋白表达的影响。方法以高糖高脂饲料对大鼠进行喂养,辅助注射链脲佐菌素(STZ)予以造模,随机将SD大鼠划分成6个组:空白组、强心合剂高、中、低剂量组、DCM模型组以及卡托普利组,每组各30只。通过葡萄糖氧化酶法对空腹血糖进行测定;以放免法来检测胰岛素;HE染色测定大鼠心肌病变情况;运用免疫组化法对大鼠体内的心肌组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)以及Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)的表达进行测定。结果强心合剂高、中、低剂量组、卡托普利组的空腹血糖水平均低于DCM模型组,胰岛素水平均高于DCM模型组,差异有统计学意义(P<0.05);强心合剂高、中、低剂量组、卡托普利组大鼠的MMP-9、CollagenⅢ、CollagenⅠIOD值均低于DCM模型组,差异有统计学意义(P<0.05);强心合剂中、低剂量组和卡托普利组大鼠的MMP-9、CollagenⅢ、CollagenⅠIOD值均高于强心合剂高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论强心合剂有助于缓解大鼠心肌损伤、降低血糖、升高胰岛素,下调大鼠心肌组织MMP-9、CollagenⅢ以及CollagenⅠ胶原蛋白的表达,为DCM大鼠心肌提供保护,且高剂量的作用更加明显。
- 宋春晖龚志刚李林付建平唐娜娜刘中勇
- 关键词：糖尿病心肌病强心合剂胶原蛋白基质金属蛋白酶
