余磊
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 供职机构：福建农林大学园艺学院更多>>
- 发文基金：福建省科技重大专项国家科技支撑计划星火计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- ‘三红蜜柚’果实类胡萝卜素合成途径部分酶基因的克隆及表达分析被引量：5
- 2018年
- 果实颜色是柚(Citrusmaxima)的重要性状之一,为了解其色泽调控机理,本研究以‘三红蜜柚’为材料,从柚转录组数据库(未发表)中筛选得到CmPSY、CmPDS、CmZDS和CmLCYB的序列,分别编码438、533、570、214个氨基酸。生物信息学表明,CmPSY、CmPDS、CmZDS和CmLCYB编码的氨基酸序列与可可树、木薯和甜橙的同源相似度较高,尤其是与甜橙的同源性分别高达97.95%、99.81%、97.89%和100%。实时荧光定量PCR检测结果表明,CmPSY、CmPDS、CmZDS和CmLCYB在蜜柚的汁胞、囊衣和海绵层中均有表达,且表达量基本都呈先增后降的趋势,说明这些基因在蜜柚类胡萝卜素代谢中不可或缺。4个基因表达水平基本都在花后150～180 d达到最大,说明这些基因之间有着密切的协作关系。本研究为类胡萝卜素在蜜柚果实各个组织的调控提供了研究信息,并为进一步通过基因调控来提高蜜柚的外观品质奠定了基础。
- 余磊潘腾飞张蒙郑嘉敏龚江美韦爱玉蔡灿军潘东明
- 关键词：PDS基因克隆
- 中国水仙FOMT2基因及启动子的克隆与分析被引量：1
- 2018年
- 为探究花色基因FOMT2在中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)类黄酮代谢途径中的功能作用,以期明确小分子化合物甲基化修饰在水仙类黄酮代谢中的作用,本研究以多花水仙"金盏银台"(Narcissus tazetta var.chinensis‘jinzhanyintai’)不同时期的花器官为材料,提取总RNA,采用RACE与RT-PCR结合的方法,克隆得到NtFOMT2基因的cDNA全长。结果表明:NtFOMT2基因的cDNA全长为1 404 bp,其中5′UTR长度为33 bp,3′UTR长度为279 bp,开放阅读框为1 092 bp,共编码363个氨基酸。定量PCR分析结果表明,NtFOMT2基因表达水平在水仙花器官的不同时期差异很大,其表达模式表现为Ⅱ>Ⅰ>Ⅲ>Ⅳ。此外,为分析水仙花色素基因的调节因素,以基因组DNA为模板,采用染色体步移法,成功克隆并分析NtFOMT2基因的5’端调控序列。结果表明,NtFOMT2基因启动子序列除包含起始转录位点(transcription start site,TSS)TATA-box、CAAT增强子外,还包含多个顺式作用元件,如ACE、ATCT-motif、G-box、Sp1等多个光响应元件。此外,该启动子序列还含有MYB参与抗旱诱导的结合位点MBS元件、MYB转录因子结合位点等。
- 张蒙潘腾飞余磊余磊杨华丽
- 关键词：中国水仙基因克隆启动子类黄酮
- ‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化与不同组分POD活性的关系被引量：3
- 2016年
- 为了研究‘红肉蜜柚’[Citrus grandis(L.)Osbeck.cv.Hongrou miyou]果实汁胞粒化过程中不同结合态过氧化物酶(POD)的变化,以及赤霉素处理对此的影响。以赤霉素处理和未经赤霉素处理的‘红肉蜜柚’果实的近中柱和远中柱汁胞为材料,统计粒化指数后,进行POD提取体系筛选与酶活测定。发现‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化指数逐渐上升,有无赤霉素处理无明显变化;可溶性POD最佳提取体系为pH8.0,0.1 mol/L Tris-HCl的缓冲液;离子结合POD的为含0.1%Triton和1 mol/L Na Cl的pH8.0,0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液;未检测到共价结合POD活性。此外,可溶性、离子结合POD活性在生长发育过程中整体呈下降趋势,且无论是否经赤霉素处理,近中柱与远中柱汁胞的可溶性POD活性均存在极显著差异(p<0.01),而离子结合POD活性均无显著差异(p>0.05);无论近中柱或远中柱,有无赤霉素处理的可溶性POD均存在极显著差异(p<0.01),而离子结合POD活性仅在远中柱汁胞中有极显著差异(p<0.01)。所以,可溶性POD可能与汁胞粒化关系密切,而离子结合、共价结合POD和赤霉素对汁胞粒化的影响有待进一步研究。
- 徐世荣潘鹤立吴嘉玲宋敏娜李小婷张智伟余磊潘东明
- 关键词：粒化POD活性赤霉素
- ‘红肉蜜柚’CmMYB330基因的分离与表达分析被引量：6
- 2017年
- 【目的】分析‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化相关的MYB转录因子基因特征与表达模式,探讨MYB转录因子在蜜柚汁胞木质素代谢过程中的作用机制,为研究蜜柚汁胞粒化发生机制提供借鉴。【方法】以‘红肉蜜柚’果实汁胞为试材,参考甜橙MYB全基因组分析,利用生物信息学分析和PCR技术克隆Cm MYB330的编码区序列及其5’端调控序列,并对序列进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR技术对Cm MYB330在‘红肉蜜柚’果实汁胞不同发育时期和不同部位的表达情况进行分析。利用农杆菌介导法将Cm MYB330与GFP的融合表达载体注射转化到烟草叶片中进行亚细胞定位分析。利用酵母双杂交系统对Cm MYB330进行转录激活活性分析。【结果】Cm MYB330的编码区序列长度为942 bp,编码313个氨基酸,预测为核定位蛋白,为典型的R2R3 MYB转录因子。Cm MYB330与甜橙Cs1g19400.1、Am MYB330等亲缘关系近,都属于R2R3 MYB第4亚组。Cm MYB330的5’端调控序列为起始密码子上游-1 748 bp序列,预测该序列含有TATA-box、CAAT-box 2个启动子核心元件,3个MBS,1个AC-I,1个5UTR Py-rich stretch,还有大量激素(如赤霉素、乙烯、水杨酸等)响应元件。Cm MYB330表达量在‘红肉蜜柚’果实汁胞发育过程中有起伏,但总体呈现上升趋势,表达量在花后208 d达到最大,之后开始下降。在转化p-super1300-Cm MYB330-GFP的烟草叶片细胞核中检测到绿色荧光信号,与预测结果一致,说明Cm MYB330定位在细胞核中。在Y2H Gold酵母中,Cm MYB330表现为没有转录激活活性。【结论】克隆了‘红肉蜜柚’MYB转录因子Cm MYB330编码区序列及其5’端调控序列,Cm MYB330属于R2R3 MYB第4亚组,与汁胞粒化相关,为核定位蛋白,同时分析了其在‘红肉蜜柚’果实汁胞发育过程中的表达水平,总体呈上升趋势。为进一步研究Cm MYB330与蜜柚汁胞粒化的关系奠定了基础。
- 杨华丽蔡韡韡吕恃衡徐世荣余磊潘腾飞潘东明
- 关键词：转录因子
- ‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化过程中POD同工酶谱分析被引量：4
- 2016年
- 【目的】探讨‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化过程中过氧化物酶(POD)的同工酶变化及赤霉素对其的影响。【方法】以赤霉素处理和未经赤霉素处理的‘红肉蜜柚’果实的近中柱和远中柱汁胞为材料,统计粒化指数后,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行可溶性和离子结合POD同工酶谱测定。【结果】发现‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化指数随着果实生长发育呈先平稳后急剧上升的趋势,有无赤霉素处理无明显变化;可溶性POD中存在酸性POD和碱性POD,有无赤霉素处理对近、远中柱POD出现的时期和组分基本没有影响;离子结合POD只存在碱性POD,近中柱POD同工酶谱分离出6条(5条为果实发育后期的特异性谱带)、远中柱POD分离出4条,两者出现的时期和组分差异较大,赤霉素处理使近中柱5条果实发育后期特异性谱带减为3条且时期提前,而赤霉素处理下的远中柱没有检测到谱带。【结论】粒化时期,离子结合POD出现的5个特异性碱性POD可能与汁胞粒化关系密切,赤霉素处理可明显减少POD谱带,但赤霉素对汁胞粒化的影响有待进一步研究。
- 徐世荣潘鹤立吴嘉玲丁安琪吕恃衡潘东明余磊张智伟李小婷
- 关键词：粒化POD同工酶谱
