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张世勋: 作品数：10 被引量：44H指数：4; 供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划黑龙江省科技攻关计划黑龙江省青年科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

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阳离子表面活性剂与戊二醛复合消毒剂毒性评价被引量：3: 2018年; 目的了解一种阳离子表面活性剂与戊二醛复合消毒剂的安全性,评价其毒性。方法采用急性经口毒性试验、皮肤刺激试验、急性眼刺激试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验等评估复合消毒剂的安全性。结果该复合消毒剂原液急性经口毒性试验LD50>5 000 mg/kg;对完整皮肤和眼无刺激性;各剂量组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率和精子畸形率与阴性对照相比无显著性差异,与阳性对照差异显著。结论该复合消毒剂无毒性,安全性良好。; 刘珊珊陈楠楠王天何泊宁刘增禄张世勋周金玲岳山刘通赵尚琪赫鸣睿王丽刘宇朱战波; 关键词：阳离子表面活性剂戊二醛毒性评价

黑龙江省部分地区进口荷斯坦奶牛病毒性腹泻血清流行病学调查被引量：4: 2018年; 为了解黑龙江省进口荷斯坦奶牛感染牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的情况,试验采用原核表达蛋白E0-E2为抗原,建立间接ELISA法,检测奶牛血清中BVDV的抗体。结果表明:九三地区的BVDV抗体阳性率最高,达到了72.22%;密山地区阳性率最低,但也达到了59.91%;北安地区阳性率为61.84%,总体血清阳性率为64.35%。说明病毒性腹泻在黑龙江省存在非常高的血清阳性率,提示必须加强对本病的检疫净化,采用间接ELISA法对不同牛群进行BVDV抗体检测,可以及时了解病毒性腹泻的感染清况,为防治该病提供理论依据。; 赵静虎刘宇王华欣刘通周金玲岳山何泊宁刘珊珊张世勋王天刘增禄朱战波; 关键词：荷斯坦奶牛牛病毒性腹泻病毒血清阳性率

牛外周血淋巴细胞PD-1胞外区基因的原核表达及多抗制备被引量：1: 2021年; 目的原核表达牛外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBL)表面程序性细胞死亡蛋白-1(programmed cell death protein 1,PD-1),并制备其多抗血清。方法以PBL的cDNA为模板扩增牛PD-1胞外区片段,与载体pET-28a(+)连接,构建重组质粒pET-28a-PD-1,并进行生物信息学分析;重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),经不同浓度的IPTG诱导表达牛PD-1胞外区重组蛋白(简称牛PD-1蛋白),产物进行SDS-PAGE及Western-blot分析;纯化的目的蛋白免疫小鼠制备血清多抗,与CP、NCP型牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)体外孵育牛PBL 72 h,检测BVDV病毒拷贝数。结果经双酶切及测序鉴定,重组质粒pET-28a-PD-1构建正确;牛PD-1胞外区基因读码框编码147个氨基酸,相对分子质量约为16040,其二级结构主要由α螺旋、延伸链、无规则卷曲构成,与人及鼠序列的同源性分别为79%和71%;在37℃,0.8 mmol/L IPTG诱导条件下,牛PD-1蛋白相对分子质量约19000,以包涵体的形式表达;制备的多抗血清效价最高为1∶102400,能与目的蛋白发生特异性反应,显著降低CP、NCP型BVDV病毒拷贝数(P<0.05)。结论成功构建了重组表达质粒pET-28a-PD-1,获得了牛PD-1蛋白及其多抗血清,且免疫原性较好,PD-1阻断抑制BVDV在PBL细胞中的复制,为开发具有调节及治疗慢性病毒感染的生物制品奠定基础。; 刘珊珊吴陈华刘宇刘宇赫鸣睿王丽王天何泊宁王天岳山黄雯静张世勋; 关键词：原核表达

牛产气荚膜梭菌分离株毒素基因的检测与分析被引量：4: 2019年; 为了解黑龙江省牛源产气荚膜梭菌分离株的基因型,检测β2和CPE两种次要毒素因子在牛源产气荚膜梭菌分离株中的携带情况。通过PCR方法检测了产气荚膜梭菌13个野毒株的cpa、cpb、etx、itx四种分型毒素、cpb2、cpb2的两个等位基因突变体(atypical cpb2和consensus cpb2)及肠毒素(cpe)基因。结果表明:92.3%(12/13)的产气荚膜梭菌分离株为A型,检测到1株D型;A型菌中β2毒素基因检出率为66.7%(8/12);β2毒素基因阳性菌株中75%(6/8)携带非典型cpb2基因,50%(4/8)携带典型cpb2基因,非典型突变体占优势。动物致病性试验发现β2毒素阳性菌株(8株)与β2毒素基因阴性菌株(4株)各有2株分离株具有致病性。所有菌株CPE毒素基因PCR检测均为阴性。研究为产气荚膜梭菌病的发病机理和疫苗开发提供了理论依据。; 刘增禄赫鸣睿周金玲何泊宁王天赵尚琪王丽张世勋刘珊珊岳山刘通刘宇朱战波; 关键词：产气荚膜梭菌

IBRV TaqMan-MGB实时荧光定量PCR方法在BVDV和IBRV共感染中病毒定量检测的应用被引量：4: 2018年; 目的应用牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)Taq Man-MGB实时荧光定量PCR方法进行牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和IBRV共感染的病毒定量检测,进一步研究BVDV和IBRV共感染后BVDV对IBRV复制的影响。方法分别用0.2和1.0 MOI的BVDV感染MDBK细胞,待细胞出现50%CPE时,再用0.1 MOI的IBRV共感染,作用24 h后收集样品,采用Taqman-MGB实时荧光定量PCR方法检测IBRV的拷贝数,并与对照组(IBRV单独感染组)进行比较。结果在先感染0.2和1.0 MOI BVDV情况下,IBRV拷贝数分别为3.0×10~6和6.47×10~6拷贝/μL,单独感染IBRV的对照组的拷贝数为1.15×10~7拷贝/μL。结论在体外情况下,BVDV对IBRV的复制影响较小,为研究BVDV和IBRV的共感染机制以及制备BVDV和IBRV感染同一细胞的二联苗奠定了基础。; 王华欣刘宇赵静虎刘通周金玲岳山何泊宁刘珊珊张世勋王天刘增禄朱战波; 关键词：牛病毒性腹泻病毒牛传染性鼻气管炎病毒病毒载量

某牛场犊牛呼吸道疾病的诊断与药敏试验被引量：6: 2018年; 2017年3月份,黑龙江省五常市某规模化奶牛场发生犊牛急性肺炎,为了确诊其病因,无菌采取7份呼吸道症状犊牛鼻拭子进行细菌分离鉴定,同时进行生化试验、PCR鉴定和药敏试验。结果表明：共分离得到3株细菌,符合大肠杆菌、巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌生化特性;PCR引物能有效扩增巴氏杆菌OmpH基因、溶血性曼氏杆菌lkt A基因和大肠杆菌Sta基因;分离的大肠杆菌对恩诺沙星、环丙沙星、阿米卡星中敏,巴氏杆菌对恩诺沙星、阿莫西林、青霉素高敏,溶血性曼氏杆菌对阿米卡星、头孢唑林、青霉素高敏;经检查7份鼻拭子中大肠杆菌感染1份,溶血性曼氏杆菌感染1份,巴氏杆菌感染5份。说明该牛场细菌污染严重,应引起重视。; 赫鸣睿周金玲岳山刘通刘宇何泊宁刘珊珊刘增禄张世勋王天赵尚琪王丽朱战波; 关键词：细菌分离鉴定药敏试验巴氏杆菌

黑龙江某规模化场奶牛急性乳房炎病原分离鉴定与药敏实验被引量：6: 2016年; 2016年5月,黑龙江省某规模化牛场爆发急性乳房炎,为确诊其病因,无菌采取10份乳样进行细菌的分离鉴定,并对分离菌株进行培养特性检查、生化试验鉴定和药敏试验。经检查10份乳样中大肠杆菌单独感染1例,葡萄球菌单独感染1例,链球菌单独感染1例,葡萄球菌和链球菌混合感染4例,葡萄球菌和酵母菌混合感染2例。该研究为该牛场奶牛乳房炎的病因分析和防治提供了指导。; 刘通刘宇赵静虎王华欣周金玲岳山何泊宁刘珊珊张世勋王天刘增禄朱战波; 关键词：奶牛乳房炎细菌分离鉴定药敏试验

黑龙江某牛场腹泻犊牛大肠杆菌致病株分离鉴定及耐药性和耐药基因检测被引量：7: 2016年; 为了解黑龙江省绥化市某规模化奶牛场腹泻犊牛大肠杆菌分离株的耐药性及耐药基因携带情况,在2016年4月,收集该牛场群发腹泻犊牛的8份粪便,通过细菌分离鉴定,生化实验等鉴定方法,确定牛群腹泻的病因为大肠杆菌感染。结果显示对氟苯尼考,多粘菌素B高度敏感,对青霉素具有较强的耐药性,耐药率达100%,其四环素、环丙沙星、恩诺沙星耐药率达75%;应用PCR方法检测大肠杆菌耐药基因,共检出5种耐药基因,分别为bla TEM、tet A、Sul2、aac(3)-Ⅱ、Par C。表明该牛场大肠杆菌分离株的耐药现象特别严重,提示该养殖场应合理使用抗生素。; 岳山刘宇刘通周金玲王华欣赵静虎何泊宁刘珊珊张世勋王天刘增禄朱战波; 关键词：犊牛药敏试验 PCR 耐药基因

牛产气荚膜梭菌黑龙江分离株的分型鉴定被引量：7: 2016年; 为了对三株未知型牛源产气荚膜梭菌(Clostridium Perfringens,Cl.perfringens)进行基因分型鉴定,将三株未知型菌株进行厌氧培养、纯化,观察培养特性,进行革兰氏染色镜检以及生化管鉴定,根据产气荚膜梭菌α、β、ε和ι毒素基因以及产气荚膜梭菌16S r RNA保守基因分别合成5对引物,建立PCR方法。经培养特性、革兰氏染色镜检、生化特性以及16S r RNA保守基因细菌PCR鉴定均符合产气荚膜梭菌,PCR结果表明,三株产气荚膜梭菌均为A型。; 王华欣刘宇赵静虎刘通周金玲岳山何泊宁刘珊珊张世勋王天刘增禄朱战波; 关键词：产气荚膜梭菌 RRNA PCR 基因分型

黑龙江省某规模化奶牛场牛病毒性腹泻病毒qRT-PCR结合双抗夹心ELISA的检测被引量：3: 2019年; 为了对黑龙江省规模化奶牛场牛病毒性腹泻/黏膜病进行检疫净化,试验应用qRT-PCR法检测了黑龙江省4个规模化奶牛场(A^D场)奶牛耳组织样品(共1286份,58组),qRT-PCR法检测得到的阳性组样品再用双抗夹心ELISA进行每份样品的检测。阳性牛间隔1个月用RT-PCR方法复检。结果表明:A场牛病毒性腹泻病毒阳性率为0.5%(1/193),B场为0.1%(2/875),C场为1.8%(1/55),D场未检测出牛病毒性腹泻/黏膜病抗原阳性牛(0/163)。间隔1个月,用RT-PCR方法复检,阳性符合率100%。说明qRT-PCR结合双抗夹心ELISA方法适合于规模化奶牛场牛病毒性腹泻/黏膜病的快速、特异性的检疫净化。; 张世勋赫鸣睿于洪江何泊宁赵尚琪王丽吴陈华黄雯静王天王天岳山刘宇翟军军岳山朱战波; 关键词：奶牛牛病毒性腹泻病毒 QRT-PCR 检疫

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