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张艳丽

作品数:7 被引量:18H指数:3
供职机构:滨州医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省高等学校科技计划项目更多>>
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文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生

主题

  • 4篇幽门螺
  • 4篇幽门螺杆菌
  • 4篇螺杆菌
  • 2篇幽门螺杆菌感...
  • 2篇细胞
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  • 1篇疫苗
  • 1篇整合素
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  • 1篇上皮
  • 1篇上皮细胞
  • 1篇生物学
  • 1篇鼠肝
  • 1篇同源
  • 1篇同源重组

机构

  • 7篇滨州医学院

作者

  • 7篇张艳丽
  • 6篇李波清
  • 4篇赵慧琳
  • 3篇张玉梅
  • 3篇柏雪莲
  • 3篇张莹
  • 2篇徐茂磊
  • 2篇孙辉
  • 2篇李娇娇
  • 2篇季晓飞
  • 1篇杜镇镇
  • 1篇耿丽
  • 1篇张静
  • 1篇姚庆收
  • 1篇周玲
  • 1篇杜东龙
  • 1篇杨小平

传媒

  • 5篇中国病原生物...
  • 1篇生物技术
  • 1篇中国药理学与...

年份

  • 4篇2016
  • 3篇2015
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
以链球菌制剂OK432为佐剂的内皮细胞疫苗体内抗小鼠肝癌转移的作用(英文)被引量:1
2015年
目的评估OK432作为佐剂制备的内皮细胞疫苗体内抗肿瘤转移的作用。方法以OK432为佐剂,体外混合人脐静脉内皮细胞(HUVEC),制备HUVEC-OK432疫苗。雄性健康BALB/c小鼠尾静脉注射肝癌细胞5×105建立肝癌肺转移模型,皮下注射HUVEC-OK432疫苗,分别在预防性和治疗性免疫中评价HUVEC-OK432疫苗抗肿瘤转移活性;皮内注射5×104肝癌细胞建立皮内肿瘤血管模型,皮下注射HUVEC-OK432疫苗,评价HUVEC-OK432疫苗抑制肿瘤新生血管的活性;采用ELISA的方法测定小鼠免疫血清中HUVEC抗体水平;采用细胞毒T淋巴细胞(CTL)实验考察HUVEC-OK432疫苗诱导的细胞免疫应答水平。结果肺转移模型结果显示,在预防性和治疗性免疫中,HUVEC-OK432免疫均能有效降低小鼠肺上的肿瘤转移灶数目(P<0.01);皮内肿瘤血管模型的结果显示,HUVEC-OK432免疫能显著降低肿瘤新生血管的数目(116.5±20.6 vs 45.0±8.9,P<0.01);ELISA测定抗体的结果显示,HUVEC-OK432初次免疫后1周小鼠即产生了高滴度的特异性HUVEC抗体,随免疫次数的增加抗体水平不断升高,且该抗体在体外可以显著抑制HUVEC细胞的增殖;CTL实验的结果表明,HUVEC-OK432免疫组淋巴细胞体外有明显的特异性杀伤HUVEC的作用。结论 HUVEC-OK432疫苗免疫可以有效诱导小鼠产生靶向内皮细胞的免疫应答,从而有效抑制小鼠肝癌细胞转移。
徐茂磊张艳丽周玲张静姚庆收杨小平
关键词:脐静脉内皮细胞
整合素β1亚基对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞GES-1凋亡及增殖的影响被引量:3
2016年
目的分析幽门螺杆菌感染胃上皮细胞过程中整合素β1亚基表达的变化,观察整合素β1对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞GES-1凋亡及增殖的影响。方法将幽门螺杆菌与胃上皮细胞GES-1共培养,采用流式细胞术检测整合素β1的表达量变化;应用iRNA技术降低胃上皮细胞GES-1中β1亚基的表达;幽门螺杆菌感染胃上皮细胞及iRNA降低β1的表达后,采用流式细胞术检测细胞的凋亡,采用CCK-8法检测细胞增殖情况。结果幽门螺杆菌感染胃上皮细胞12、24、48h后空白对照组凋亡率分别为(10.80±0.71)%、(12.23±0.06)%和(12.30±2.12)%,Hp感染组凋亡率分别为(24.20±0.14)%、(30.05±2.47)%和(26.40±1.91)%,差异均有统计学意义(t值分别为-26.28、-7.701和-12.855,P<0.05);与幽门螺杆菌共培养6、24、48h胃上皮细胞增殖受到抑制,抑制率分别为(35.00±3.22)%、(40.96±2.45)%和(8.00±3.33)%;幽门螺杆菌与胃上皮细胞GES-1共培养24、48h流式细胞术检测整合素β1表达,空白对照组平均荧光强度(MFI)分别为(1616.33±24.70)和(1834.67±17.01),Hp感染组为(1484.00±60.89)和(1376.00±14.11),差异有统计学意义(t值分别为3.488和35.95,P<0.05);应用iRNA技术降低胃上皮细胞GES-1整合素β1亚基表达24、48h,对照组凋亡率分别为(18.75±3.59)%和(39.75±3.68)%,iRNA组凋亡率分别为(26.25±4.11)%和(55.30±5.57)%,差异有统计学意义(t值为-2.746和-4.656,P<0.05);胃上皮细胞中β1亚基的表达降低后细胞增殖受到抑制,24、36、48、72h抑制率分别为(6.16±1.07)%、(17.15±2.76)%、(10.84±1.34)%和(21.87±1.72)%。结论幽门螺杆菌能降低胃上皮细胞GES-1整合素β1亚基的表达,而且可能通过降低整合素β1亚基的表达促进上皮细胞GES-1的凋亡并抑制其增殖。
陈醒醒张莹孙辉李娇娇张艳丽李波清
关键词:整合素Β1胃上皮细胞幽门螺杆菌IRNA
分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析被引量:2
2016年
目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间的相互作用。利用Modeller 9v2软件,以E.coli的GroEL为基础模建Hp Hsp60的三维结构,再与已知的UreB结构利用AutoDock 4.2软件进行分子共模拟,分析二者的相互作用面和关键氨基酸。结果构建了Hp Hsp60和尿素酶β亚基(UreB)的大肠埃希菌异源表达体系并获得纯化蛋白;Pull-down试验显示部分未融合GST标签的Hsp60出现在GST-UreB的洗脱液中,表明Hsp60与GST-UreB之间存在相互作用;以E.coli的GroEL为基础模建了Hp Hsp60的三维结构,利用docking技术构建UreB与Hp Hsp60的相互作用模型,发现其主要的相互作用面位于Hsp60的α9与UreB的α2之间,其可能形成氢键的关键位点为UreB的α2上的T147氨基酸与Hsp60的α9上的E237、K238。结论 Hp Hsp60能直接与尿素酶β亚基(UreB)相互作用,Hsp60可能通过这种相互作用在UreB成熟过程中发挥分子伴侣功能。这为阐明Hp尿素酶的组装与成熟机制奠定了基础。
赵慧琳季晓飞张艳丽柏雪莲李娇娇陈醒醒张玉梅李波清
关键词:幽门螺杆菌尿素酶HSP60分子伴侣相互作用
CRM197修饰的肿瘤细胞裂解物疫苗抗肝癌作用研究
2015年
[目的]探讨CRM197能否增强H22肝癌细胞裂解物疫苗的抗肿瘤活性。[方法]反复冻融H22细胞制备裂解物,与CRM197偶联,制备H22-CRM197疫苗,以小鼠皮下移植瘤模型考察疫苗抗肿瘤活性,并对免疫学机制进行探讨。[结果]与PBS组相比,H22-CRM197免疫显著降低了荷瘤小鼠肿瘤重量(0.53±0.20 g VS 2.04±0.43 g,p<0.01);与PBS组比较,H22-CRM197组小鼠免疫血清中检测到高滴度的抗-H22抗体(p<0.01);H22-CRM197免疫能够有效地刺激脾淋巴细胞的增殖并诱导产生了明显靶向H22细胞的细胞毒性T淋巴细胞杀伤作用。[结论]CRM197可以显著增强H22肝癌细胞裂解物疫苗的抗肿瘤活性。
张艳丽司春枫张玉梅赵慧琳徐茂磊李波清
关键词:肝癌
幽门螺杆菌感染对LAIR-1影响的实验研究被引量:4
2015年
目的通过构建小鼠感染模型,研究幽门螺杆菌(Hp)感染对白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(LAIR-1)表达的影响。方法将32只C57BL/6小鼠随机分为对照组和感染组。感染组通过Hp菌液灌胃建立小鼠感染模型,对照组以PBS灌胃。6周后处死小鼠,采用胃黏膜分离培养、革兰染色、PCR及生化反应检查Hp定植情况,采用流式细胞术检测小鼠外周血单个核细胞(PBMC)中单核细胞和淋巴细胞表面LAIR-1的表达。结果感染组小鼠Hp感染率为91.3%(21/23)。感染组和对照组小鼠PBMC中单核细胞比例分别为(22.85±3.56)%和(49.85±0.35)%,淋巴细胞比例分别为(40.93±10.05)%和(30.15±0.35)%,差异均有统计学意义(t=5.845和2.137,P<0.05)。感染组和对照组小鼠PBMC表面LAIR-1表达率分别为(70.16±7.75)%和(83.4±0.1)%,淋巴细胞表面LAIR-1表达率分别为(56.81±11.37)%和(72.3±0.6)%,差异均有统计学意义(t=3.761和2.491,P<0.05)。结论 Hp感染下调了小鼠PBMC中单核细胞及LAIR-1的表达,上调淋巴细胞比例但下调其LAIR-1的表达。
孙辉杜东龙张莹张艳丽陈醒醒李波清
关键词:幽门螺杆菌C57BL/6小鼠
基因敲除质粒载体的构建及其在幽门螺杆菌基因敲除中的应用被引量:6
2016年
目的构建用于幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)同源重组双交换基因敲除的质粒载体,实现Hp内基因的快速敲除。方法以质粒pLYL03为骨架,重新排列质粒上的基因元件以减少冗余序列,用卡那霉素抗性基因(aphA)替换原质粒上的红霉素抗性基因作为抗性筛选标记,在抗性筛选标记两端构建多克隆位点用于同源重组同源臂的插入,由此构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK。以质粒pSJHK为载体构建hp0169基因的同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,通过电击转化方法将敲除质粒pSJHK-0169转入Hp中,用卡那霉素筛选转化子。结果以质粒pLYL03为基础构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK,大小4 371bp。以基因hp0169作为目标基因构建同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,经电击转化Hp中,获得卡那霉素抗性阳性转化子,测序确证基因敲除成功。结论构建的基因敲除质粒载体pSJHK实现了对Hp中目标基因的敲除,为Hp新基因功能研究和致病因子的发掘提供了有效的基因操作工具。
季晓飞赵慧琳张莹柏雪莲张艳丽荣倩玉李波清
关键词:幽门螺杆菌基因敲除质粒同源重组
华支睾吸虫parkin蛋白的分子生物学特征研究被引量:3
2016年
目的了解华支睾吸虫Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得Parkin的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自GenBank中与之有较高相似度的基因序列进行分析,构建基因进化树;原核表达重组融合蛋白CsParkin,纯化后免疫Blab/c小鼠,获得多克隆抗体,采用Western blot鉴定天然CsParkin;采用qRT-PCR测定CsParkin基因在不同发育阶段的表达水平。结果 CsParkin蛋白含有5个结构域,分别是Ubl、RING0、RING1、IBR和RING2,具有典型的Parkin蛋白结构;该蛋白与人及各种动物的Parkin有很高的相似度,与其他吸虫有更近的进化关系;Western blot显示原核表达的重组CsParkin,与天然CsParkin分子质量相同,均为45.7ku;CsParkin在囊蚴中的表达量高于成虫;免疫组化显示CsParkin主要分布于成虫受精囊中的精子及口吸盘和睾丸,在囊蚴中广泛分布。结论肝吸虫CsParkin属蛋白于保守蛋白,具有典型的泛素连接酶3的功能结构,推测其在蛋白的泛素化中起到作用,可能在华支睾吸虫的生长过程中发挥作用。
柏雪莲李波清张玉梅张艳丽耿丽杜镇镇赵慧琳
关键词:华支睾吸虫PARKIN泛素连接酶
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