周娟
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：厦门大学附属成功医院更多>>
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- NRP-1b1/b2单克隆抗体对裸鼠胃癌移植瘤生长的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)在胃癌细胞BGC823中的表达情况,并观察自主研发的抗NRP-1 b1/b2单克隆抗体(NRP-1 mAb)对裸鼠胃癌移植瘤生长的影响。方法:基于实验室前期已成功制备出纯度和浓度均较高的NRP-1 mAb。利用流式细胞术检测该抗体亲和性、细胞免疫荧光定位检测NRP-1的分布及NRP-1 mAb特异性。建立胃癌移植瘤裸鼠模型,向移植瘤中注射不同浓度的NRP-1mAb,研究抗体对胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。2周后根据瘤体大小得出抑瘤率。最后免疫组化分析癌组织内血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。结果:胃癌细胞BGC-823上存在NRP-1,且主要分布在细胞膜上,能与自制的NRP-1 mAb有效结合。通过动物实验,NRP-1 mAb能有效抑制移植瘤的生长,高浓度抗体较低浓度对移植瘤抑制作用更明显,NRP-1 mAb治疗组中VEGF表达较空白组低(P<0.01)。结论:胃癌细胞BGC-823细胞膜上表达NRP-1,NRP-1 mAb能特异性结合胃癌细胞上NRP-1蛋白,NRP-1 mAb能抑制胃癌裸鼠移植瘤的生长,且与浓度呈正相关,可能与下调VEGF表达有关。
- 丁园周娟陈玉强颜江华
- 关键词：NRP-1单克隆抗体胃癌裸鼠移植瘤
- NRP-1mAb对胃癌细胞BGC-823增殖的影响
- 2017年
- 目的观察自主研发的抗NRP-1b1/b2IgG单克隆抗体(NRP-1mAb)对胃癌BGC-823细胞生长的影响,并初步探讨可能的作用机制。方法实验室制备NRP-1mAb,采用SDS-PAGE检测纯度。采用0、25、100、200、400μg/ml NRP-1mAb培养胃癌BGC-823细胞,光学显微镜下观察细胞形态学变化;采用MTT法、集落形成实验、流式细胞术观察胃癌细胞BGC-823的增殖、集落形成和凋亡的情况;Western blotting法检测NRP-1mAb作用后Akt、p38、ERK、JNK信号蛋白磷酸化情况。结果SDS-PAGE检测显示,NRP-1mAb的纯度在95%以上。光学显微镜观察显示,NRP-1mAb作用后,BGC-823细胞形态呈凋亡改变。MTT实验显示,NRP-1mAb抑制BGC-823细胞的增殖作用呈浓度和时间依赖性(P<0.01)。集落形成实验显示,不同浓度NRP-1mAb均能显著抑制BGC-823细胞的集落形成,其抑制率呈浓度依赖性(P<0.01)。流式细胞术检测显示,不同浓度NRP-1mAb均明显促进BGC-823细胞凋亡,且大部分集中在早期凋亡。Western blotting检测显示,BGC-823细胞的Akt磷酸化受到抑制,ERK、p38、JNK的磷酸化水平无明显变化。结论NRP-1mAb能抑制胃癌细胞BGC-823的生长、促进凋亡,可能与抑制Akt磷酸化有关。
- 丁园周娟陈玉强颜江华彭丽贞
- 关键词：胃癌增殖蛋白磷酸化
