李莹
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：上海师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划公益性行业(农业)科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 日本血吸虫含EF手性结构域分子序列的分析和初步鉴定被引量：2
- 2011年
- 为分离鉴定日本血吸虫含EF手性结构域分子及分析其序列结构特征,首先找到含有EF-hand结构域的分子,按照序列一级结构进行分类,之后进行生物信息学分析。然后用PCR方法以虫卵和成虫cDNA文库为模板扩增分类后的分子,构建重组质粒,诱导蛋白表达并纯化,选取14个纯化蛋白用Western blot进行初步免疫原性鉴定。结果269个原始含EF-hand结构域分子按照序列一级结构分为70个;成功表达和纯化了49个含EF手性分子,进化树分析将其分为9类;Western blot显示,14个纯化蛋白均可被日本血吸虫感染小鼠阳性血清识别。本研究结果为下一步采用这类分子进行动物保护性效果评价以及保护性免疫机制的研究奠定了基础。
- 张艳丽贾侃李莹苑纯秀杨健美林矫矫冯新港
- 关键词：日本血吸虫免疫原性
- 日本血吸虫SJCHGC01894分子T细胞表位肽的预测及免疫原性鉴定
- 2011年
- 利用服务器SYFPEITHI、HLAPRED、MHCPred预测日本血吸虫SJCHGC01894分子的T细胞表位,采用ClusPro服务器将序列表位和MHCⅡ分子进行空间模拟结合分析,并用四分臂偶联到多聚赖氨酸骨架上的方法合成多肽,然后用CCK8法鉴定表位肽刺激小鼠淋巴细胞的增殖效果,通过流式细胞术测定免疫小鼠CD4+T细胞内细胞因子的分泌情况。检测结果表明,人工合成的表位肽P1(NH-MSSLSKAEIEDIREV-COOH)可促进免疫鼠脾淋巴细胞增殖,P1刺激后免疫鼠CD4+T细胞中分泌的IFNγ/IL-4数值上升。本研究初步鉴定了SJCHGC01894分子中的一个潜在的Th1细胞表位,为合理筛选抗血吸虫保护性抗原或表位提供了依据。
- 赵犇鹏贾侃张艳丽李莹林矫矫李利珍冯新港
- 关键词：日本血吸虫T细胞表位免疫原性
- 日本血吸虫钙网织蛋白在Sf9昆虫细胞中的表达及其活化树突细胞的初步分析被引量：4
- 2012年
- 为获得在Sf9昆虫细胞中表达的日本血吸虫钙网织蛋白(Schistosoma japonicum calreticulin protein,SjCRT)并分析其活化小鼠骨髓来源树突状细胞的功能,将构建的重组杆状病毒转移载体pFastBacHTA-SjCRT转入DH10Bac细胞,得到重组穿梭质粒reBacmid-SjCRT,再转染到Sf9昆虫细胞,进行重组蛋白的表达。用Western blot和间接免疫荧光对表达蛋白进行鉴定。His柱亲和层析法纯化表达的蛋白,Westen blot鉴定纯化后的蛋白。从BALB/c小鼠产生骨髓来源的树突细胞mDCs,用纯化的重组SjCRT蛋白与mDCs共培养,流式细胞术检测mDCs细胞的表面分子MHCⅡ、CD40和CD86的表达。结果显示,在Sf9昆虫细胞中成功表达了SjCRT蛋白;纯化后的重组SjCRT蛋白既能被感染日本血吸虫42 d的兔阳性血清识别,也能被原核表达的重组SjCRT蛋白免疫鼠的血清所识别。流式细胞术结果显示,与对照组的相比,SjCRT蛋白刺激组mDCs细胞表面分子MHCⅡ和CD86的表达量显著增强(P<0.05)。可见,在Sf9昆虫细胞中表达的SjCRT蛋白能刺激小鼠骨髓来源树突细胞表型的成熟。
- 李莹李运燕徐瑞敏苑纯秀杨健美林矫矫李利珍冯新港
- 关键词：日本血吸虫树突状细胞
