梁佳元
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医科大学基础医学院病原生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 位点特异性重组技术及其在寄生虫学研究中的应用被引量：1
- 2011年
- 位点特异性重组是一种高效、准确地对目地基因进行遗传学操作的技术。位点特异性重组系统包括特异性重组酶及特异性位点。本文就位点特异性重组技术的原理及其在寄生虫学研究中的应用做一综述。
- 梁佳元罗恩杰
- 关键词：重组酶位点特异性重组
- MultiSite Gateway技术在疟原虫条件性基因打靶载体快速构建中的应用
- 2012年
- 目的构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体。方法以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MultiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性重组,构建打靶载体pCHD-EBL-RFT,并对质粒酶切和测序鉴定。PCR扩增约氏疟原虫UIS4-5U片段,置换质粒PbUIS4/flp中原有同源臂,并通过位点特异突变技术,获取AvrII和NheI两种线性化位点,构建插入载体PyUIS4/flp。结果构建出打靶载体pCHD-EBL-FRT和PyUIS4/flp,酶切鉴定和测序分析正确。结论将MultiSite Gateway技术成功地用于疟原虫条件打靶载体的构建,建立了以MultiSite Gateway技术为基础的打靶载体构建体系。
- 王各各李娇娜杜峰邓舒梁佳元曹雅明罗恩杰
- 关键词：疟原虫质粒基因打靶GATEWAY技术
