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融合基因重组卡介苗对肿瘤的抑制作用被引量：2: 2020年; 目的研究EB病毒基因BZLF1和LMP2融合基因重组卡介苗(recombinant BCG,rBCG)对肿瘤的抑制作用。方法建立EB病毒阳性肿瘤(NPRC18)荷瘤小鼠(C57BL/6J)模型,根据注射的药物不同,分为rBCG组、BCG组、转pMV261载体BCG组(pMV261+BCG)、PBS组。采取颈背部皮下多点注射方式进行免疫,对荷瘤小鼠肿瘤重量、成瘤时间、存活情况进行分析,C57BL/6J小鼠肿瘤抑瘤实验结束后,将小鼠的肿瘤裂解后用流式检测CD4+T、CD8+T细胞增殖情况,HE染色分析小鼠肿瘤组织中淋巴细胞浸润情况;使用统计学软件SPSS 19.0对rBCG抑瘤效果进行单因素方差分析(One-way ANOVA)。结果重组BCG组分别用BZLF1和LMP2一抗杂交后,出现杂交目的蛋白,其蛋白质分子量约为70 KD,与对照相比,重组卡介苗对肿瘤抑制作用明显,小鼠成瘤时间延迟,平均成瘤时间约22 d,与对照PBS注射组8 d相比,其差异均有统计学意义(P≤0.01);PBS组肿瘤重量为6.8 g,重组BCG组肿瘤重量为1.01 g,抑瘤率约为81%。经流式分析,重组BCG组产生的CD4+T、CD8+T细胞高于对照组。与对照组相比,rBCG延长了小鼠的生存时间,延缓了肿瘤生长和形成时间。结论重组卡介苗在小鼠体内对肿瘤细胞具有抑制作用。; 闫迎春王子豪李运清杜峰刘昂陈廷薛庆节; 关键词：重组卡介苗融合基因

p120ctn的表达模式与非小细胞肺癌EGFR-TKIs获得性耐药的相关性被引量：2: 2017年; 目的:探讨p120ctn的表达模式与非小细胞肺癌EGFR-TKIs获得性耐药的相关性。方法:应用免疫组化检测并随访具有EGFR基因突变的肺腺癌患者样本中p120ctn的表达模式,并应用Western blot检测EGFR-TKI耐药细胞系中p120ctn表达改变。结果:p120ctn异常表达的肺癌患者更容易出现获得性耐药,建立吉非替尼耐药的肺癌细胞系过程中,p120ctn的表达模式明显改变。结论:p120ctn的异常表达与肺腺癌患者的EGFR-TKIs获得性耐药相关。; 王斯王琳胡晶杜峰刘洋; 关键词：P120-CATENIN 肺癌 EGFR-TKIS 获得性耐药

雌激素受体在MCF-7乳腺癌细胞对他莫昔芬耐药中的作用被引量：2: 2017年; 目的探讨雌激素受体(ER)在MCF-7乳腺癌细胞他莫昔芬耐药中的作用。方法建立ERα基因沉默的MCF-7细胞株(A组)和ERβ基因沉默的MCF-7细胞株(B组),以亲本MCF-7为阴性对照,MTT法检测MCF-7乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药性,RT-PCR检测耐药相关基因:多药耐药基因1(MDR1)、肺耐药相关蛋白(LRP)、π类谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)等的表达水平,Western blotting检测耐药相关的蛋白激酶B(AKT)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)等的表达水平。结果与亲本MCF-7细胞株(C组)对比,ERα基因沉默的MCF-7细胞株(A组)细胞株增强了他莫昔芬对肿瘤细胞增殖的抑制率(P<0.05),ERβ基因沉默的MCF-7细胞株(B组)细胞株降低了他莫昔芬对肿瘤细胞增殖的抑制率(t=8.23,48.36,78.57,P<0.05)。与C组比较,A组耐药基因MDR1、LRP、GST-π的表达水平显著降低(P<0.05),B组耐药基因MDR1、LRP、GST-π表达水平显著增加(P<0.05)。与C组比较,A组能够显著抑制AKT及ERK的磷酸化,降低p-AKT及p-ERK的表达水平(P<0.05),B组能够显著促进AKT及ERK的磷酸化,增加p-AKT及p-ERK的表达水平(P<0.05)。结论雌激素受体在乳腺癌的耐药性中发挥重要作用,ERβ可能通过抑制相关耐药基因及蛋白表达从而降低了TAM的耐药性,ERβ可能成为肿瘤治疗的有效靶点。; 谭文彬陆靖杜峰杨媛媛; 关键词：雌激素受体乳腺癌耐药他莫昔芬

PAK Group Ⅰ的活性减弱促进肺癌细胞对EGFR-TKIs的敏感性被引量：1: 2017年; 目的:探讨p21活化激酶(p21-activated kinase,PAK)是否影响肺癌细胞对EGFR-TKIs的敏感性。方法:肺癌细胞系中加入PAK Group I抑制剂(IPA3)后,应用MTT、流式细胞术观察肺癌细胞的增殖能力。结果:IPA3和吉非替尼虽然能在不同程度上抑制肺癌细胞的增殖,但二者的联合用药能明显增强对肺癌细胞增殖的抑制作用。结论:PAK Group Ⅰ的活性减弱后能抑制肺癌细胞的增殖,促进肺癌细胞对EGFR-TKIs的敏感性。; 王斯李苗胡晶杜峰刘洋; 关键词：P21活化激酶 EGFR-TKIS 吉非替尼

Cox1基因鉴定人结膜吸吮线虫病及其感染途径分析被引量：4: 2015年; 目的探讨人结膜吸吮线虫病的基因鉴定及其感染途径。方法采集新发现的1例患者的病史资料,对取自患者眼睛的虫体进行形态学观察,设计针对结膜吸吮线虫特异的Cox1基因引物进行PCR扩增,结合文献复习对病例的感染途径进行讨论分析。结果临床资料及虫体的形态学观察诊断患者为双眼结膜吸吮线虫重度感染,经Cox1基因鉴定进一步明确诊断。感染途径分析结果表明,患者的一只眼睛存在被接触感染的可能性。结论人结膜吸吮线虫病可以根据病史及虫体的形态学进行诊断,Cox1基因鉴定对于虫种鉴定及流行病学分析有一定意义。其感染途径不能排除直接接触感染的可能性。; 国九英王斯马小力杜峰郑文琪葛安兴安春丽

约氏疟原虫PySLARP蛋白免疫原性分析被引量：1: 2017年; 目的检测SLARP蛋白免疫原性及能否成为疟疾疫苗潜在候选抗原。方法构建pc DNA3.1(+)/Py SLARP真核表达载体并表达,免疫小鼠并检测SLARP蛋白抗体及相关细胞因子水平。结果经pcDNA3.1(+)/PySLARP免疫后的小鼠血清中总IgG、IgG1、IgG2a抗体水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),并且小鼠脾细胞悬液细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平也明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PySLARP蛋白可以同时诱导体液和细胞免疫应答,具有一定的免疫原性,可以作为疟疾疫苗成分的一种候选抗原。; 王琳郑文琪崔爱焦海晶杜峰胡晶王斯; 关键词：约氏疟原虫免疫原性

人源细粒棘球蚴喙钩形态学参数分析被引量：3: 2016年; 目的测定本地区人源细粒棘球蚴喙钩的形态学参数,为棘球蚴的分类及流行病学研究提供依据。方法以外科手术的方法从患者肝脏分离肝包虫,取囊液等内容物离心沉淀制成涂片标本,光学显微镜下观察,根据形态确定棘球蚴原头蚴的喙钩,应用计算机图像分析系统采集喙钩总长、总宽、柄长、刀长4个形态学参数数据,用统计学软件进行统计分析。结果棘球蚴的原头节上具有上下两层喙钩,上层为大钩,下层为小钩。分别采集到游离状态的大钩56个,小钩49个,测量并获得了两种喙钩的4个形态学参数:大钩的总长、总宽、柄长、刀长的平均值分别为12.38μm、4.58μm、5.51μm和6.51μm;小钩的总长、总宽、柄长、刀长的平均值分别为10.41μm、3.76μm、5.04μm和4.72μm。大钩和小钩的各项形态学参数比较结果具有统计学意义(P<0.05)。结论本研究应用计算机图像分析系统获得本地区人源细粒棘球蚴喙钩的形态学参数,为棘球蚴的分类鉴定及流行病学研究提供了可靠的形态学资料。; 张尔夫王斯杜峰安春丽; 关键词：细粒棘球蚴人源形态学

一种指套式一次性小鼠尾静脉注射固定器: 一种指套式一次性小鼠尾静脉注射固定器，包括底座、指套式固定套与缩紧固定带；所述底座包括底板与粘扣面，所述指套式固定套包括固定套主体，所述固定套前端头位置设有通气孔；所述固定套主体前端头通气孔上设有割缝连接条，所述割缝连接...; 杜峰王姗姗杜芳芳赵思华

约氏疟原虫基因条件修饰体系的建立: 目的：　　疟疾是疟原虫经媒介按蚊传播引起的一种在热带和亚热带地区广泛流行的严重威胁人类健康的感染性寄生原虫疾病，仍然是全球最严重的公共卫生问题之一，给全球尤其是发展中国家带来了沉重的健康危害和严重的经济负担。并且其病原体...; 杜峰; 关键词：约氏疟原虫特异性表达; 文献传递

MultiSite Gateway技术在疟原虫条件性基因打靶载体快速构建中的应用: 2012年; 目的构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体。方法以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MultiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性重组,构建打靶载体pCHD-EBL-RFT,并对质粒酶切和测序鉴定。PCR扩增约氏疟原虫UIS4-5U片段,置换质粒PbUIS4/flp中原有同源臂,并通过位点特异突变技术,获取AvrII和NheI两种线性化位点,构建插入载体PyUIS4/flp。结果构建出打靶载体pCHD-EBL-FRT和PyUIS4/flp,酶切鉴定和测序分析正确。结论将MultiSite Gateway技术成功地用于疟原虫条件打靶载体的构建,建立了以MultiSite Gateway技术为基础的打靶载体构建体系。; 王各各李娇娜杜峰邓舒梁佳元曹雅明罗恩杰; 关键词：疟原虫质粒基因打靶 GATEWAY技术

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杜峰

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