袁伟 作品数:4 被引量:8 H指数:2 供职机构: 西南民族大学生命科学与技术学院 更多>> 发文基金: 四川省应用基础研究计划项目 四川省科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
大肠杆菌铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与序列测定 2010年 试验以E.coliMG1655的基因组DNA为模板,通过PCR技术扩增sodC基因,PCR产物经纯化回收后克隆至pMD18-T载体中,转化E.coliDH5α感受态细胞,筛选阳性克隆,提取质粒进行SacI和KpnI酶切及PCR扩增鉴定,并对sodC基因片段进行序列测定。试验成功克隆了sodC基因,获得的基因与报道的sodC基因序列同源性达到99.6%,为进一步构建重组表达载体奠定了基础。 袁伟 唐善虎 章轶锋 陈诺 胡慧玲关键词:铜锌超氧化物歧化酶 分子克隆 藏绵羊脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的克隆及序列分析 被引量:3 2010年 利用RT-PCR、T-A克隆技术获得了藏绵羊H-FABP基因,并对克隆序列进行分析.结果显示,藏绵羊H-FABP编码基因全长402bp,编码133个氨基酸.将藏绵羊H-FABP基因及氨基酸序列分别与Gene Bank中公布的山羊、水牛、家牛、野牦牛、猪、马、狗7种动物进行序列一致率比对,结果显示,藏绵羊与所选的7种动物的H-FABP基因序列一致率在90.8%~99.5%之间,H-FABP氨基酸序列一致率在93.2%~100%之间.其中,藏绵羊与藏山羊H-FABP基因存在2个位点核苷酸差异:114位碱基位点A→G和第129位碱基位点T→C,但两个位点的核苷酸差异均为同义密码子,藏绵羊与山羊H-FABP氨基酸无差异. 韦吉春 徐亚欧 毛亮 袁伟 何孝凡关键词:藏绵羊 克隆 PCR法检测肉鸭屠宰加工生产链中沙门氏菌的污染 被引量:5 2010年 为建立肉鸭加工中快速、准确的沙门氏菌PCR检测方法,并应用于肉鸭屠宰生产加工链沙门氏菌的实时监测。采用Primer Premier 5.0软件针对沙门氏菌特有的fimY基因设计合成一对引物5′-GCATTCCGCTCATTAGAT-3′和5′-TGGAGGCTGATAACAAGG-3′,并对沙门氏菌DNA扩增PCR体系的退火温度、引物浓度、Mg2+浓度和聚合酶浓度进行优化。结果表明:成功扩增出沙门氏菌标准株和分离株的275bp目的片段,灵敏度达到了1.2pg;应用建立的PCR方法对国内某典型肉鸭屠宰厂的肉鸭屠宰链环节进行沙门氏菌污染的检测,发现在屠宰环境、拔毛浸烫水、浸蜡冷却水、清洗池水、宰前毛、食道、粪便和沥水体腔内共有25个样品中扩增出了275bp大小的特异性片段,而空白对照无扩增条带。 袁伟 唐善虎 岑璐伽 李雪 陈诺 罗薇关键词:肉鸭 PCR 沙门氏菌 生产链 应用二次回归正交旋转组合设计优化转谷氨酰胺酶作用下的乳清蛋白交联条件 2010年 考察了pH、催化时间、催化温度及加酶量对转谷氨酰胺酶作用WPI形成交联产物的粘度影响,并对影响因素进行优化,找出最佳组合。该研究共分两个实验进行,实验1考察pH、时间、温度及加酶量单个因素对转谷氨酰胺酶交联作用的影响;实验2是基于单因素实验结果,采用四因素(pH、催化时间、催化温度、加酶量)五水平回归正交旋转设计,对WPI经转谷氨酰胺酶交联后产生最大粘度的最佳条件进行优化,以便确定实验多元回归方程和获得较大WPI黏度的最佳条件。实验结果表明:交联时间4h、交联温度50℃、pH8.0和加酶量20u/g时,具有最佳粘度值,转谷氨酰胺酶作用效果最佳。 胡慧玲 唐善虎 杨蓉生 袁伟关键词:转谷氨酰胺酶 粘度 二次回归正交旋转组合设计