罗勇
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体-TK对肝癌细胞HepG2凋亡的影响
- 2009年
- 目的:探讨PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK对肝癌细胞HepG2凋亡的影响。方法:构建重组质粒PEGFP-AFP-TK并通过纳米磁流体分别转染入AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AFP表达阴性的肝癌细胞SMMC7721。转染12h后,于荧光显微镜下动态观察;48h后,RT-PCR和Western blot分析HepG2细胞中HSV-TK基因的表达情况,用MTT法检测HepG2细胞的存活,用流式细胞分析HepG2细胞的凋亡。结果:纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-TK转入HepG2细胞,并且其转染效率高于脂质体;RT-PCR及Western blot证明转染的HepG2细胞有HSV-TK基因的表达;MTT及流式细胞分析说明HSV-TK基因发挥杀伤细胞作用。结论:纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-TK转染HepG2细胞并获得表达,PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK可显著抑制HepG2细胞增殖,可望成为肝癌基因治疗的新型生物制剂之一。
- 吴凯张阳德罗勇彭健
- 关键词：TK基因肝癌基因治疗
- 载TK基因PEG-PEI Fe_3O_4纳米磁流体的制备及其相关性质
- 2009年
- 目的:制备载pAFP-TK基因PEG-PEIFe3O4纳米磁流体并探讨其相关特性。方法:用化学共沉淀法制备PEG-PEIFe3O4纳米磁流体,将pAFP-TK自杀基因表达质粒包裹,形成载TK基因的PEG-PEIFe3O4纳米磁流体。结果:粒径分析仪及原子力显微镜检测载TK基因PEG-PEIFe3O4纳米磁流体平均粒径202.6nm,分布均匀,无黏附团聚。琼脂糖凝胶电泳分析PEG-PEIFe3O4纳米磁流体与DNA比例达10∶1时,结合率最高,达93.56%。PEG-PEIFe3O4纳米磁流体中的DNA在37℃、DNaseI及血清存在下消化数小时后,仍然保持结构的完整。结论:载pAFP-TK基因表达质粒的PEG-PEIFe3O4纳米磁流体与DNA有较高的结合率,可以有效地保护质粒DNA等特性。
- 薛敦彭健何剪太胡玉罗勇张阳德
- 关键词：甲胎蛋白启动子自杀基因
- 纳米磁流体介导的重组pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性肝癌细胞HepG2的杀伤作用的体外实验被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨纳米磁流体介导的重组质粒pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2的杀伤作用。方法:通过纳米磁流体将构建好的重组质粒pEGFP-AFP-TK并分别转染AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AFP表达阴性肝癌细胞SMMC-7721,于荧光显微镜下动态观察;使用RT-PCR和Western blot分析HepG2细胞中TK基因的表达情况,MTT法检测转染重组TK表达质粒后的细胞在更昔洛韦(GCV)作用下的存活率并观察旁观者效应,用流式细胞术分析HepG2细胞的凋亡。结果:纳米磁流体能将重组质粒pEG-FP-AFP-TK转入AFP阳性的HepG2细胞,其转染效率高于脂质体;RT-PCR及Western blot证明转染的AFP阳性的HepG2细胞有TK基因的表达;MTT及流式细胞术分析说明TK基因发挥杀伤细胞作用。结论:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的基因载体,采用AFP增强子可使目的基因在HepG2细胞中特异性表达,并且在前药GCV的作用下,能使AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2发生凋亡及旁观者效应。
- 罗勇张阳德彭健颜焕新薛敦吴凯周琳韩世伟赵劲风
- 关键词：AFPTK基因GCV
- 壳聚糖纳米粒的制备及体外抗幽门螺杆菌效果评价被引量：4
- 2009年
- 背景:壳聚糖是甲壳素的脱乙酰产物,这种碱性氨基多糖具有天然抗菌活性,且抗菌广谱,但将其纳米化后抗幽门螺杆菌作用的报道较少。目的:制备壳聚糖纳米粒并评价其体外抗幽门螺杆菌的疗效。设计、时间及地点:体外对比观察实验,于2008-03/10在中南大学湘雅医院卫生部纳米生物技术重点实验室完成。材料:采用聚合物分散法用脱乙酰度分别为88.5%和95%的2种壳聚糖粉末制备壳聚糖纳米粒。方法:取0.5mL含幽门螺杆菌(NCTC11639和NCTC11637)5×108CFU/mL的布氏肉汤菌液均匀涂布于培养基上待干燥后,采用打孔法检验不同质量浓度(5,10,15,20g/L),不同pH值(pH=6,5,4)和不同脱乙酰度(88.5%和95%)壳聚糖纳米粒溶液的抑菌效果。主要观察指标:抑菌环直径。抑菌环直径越大,说明该菌对此药敏感性越大,抗菌效果越好;反之越小,抗菌效果越差;若无抑菌环,则说明该菌对此药具有耐药性。结果:pH值在4～6时,壳聚糖纳米粒的抑菌作用与pH值呈负相关(P<0.01),且在pH值为4时的抑菌效果最强。2种不同脱乙酰度壳聚糖对幽门螺杆菌的抑菌作用差异有显著性意义(P<0.05),壳聚糖纳米粒(脱乙酰度95%)的抑菌效果优于壳聚糖纳米粒(脱乙酰度88.5%),在质量浓度处于5～20g/L时抗幽门螺杆菌的作用差异无显著性意义(P>0.05)。结论:壳聚糖纳米粒提高了在体外对幽门螺杆菌的抑菌作用,且此作用在酸性条件下明显增强。用脱乙酰度为95%的壳聚糖粉末制备的壳聚糖纳米粒具有更好的抑幽门螺杆菌的作用。
- 颜焕新潘一峰赵劲风刘刚罗勇贾泽明张阳德
- 关键词：幽门螺杆菌壳聚糖纳米粒抗菌活性
