胡丽丽
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：山西中医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响被引量：2
- 2014年
- 目的构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响。方法以pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至E.Coli Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变。结果测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖。结论成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖。
- 郭波王文静赵正豪赵凌宇汪鲁敏胡丽丽宋土生黄辰
- 关键词：胃癌细胞增殖
- MiR-214表达载体的构建及其对肝癌细胞Hep3B增殖的影响
- 2015年
- 目的构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-214表达载体,并检测其对肝癌Hep3B细胞增殖的影响。方法以人的基因组DNA为模板,利用PCR扩增miR-214前体序列,构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-214表达载体,序列比对及实时定量PCR验证miR-214表达载体是否构建成功,MTT实验检测miR-214对肝癌Hep3B细胞增殖的影响。结果序列比对及实时定量PCR验证miR-214表达载体构建成功。将成功构建的miR-214表达载体导入肝癌细胞Hep3B,发现其对细胞增殖具有抑制作用。结论本研究成功构建miR-214表达载体并证明miR-214可能参与肝癌发展的过程。
- 杨阳常素娥胡丽丽高岭何康汪鲁敏童东东郭波蔡东晖宋土生黄辰
- 关键词：肝癌分子克隆技术
- 大鼠海马组织RNA、DNA和蛋白质共提取方法的研究被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨Trizol法同时提取大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA和蛋白质的可行性及优势.方法Trizol法提取成年雄性Sprague-Dawley大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA以及蛋白质; 商业化试剂盒提取另一侧海马组织基因组DNA,RIPA裂解液提取蛋白质.用超微量分光光度计和SYBR实时定量RT-PCR法检测Trizol法提取的RNA的质量,利用超微量分光光度计和聚合酶链式反应（PCR）法比较两种方法提取DNA的效果及质量,采用Western blot法比较两种方法提取蛋白质的效果.结果 Trizol法提取单侧海马RNA的质量浓度介于1178.3～2225.8ng/μL之间,A260/280介于2.01～2.03,A260/230介于1.88～2.22,并获得了稳定的β-actin和GR循环域值.Trizol法和试剂盒提取单侧海马DNA的质量浓度分别介于215.7～271.8ng/μL和268.6～872.5ng/μL之间,均适于充当PCR反应模板.Trizol法和RIPA裂解液提取的蛋白质在Western blot法检测目的 蛋白含量的过程中均呈现清晰的条带.结论 Trizol法提取大鼠单侧海马组织RNA的同时提取的DNA和蛋白质,与商业化试剂盒和RIPA裂解液从不同海马组织中分别提取基因组DNA和蛋白质的效果相当.采用Trizol法同时提取海马组织的RNA、DNA和蛋白质,不仅提高了实验效率、节约了实验成本,而且有效避免了因反复实验操作带来的人为干扰及误差.
- 胡丽丽赵小鸽倪磊王爱英杨娟
- 关键词：TRIZOL海马RNADNA蛋白质
- HERG基因G572R突变体表达载体的构建及其稳定转染细胞系的建立被引量：1
- 2014年
- 目的构建HERG基因G572R突变体表达载体并建立其稳定转染HEK293的细胞系。方法应用重叠延伸PCR构建HERG-G572R突变体表达载体,经G418筛选稳定转染细胞系,通过Real-Time PCR,Western blot及测序鉴定稳定转染细胞系。结果经序列比对,证明HEK-HERG-G572R突变体表达载体构建成功,Real-Time PCR,Western blot及测序证明稳定转染细胞系构建成功。结论该方法可成功构建的HKE-HERG-G572R细胞株,为药物个体化治疗提供工具。
- 杨阳黄娜高岭常素娥郭波胡丽丽宋土生黄辰
- 关键词：HERG基因HEK293转染突变体
