许淑娟
- 作品数:14 被引量:21H指数:3
- 供职机构:西北民族大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 嗜碱性假单胞菌对菲的降解研究被引量:1
- 2016年
- 目的:研究和分析嗜碱性假单胞菌株对菲的降解.方法:采用索氏提取法,以活性炭为吸附载体,多环芳烃为惟一碳源,研究嗜碱性假单胞菌在不同的温度、pH和盐度条件下对菲降解率的影响.结果:将此菌株培养48 h后,温度为37℃时,菲的降解率可达39.8%.当pH值为7.0时,菲的降解率可达47.1%;当盐度为120 mmol/L时,菲的降解率可达28.4%.结论:嗜碱性假单胞菌对菲有较高的降解效率,pH、温度、盐度三个因素对菌株的降解率有较大影响.
- 温文静谭丽婵雒晓芳熊梅胡红张巍娜吾巴尔.阿布都黑力许淑娟
- 关键词:降解率
- 利用慢病毒包装小窝蛋白-1过表达稳定细胞株的构建
- 2022年
- 目的利用慢病毒包装构建过表达小窝蛋白-1(Caveolin-1)的稳定细胞株。方法PCR扩增仓鼠肾细胞BHK-21中Caveolin-1基因,克隆至pTRIP-CMV载体中,构建重组表达质粒pTRIP-Cav1,将其与对照质粒pTRIP-EGFP分别经LipofectamineTM 2000介导转染HEK-293T细胞,收集包装的慢病毒并转导至BHK-21细胞,构建过表达Caveolin-1的细胞株BHK-Cav1及过表达绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的对照细胞株BHK-EGFP。Western blot、qRT-PCR、免疫荧光法验证细胞株的稳定性及过表达特性,同时检测细胞活力。结果经双酶切及测序鉴定,重组表达质粒pTRIP-Cav1构建正确。与BHK-21细胞比较,各代次BHK-EGFP细胞中EGFP荧光明显,BHKCav1细胞中Caveolin-1蛋白表达水平增加,mRNA水平显著增加(P<0.01),且表达水平不随细胞代次的增长而改变。BHK-Cav1和BHK-EGFP细胞活力与BHK-21细胞比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论成功构建了Caveolin-1过表达细胞株BHK-Cav1,其具有较好的稳定性,为下一步研究病毒通过Caveolin依赖型内吞途径感染BHK-21细胞奠定了基础。
- 刘杨许淑娟许淑娟刘翊忠
- 关键词:小窝蛋白-1慢病毒细胞株稳定性
- HSP27过表达抑制脑心肌炎病毒复制的作用初探被引量:4
- 2020年
- 已有研究表明,HSP27在一些病毒的生命周期中发挥着重要作用,但它对于脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)的调控作用尚不明晰。该研究通过构建人源HSP27的表达质粒pCMV-Myc-HSP27并于HEK293细胞中表达后,接种EMCV检测病毒的复制及相关通路蛋白表达情况。结果显示,过表达HSP27可以抑制EMCV在宿主细胞中的复制,进一步分析表明,HSP27可能是通过正调控IFN-β信号通路中接头分子MAVS、TBK1、IRF3的表达和阻止自噬体与溶酶体的融合实现对EMCV复制的负调控作用。总之,该研究首次表明,HSP27抑制EMCV复制是通过IFN-β信号通路及自噬途径来实现的,这些发现为揭示EMCV感染中宿主因子的调控作用和潜在的抗病毒靶点提供新的见解。
- 李倩马瑞仙许淑娟陈延宏许淑娟冯若飞
- 关键词:热休克蛋白27脑心肌炎病毒
- Caveolin-1在EMCV感染宿主细胞中的作用被引量:1
- 2019年
- 脑心肌炎病毒(EMCV)是一种重要的人畜共患病病原,但其致病机制目前尚不明确,小窝蛋白-1(Caveolin-1)可介导多种病毒感染宿主细胞。为了探究Caveolin-1在EMCV感染宿主细胞中的作用,该实验检测了EMCV感染不同时间段He La细胞中Caveolin-1的表达量,对He La细胞和HEK-293细胞中Caveolin-1进行瞬时过表达实验、瞬时沉默实验和Caveolin-1依赖型内吞途径抑制实验,然后观察EMCV对He La细胞和HEK-293细胞的感染情况。结果发现, HeLa细胞中Caveolin-1表达量会随病毒感染时间的增加而升高;在Caveolin-1瞬时过表达实验结果中,病毒滴度、病毒拷贝数、病毒蛋白检测结果均显示,上调Caveolin-1促进EMCV感染宿主细胞, Caveolin-1瞬时沉默实验和Caveolin-1依赖型内吞途径抑制实验的结果则显示,下调Caveolin-1或抑制Caveolin-1依赖型内吞途径可抑制EMCV感染宿主细胞。上述现象提示, EMCV可通过Caveolin-1依赖型内吞途径感染宿主细胞。
- 刘杨赵克学许淑娟许淑娟李琼毅
- 关键词:小窝蛋白-1脑心肌炎病毒人宫颈癌细胞人胚肾细胞
- TRIM21对脑心肌炎病毒的增殖调控作用研究被引量:3
- 2019年
- TRIM21是三基序蛋白家族的成员之一,与多种病毒的复制增殖相关,但其与EMCV感染的研究机制尚不明确。该研究采用脂质体介导法将构建成功的TRIM21的真核表达质粒pcDNA3.1-TRIM21以及针对该靶点的小RNA干扰序列瞬时转染至HEK293和HeLa细胞,探讨细胞内TRIM21的表达对脑心肌炎病毒复制增殖的影响,并进一步进行机制研究。结果显示,TRIM21在细胞中成功过表达;EMCV感染24 h后进行检测,结果证明,过表达TRIM21组病毒滴度、病毒拷贝数及病毒蛋白均低于对照组。RNA干扰实验下调TRIM21后,病毒滴度、病毒拷贝数及病毒蛋白显著高于对照组。此外,机制研究提示,TRIM21可正调节II型干扰素及促炎性因子IL-6的转录,从而抑制EMCV的增殖。以上结果表明,TRIM21与EMCV的复制增殖密切相关,可能通过对IFN信号通路部分蛋白及促炎性因子的调控参与对病毒复制增殖的影响。
- 赵克学许淑娟许淑娟刘杨李琼毅李琼毅
- 关键词:脑心肌炎病毒IFNIL-6
- 一株细菌降解蒽芴的酶活特性研究
- 2017年
- 本研究采用单因素实验以降解温度、pH、PAHs/活性炭百分数为自变量,降解蒽芴后的脱氢酶活性为因变量进行酶活研究.结果表明,在培养24 h后,菌株降解蒽、芴后脱氢酶活性的变化具有相似性,且降解芴的脱氢酶活性均高于蒽.其中蒽的最适降解条件为PAHs/活性炭百分数3%,温度35℃,pH=7,脱氢酶活性最高达41.91(μg/mL)·h;芴的最适降解条件为PAHs/活性炭百分数3%,温度36℃,pH=8,脱氢酶活性最高为89.17(μg/mL)·h.可见,相同条件下该细菌对芴的降解效果高于对蒽的降解.
- 熊梅雒晓芳张巍许淑娟胡红
- 关键词:细菌脱氢酶活性
- 脑心肌炎病毒VP1蛋白抑制Ⅰ型IFN信号通路和促进病毒体外增殖被引量:1
- 2021年
- 脑心肌炎病毒是一种重要的人畜共患病病原,为了初步研究EMCV介导的天然免疫反应的分子机制,将VP1蛋白克隆至真核表达载体pCMV-HA,转染HEK293细胞后,使其在细胞内过表达,通过ELISA和实时荧光定量PCR检测VP1过表达对IFN-β表达和RLRs信号通路相关因子,以及下游刺激基因表达的影响。结果表明,VP1蛋白可显著抑制IFN-β的表达。进一步研究发现,VP1可显著抑制EMCV引起的RLRs信号通路相关因子mRNA水平(P<0.01),并且随着VP1的表达,MAVS蛋白的表达明显减少,但对MDA5表达无影响。实验数据初步表明,VP1蛋白可以通过抑制MAVS的表达,进而抑制Ⅰ型IFN基因的表达并阻断其下游信号通路发挥作用。
- 韩玉梅韩玉梅毕英杰许淑娟毕英杰
- 关键词:脑心肌炎病毒
- 脑心肌炎病毒感染Hela细胞的内吞途径被引量:2
- 2020年
- 旨在探究脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)是否通过内吞途径以及通过何种内吞途径感染细胞,分别采用内吞途径抑制剂、网格蛋白抑制剂、巨胞饮途径抑制剂和肌动蛋白抑制剂作用于Hela细胞后接种EMCV,通过TCID50、qRT-PCR和Western blot等方法检测病毒感染是否受影响。结果显示,内吞途径抑制剂和肌动蛋白抑制剂作用于Hela细胞后,TCID50、qRT-PCR和Western blot等检测结果提示EMCV的感染受到抑制。表明EMCV可通过肌动蛋白参与的内吞途径感染Hela细胞。
- 刘杨许淑娟许淑娟刘翊忠
- 关键词:肌动蛋白脑心肌炎病毒人宫颈癌细胞
- 铁皮石斛根、茎和叶中内生真菌分离与鉴定被引量:2
- 2020年
- 目的分离鉴定铁皮石斛的内生真菌,为铁皮石斛的开发利用提供依据。方法以多种培养基为基础分离培养基,分别从铁皮石斛的根、茎和叶中分离内生真菌,采用平板划线法对分离得到的菌株进行纯化,并观察其菌落形态。利用形态学、生理生化分子特性及分子生物学手段鉴定内生真菌。结果分离得到7株铁皮石斛内生真菌,根、茎和叶中的真菌种类和数量各不相同,仅X1菌株同时存在于根、茎和叶部位。通过对性状稳定的3株真菌进行分子生物学鉴定,XJ1与链格孢菌Alternaria sp.的16S rDNA序列有99%的同源性,XY6与链格孢菌Alternaria sp.的16S rDNA序列有93%的同源性,X1菌株与好食链孢霉菌Neurospora africana的16S rDNA序列有99%的同源性。结论本研究分离并鉴定了铁皮石斛根、茎和叶中的内生真菌,可为铁皮石斛资源的开发利用提供依据。
- 雒晓芳许淑娟陈丽华王冬梅张璐费孝桐赵梓彤
- 关键词:铁皮石斛内生真菌
- 苏云金芽孢杆菌对PAHs的降解研究被引量:1
- 2019年
- 为研究苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在不同温度、pH、多环芳烃(PAHs)质量下对蒽芘芴的降解性能,采用单因素实验和响应面分析结合的方法,以 PAHs 为唯一碳源,活性炭为吸附载体,利用索氏提取法测定降解吸光度值。根据 Design Expert 8.0.6.1 软件中 Box-Behnken design 对实验结果进行分析。结果表明,温度与 pH 交互项对蒽、芘的降解影响显著,温度与 PAHs 质量交互对芴的降解影响显著。在优化实验中,蒽芘芴 3 物质在各自的优化条件下的降解率预期值分别为 92.13%、87.08%、83.56%,与实际试验值 91.60%、86.62%、82.95%相比,相对误差为±0.58%、±0.53%、±0.73%之间。3 个优化模型相对误差均在 2%以内,表明 3 个实验模型均可用于分析及预测苏云金芽孢杆菌对蒽芘芴的降解效果。
- 雒晓芳陈丽华夏苗苗许淑娟熊梅
- 关键词:苏云金芽孢杆菌降解性能