李科
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：海南医学院更多>>
- 发文基金：海南省自然科学基金海南省研究生创新科研课题国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胚胎干细胞源多巴胺能神经元的功能性分化被引量：2
- 2017年
- 背景:干细胞源多巴胺能神经元作为帕金森病替代疗法的细胞来源,其体外分化方案被不断的优化和改良,后续的鉴定手段和检测指标也随之不断完善。目的:通过观察人胚胎干细胞分化为多巴胺能神经元的形态发育过程,检测其电生理特性,以了解在目前分化方案下人胚胎干细胞能否发育为形态成熟、功能成熟的多巴胺能神经元。方法:通过单层贴壁法,采用SMAD通道双抑制剂分化方案,定向诱导人胚胎干细胞分化为多巴胺能神经元,通过光镜、电镜和细胞免疫荧光等检测手段进行形态学和免疫化学鉴定,并应用膜片钳技术检测多巴胺能神经元的电生理特性。参照体内多巴胺能神经元的电生理标准,对体外分化的多巴胺能神经元进行功能评价。结果与结论:(1)采用SMAD通道双抑制剂分化方案,成功诱导人胚胎干细胞定向分化为形态学上发育成熟的多巴胺能神经元;(2)膜片钳检测结果显示多巴胺能神经元具有成熟的电生理功能,且其电生理特性符合体内多巴胺能神经元的评价标准;(3)上述分化方案可以将人胚胎干细胞定向分化为成熟的、有功能的多巴胺能神经元。
- 彭雅南胡兰王埮李科杨柳陈丽陈小武陈志斌赵振强
- 关键词：干细胞人胚胎干细胞多巴胺能神经元膜片钳细胞电生理国家自然科学基金
- T细胞应答对白塞病眼受累致盲小鼠的影响被引量：2
- 2019年
- 目的研究T细胞应答对白塞病眼受累致盲小鼠的影响。方法按照体重将雌性BALB/c小鼠随机分为2组:模型组与正常组,每组15只。模型组小鼠建立白塞病眼受累致盲模型。正常小鼠作为正常组。用流式细胞仪检测CD4+、CD+8表达水平;以酶联免疫吸附法检测白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-17(IL-17)含量。结果模型组与正常组的淋巴细胞中CD4+表达水平分别为(96. 77±8. 13)%,(77. 44±8. 14)%;这2组的CD8+表达水平分别为(9. 20±0. 22)%,(19. 33±6. 25)%;这2组的IL-2含量分别为(31. 94±2. 49),(9. 22±1. 84),pg·m L^(-1);这2组的IL-17含量分别为(30. 44±3. 98),(15. 53±2. 98) pg·m L^(-1)。上述指标组间比较差异均有统计学意义(均P <0. 05)。Pearson相关性检验显示,模型组的CD4+、CD8+表达水平与IL-2、IL-17水平均有显著相关性(均P <0. 05)。结论 IL-2和IL-17通过影响Th1/Th17型的平衡来影响白塞病眼受累的免疫反应。
- 王玲刘伟仙黄雄高李科
- 关键词：白塞病T细胞应答TH1细胞TH17细胞
- Wnt1蛋白对人角膜上皮细胞Cyclin D1蛋白表达的影响及意义被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨Wnt1蛋白对人角膜上皮细胞Cyclin D1蛋白表达的影响及其相关分子机制。方法:人角膜上皮细胞经复苏、培养,连续传代2次后共培养12个T25细胞培养瓶,4个培养瓶一组,共3组,分别加入25 ng/m L的重组人Wnt1蛋白和50 ng/m L的重组人Wnt1蛋白,一组不加入重组人Wnt1蛋白作为对照,于不同时间点(6、24、48和72 h)各取一个T25培养瓶的细胞,计算各组角膜上皮细胞总数并采用Western blot方法检测角膜上皮细胞中Cyclin D1蛋白的表达情况。结果:对照组Cyclin D1蛋白的表达在0~48 h内随着时间的延长呈现逐步降低的趋势,在48 h达到最低状态,在72 h有所提高。加入Wnt1后6 h,25 ng/m L组未检测到Cyclin D1蛋白表达,50 ng/m L组Cyclin D1蛋白表达有所提高。在24,48和72 h时间点,25 ng/m L组和50 ng/m L组Cyclin D1蛋白表达均提高,48 h达到最高峰,72 h有所回落。添加Wnt1后与对照组比较,25 ng/m L组及50 ng/m L组角膜上皮细胞生长速度均加快,但在6、24及48 h时间点差异无显著性,在72 h差异有显著性。结论:Wnt1蛋白的刺激可在一定时间范围内增强人角膜上皮细胞Cy-clin D1的表达,且与Wnt1蛋白量呈正相关。Cyclin D1的表达强弱,在角膜上皮损伤修复及其细胞增殖分化过程中可能起重要作用。
- 陈梨萍李科郑振优宋绪华李雷赵楠楠
- 关键词：CYCLIND1人角膜上皮细胞角膜
- 热休克蛋白65对视网膜毛细血管粥样硬化的影响
- 2018年
- 目的探讨热休克蛋白65(heat shock protein 65,HSP65)对视网膜毛细血管粥样硬化的影响。方法 30只成年Wistar大鼠随机分为实验组(n=15)和对照组(n=15),实验组给予高脂高糖饮食建立视网膜毛细血管粥样硬化模型,对照组正常喂养,8周后测定两组大鼠血清与视网膜组织中HSP65表达情况,电子显微镜下观察视网膜毛细血管粥样硬化情况与斑块情况。结果实验组的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均高于对照组,血糖值也高于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。实验组与对照组的血清中HSP65含量分别为(45.66±8.24)μmol·L^(-1)和(20.67±9.44)μmol·L^(-1),实验组高于对照组(P<0.05);实验组视网膜中的HSP65蛋白相对表达量为0.56±0.11,高于对照组的0.10±0.02,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组视网膜毛细血管内皮细胞层和弹力板均完整且贴附紧密;实验组视网膜毛细血管内膜有程度不等的增厚,管腔呈偏心性狭窄,内膜中细胞外基质增多。实验组视网膜毛细血管的血管面积、斑块面积与斑块比例均高于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 HSP65在视网膜毛细血管粥样硬化大鼠的血清与视网膜组织中均呈高表达,可导致视网膜毛细血管的血管面积、斑块面积与斑块比例增加。
- 王玲刘伟仙黄雄高李科
- 关键词：热休克蛋白65视网膜毛细血管血管粥样硬化血脂
