郑姣
- 作品数：9 被引量：7H指数：2
- 供职机构：湖南师范大学医学院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- 抗人细胞角蛋白7(CK7)单克隆抗体的制备及鉴定
- 2022年
- 用KLH偶联合成细胞角蛋白7(CK7)优势表位多肽片段(C14)免疫小鼠,经细胞融合技术制备CK7单克隆抗体(mAb),并收集临床组织进行免疫组化鉴定。C14多肽作为抗原具有良好的免疫反应性。本研究共获得了3株能稳定分泌抗CK7抗体的单克隆细胞株,选择亲和力较好的7A8单克隆抗体进行免疫组化鉴定,结果表明,本研究筛选的7A8单克隆抗体的质量浓度为0.49μg/mL时,与收集的临床标本均有良好的特异性反应,低于医院常用CK7检测试剂盒中抗体质量浓度2~5μg/mL,表现出较高的灵敏度。本研究筛选的7A8单克隆抗体为研发CK7快速诊断试剂提供了关键的原材料。
- 曾璇吴意刘如石曾冰洁扶春艳杨玉皎郑姣郑姣
- 关键词：免疫反应性检测试剂盒
- 人C-反应蛋白磁微粒化学发光酶免疫测定法的建立
- 2024年
- 人C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标。为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法,将表达纯化的重组CRP作为抗原免疫小鼠,获得了5株稳定分泌抗体的单克隆抗体细胞株,采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)初步鉴定筛选的抗人CRP单克隆抗体,并分别选择mAb 9D6和mAb 9G4作为捕获抗体与检测抗体,建立用于人CRP检测的化学发光酶免疫测定法(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA),最后通过测定分析临床血清CRP样本,评价CLEIA的性能。结果显示,基于9D6/9G4-AP单克隆抗体对的CLEIA测定范围为0.1767~500μg/L(可扩展至100 mg/L);所建立的CLEIA与医院采用的免疫散射比浊法(R^(2):0.9496,P<0.0001)表现出良好的相关性,且Bland-Altman分析中96.36%(106/110)的点在95%一致性界限范围内显示两种检测方法具有较好的一致性。结果初步表明,建立的分析方法在临床诊断中具有较好的应用前景。
- 罗梦洁肖铎曾璇谭楚帆徐叶钟志宏刘如石郑姣
- 低聚果糖对AOM/DSS诱导的结肠炎相关结直肠癌小鼠辅助性T细胞的调控作用
- 2024年
- 目的探讨益生元低聚果糖(FOS)对结肠炎相关结直肠癌(CAC)小鼠肠道辅助性T细胞的调节作用。方法将6周龄SPF级雄性C57BL6小鼠(体重18~20 g)随机分为对照组、模型组和干预组,每组10只。通过偶氮甲烷、葡聚糖硫酸钠构建CAC小鼠模型,干预组每日使用2 mg/kg b.w.FOS灌胃,持续10周。造模期间监测各组小鼠体重变化,造模结束后测量结肠长度和肿瘤数目。采用微球免疫分析法检测血清Th1/Th2/Th17相关细胞因子水平,流式细胞术分析肠系膜淋巴结内Th1、Th2、Th17细胞亚群比例。结果与模型组相比,干预组小鼠结肠长度显著增加(t=3.106,P=0.0064),肿瘤数目显著减少(U=15.000,P=0.0111),血清中IL-17A(t=3.504,P=0.0088)、TNF-α(t=2.381,P=0.0300)等促炎细胞因子水平降低,肠系膜淋巴结Th17细胞比例显著降低(t=6.031,P=0.0027),Th1/Th2显著升高(t=2.419,P=0.0387)。结论FOS可调控CAC模型小鼠结肠内辅助性T细胞的分化,抑制肿瘤的发生。
- 陈舒婷仝谣张霞郑姣刘如石廖旻晶
- 关键词：结直肠癌低聚果糖辅助性T细胞黏膜免疫
- 新医科背景下生物安全融入医学微生物学本科实验课程路径研究——以湖南师范大学为例
- 2024年
- 近年来,生物安全问题尤其是病原微生物的安全问题被社会广泛关注。由于医疗工作面临不同层级的生物安全风险,因此相关工作者必须具备相应的生物安全知识及应急处理能力。医学微生物学是检验专业学生的必修基础课程,实验课程内容以病原微生物为主,由于病原微生物具有一定的不可控性,所以相关操作必须在生物安全实验室内进行。实践中,以往课程以符号知识为教学途径,无法培养学生的安全实验意识及具身体验。因此,湖南师范大学依据相关法律法规条例建设本科教学的生物安全二级(biosafety level 2,BSL-2)实验室,并通过将培养学生生物安全意识、完善实验室生物安全制度、加强实验室生物安全管理以及生物安全考核等融入实验教学的日常工作,提高学生生物安全意识,确保医学微生物学本科实验教学活动安全,实现课程育人的新图景。
- 钟志宏廖旻晶叶湘漓杨畅张霞田玫刘如石高佩琪郑姣
- 关键词：医学微生物学生物安全生物安全实验室
- 降钙素原的原核表达及单克隆抗体制备被引量：1
- 2016年
- 目的:高效表达与纯化可溶性重组人PCT蛋白,制备高灵敏度和高特异性的抗人PCT医用诊断单克隆抗体。方法:大肠杆菌表达重组人PCT蛋白后,利用饱和硫酸铵沉淀和亲和层析方法纯化PCT蛋白后,经质谱、Western blot和间接ELISA法进行性质鉴定和分析重组蛋白的表达与免疫反应性;重组蛋白免疫小鼠,经细胞融合及筛选制备抗PCT单克隆抗体(m Ab)。结果:在大肠杆菌中高效表达了人PCT蛋白;重组人PCT蛋白具有良好的免疫反应性与免疫原性;经筛选获得7株抗PCT单克隆抗体细胞株,经ELISA鉴定,筛选抗体可与PCT抗原有良好的特异性反应。结论:利用重组人PCT蛋白免疫制备了抗人PCT单克隆抗体,为进一步研发PCT快速诊断试剂提供了原料。
- 郑姣邱义兰廖旻晶李晓丹张坚松吴意何赛梁湘辉郭向荣刘如石
- 关键词：降钙素原原核表达
- 创新创业教育与应用化学专业课程深度融合策略初探被引量：2
- 2024年
- 创新创业教育是我国高等教育服务国家重大战略需求的重要途径。因人才需求侧的改变,本研究以中南大学应用化学专业为依托,将创新创业教育这一元素有机地引入到应用化学专业的培养体系之中。然而,创新创业教育与应用化学专业人才培养深度融合过程中出现了课程理念模糊、课程资源匮乏、课程评价单一等困境,我们尝试从培养模式改革、跨学科实践、立体教学等方面入手,结合我校学生在校企合作及国家、省级以及学校创新创业资助成果的案例,探寻创新创业教育与专业课程融合之策。
- 高佩琪郑姣陈立妙张翼
- 关键词：应用化学创新创业
- 人巨细胞病毒pp65蛋白的原核表达及活性鉴定被引量：3
- 2013年
- 以病毒全基因组为模板,通过PCR技术扩增HCMV pp65基因编码序列,其产物连接到pMD18-T质粒,酶切并回收目的片段后克隆到表达载体pTO-T7,然后将重组质粒pTO-T7-pp65转化大肠杆菌ER2566,大量表达后将重组蛋白进行质谱法分析鉴定,再利用Western blot以及间接ELISA进行重组蛋白的活性及抗原性鉴定.结果显示:通过SDS-PAGE鉴定可知,大肠杆菌可能表达出了重组蛋白,质谱分析结果说明了重组蛋白为pp65蛋白,具有极高可信度,其相对分子质量约为63 kD,从Western blot和间接ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)的结果可知,pp65蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性与免疫原性,为制备相应的抗原诊断单克隆抗体打下了基础,同时也为开发HCMV IgG快速诊断ELISA试剂盒提供了可选原料.
- 许凤邱义兰邱果李桑何赛郑姣李小曼刘如石
- 关键词：免疫反应性免疫原性
- 人巨细胞病毒包膜糖蛋白B主要中和表位单克隆抗体的制备被引量：1
- 2017年
- 人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)分布广泛,能够引发多种疾病,人群感染率极高,严重威胁到人类健康。现根据标准毒AD169基因序列,人工合成包膜糖蛋白B(glycoprotein B,g B)AD13区段的主要中和抗原表位AD-1、AD-2、AD-3,并将其与表达载体pET-32a连接,构建重组表达质粒;用IPTG诱导表达重组蛋白,采用Western-blot进行特异性鉴定;将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0细胞融合,然后筛选制备AD13单克隆抗体(monoclonal antibody,m Ab)。12%SDS-PAGE电泳鉴定表明重组蛋白表达成功,其相对分子质量约为35 kD;Western-blot和间接ELISA结果说明,重组AD13蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性;克隆化后筛选到5个AD13单克隆抗体细胞株,经间接ELISA鉴定,与AD13抗原有良好的特异性反应。上述研究为研发HCMV快速诊断试剂盒提供了原料,也为研究HCMV亚单位疫苗提供了相关的基础。
- 何赛廖旻晶靳晓瑞邱义兰李晓丹郑姣唐娜罗焕梁湘辉郭向荣刘如石
- 关键词：中和表位免疫反应性
- 人胱抑素C的原核表达及活性鉴定
- 2016年
- 目的建立胱抑素C蛋白(Cys C)原核表达系统,表达、纯化并鉴定重组的人Cys C。方法在不改变氨基酸序列的前提下,对Cys C的编码基因进行大肠杆菌同义密码子偏好性优化后,人工合成其序列,PCR扩增Cys C基因,在原核系统中表达重组人Cys C。纯化表达的Cys C重组蛋白,采用间接ELISA法测定其反应灵敏度及免疫原性。结果十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定可知,重组基因在大肠杆菌中获得了有效表达,相对分子质量约为35×103,Western blot结果进一步说明重组蛋白为Cys C蛋白,间接ELISA结果显示,在包被浓度为0.5mg/L时便产生了阳性值。结论成功建立了Cys C原核表达系统,Cys C蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性与免疫原性,为制备相应的抗原诊断单克隆抗体打下了基础,同时也为开发Cys C快速诊断ELISA试剂盒提供了可选原料。
- 李原刘如石蒋琰李桑郑姣何赛吴意
- 关键词：酶联免疫吸附试验免疫反应性免疫原性
