刘如石
- 作品数：98 被引量：398H指数：11
- 供职机构：湖南师范大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 单宁酶的固定化及其性质的研究被引量：15
- 2000年
- 采用海藻酸钙凝胶对单宁酶进行固定化 ,酶活力回收率高达 6 0 .6 % .对固定化单宁酶性质研究结果表明 ,以没食子酸丙酯为底物时 ,固定化单宁酶酶促反应的最适 p H为 6 .0 ,最适温度为 5 0℃ .在 p H5 .0 ,5 0℃ ,保温 1h或 p H6 .0 ,2 5℃时 1个月内保持稳定 ,或 p H4.0～ 7.0 ,2 5℃保温 6 h仍有 10 0 %的酶活 .固定化单宁酶处理没食子酸丙酯 2 0 m in,经 18个循环后 ,酶仍不失活 。
- 刘如石谢达平王革生邱义兰王征
- 小鼠Shh蛋白N端基因的克隆与原核表达
- 2008年
- 从小鼠(C57BL/6)10.5 d胚胎中提取总RNA经RT-PCR扩增出编码小鼠Shh基因N端cDNA序列,克隆到大肠杆菌表达载体pQEN3构建重组表达质粒pQEN3-Shh-N.重组质粒转化大肠杆菌BL21,经1.0mmol/L IPTG诱导,在SDS-PAGE上检测到20kDa目的蛋白带,与Shh N端蛋白预期大小一致,其蛋白表达量达到了全菌总蛋白的约30%.重组蛋白经Western blot鉴定结果显示,在20kDa处出现单一的显色条带,说明表达的重组蛋白为ShhN端蛋白,为研究Shh蛋白N端与毛发生长的功能奠定了基础.
- 刘如石任道龙徐甜韩梅胡翔肖鲜张健
- 关键词：SHH基因克隆原核表达
- 抗人细胞角蛋白7(CK7)单克隆抗体的制备及鉴定
- 2022年
- 用KLH偶联合成细胞角蛋白7(CK7)优势表位多肽片段(C14)免疫小鼠,经细胞融合技术制备CK7单克隆抗体(mAb),并收集临床组织进行免疫组化鉴定。C14多肽作为抗原具有良好的免疫反应性。本研究共获得了3株能稳定分泌抗CK7抗体的单克隆细胞株,选择亲和力较好的7A8单克隆抗体进行免疫组化鉴定,结果表明,本研究筛选的7A8单克隆抗体的质量浓度为0.49μg/mL时,与收集的临床标本均有良好的特异性反应,低于医院常用CK7检测试剂盒中抗体质量浓度2~5μg/mL,表现出较高的灵敏度。本研究筛选的7A8单克隆抗体为研发CK7快速诊断试剂提供了关键的原材料。
- 曾璇吴意刘如石曾冰洁扶春艳杨玉皎郑姣郑姣
- 关键词：免疫反应性检测试剂盒
- 一株高效稻草纤维素降解真菌的筛选与鉴定被引量：4
- 2011年
- 采用刚果红羧甲基纤维素钠培养基法、滤纸条降解法和胞外酶活性测定法从长白山原始森林的腐烂枯木和落叶腐质土中筛选一株高产纤维素酶的真菌,结合菌落形态学和分子生物学方法鉴定该菌株为产黄青霉,命名为CBS-1.滤纸崩解实验说明在24 h该菌对滤纸就具有明显的崩解能力,6 d后滤纸的失重率达到24.1%;以稻草粉为底物发酵120 h后,其胞外纤维素酶活性达到33.6 mkat/L,其活性高于已经报道的菌株,是一株具有研究开发潜力的纤维素酶生产菌株.
- 熊格生刘志吴莎莎卢向阳刘如石
- 关键词：水稻秸秆纤维素酶降解微生物
- 丙二醛通过激活p38和JNK通路抑制间充质干细胞成骨分化被引量：2
- 2012年
- 为了探索丙二醛(malonaldehyde,MDA)抑制间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的作用机制,用不同浓度的丙二醛孵育MSCs,进行成骨诱导培养,检测碱性磷酸酶活性和钙结节形成;并检测p38和JNK表达水平和磷酸化程度,用这两种信号分子的特异性阻断剂进行验证.结果发现,丙二醛浓度依赖性地降低MSCs碱性磷酸酶的活性,抑制钙结节的形成;并引起p38和JNK的表达上调和磷酸化增强,诱导JNK由胞浆向胞核转位;p38和JNK阻断剂对丙二醛的上述效应有拮抗作用.结果表明,丙二醛可抑制MSCs的成骨诱导分化,其作用机制涉及p38和JNK信号通路的参与.
- 李烨刘文锋刘如石印大中
- 关键词：丙二醛间充质干细胞丝裂原活化蛋白激酶信号通路成骨分化
- 运用染色质免疫沉淀技术筛选AP-2α的靶基因
- 2008年
- 在后基因组时代,DNA-蛋白质的相互作用是研究基因表达调控的一个重要领域.染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,简称ChIP)是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法.对与ChIP有关的实验条件进行了优化,获得了较优的实验条件,并运用ChIP实验筛选出了转录因子activatorprotein-2alpha(AP-2α)的未知靶基因,对于进一步研究AP-2α的功能和调控网络打下了基础.
- 贺爱兰肖湘文孙一兵刘如石胡翔周建林张健
- 关键词：靶基因AP-2Α
- 兔眼蓝莓组织培育苗高效快繁技术被引量：5
- 2013年
- 为获得兔眼蓝莓高效快繁的技术体系,以杰兔幼嫩茎段为试验材料,对增殖培养基、叶片再生体系、生根培养基、炼苗基质等组培苗生产的几个关键因素进行了优化.结果表明,WPM(改良)+1.0 mg/L ZT增殖培养基能使新梢增殖率达6倍以上,丛生苗生长速度快,而且株型健壮.在无菌苗叶片离叶尖1/3处,沿垂直叶片主脉方向将叶片切成二部分,叶片背面朝下接种于WPM(改良)+1.7 mg/L ZT培养基中,先暗培养20 d后光照培养,结果叶尖端和叶柄端的再生率分别达到93.8%和79.5%;1/4 WPM(改良)+1 g/L活性碳+0.1 mg/L IBA生根培养基能使试管苗生根率达95%;以水苔藓为炼苗基质可使幼苗成活率高达100%.因此,本研究从叶片再生、增殖培养、生根培养到炼苗这一系列环节进行了优化,建立了一种可高效、快速、稳定获得优良的兔眼组培种苗的技术.
- 邱义兰陈冰心邓喜艳黄雄军吴婷刘如石
- 关键词：兔眼蓝莓组培苗快速繁殖
- EBV包膜糖蛋白gp350抗原表位及其单克隆抗体
- 本发明涉及一种EBV包膜糖蛋白gp350抗原表位及其单克隆抗体。其中所述抗原表位的氨基酸序列为如SEQ ID NO：12所示。所述的单克隆抗体包含重链可变区的VHCDR1‑3和轻链可变区的VLCDR1‑3，其中所述VHC...
- 刘如石邱义兰
- 文献传递
- 丙二醛对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响被引量：2
- 2012年
- 为了探索氧化应激活性中间产物丙二醛对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制,体外培养的间充质干细胞经丙二醛处理后,在第4、7、14、21 d分别提取等份细胞进行碱性磷酸酶活性检测,第7 d时提取RNA通过实时定量RT-PCR测定ALP和Runx2/Cbfal mRNA表达,并在第21 d进行von Kossa染色,茜素红染色.研究发现:丙二醛通过降低碱性磷酸酶活性及ALP和Runx2/Cbfal mRNA的表达,抑制矿化骨节形成.这些结果表明:丙二醛可通过抑制ALP和Runx2/Cbfal通路,抑制小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化.
- 李烨杨沐思刘文锋杨慧刘如石汪保和印大中
- 关键词：丙二醛骨髓间充质干细胞成骨分化RUNX2CBFAL
- 黑曲霉单宁酶提纯及其性质的研究被引量：15
- 2001年
- 为探明单宁酶应用于生产的条件 ,从黑曲霉发酵液中分离提纯了单宁酶 ,经过 (NH4) 2 SO4分步沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和 Sephadex G- 15 0凝胶层析等 3步纯化 ,得到电泳纯的单宁酶 .用 SDS- PAGE法测得该酶有 2种亚基 ,相对分子质量分别为 7.5 9× 10 4,6 .0 3× 10 4.该酶为糖蛋白 ,蛋白质含量为 72 .5 % ,糖含量为12 .3% .该酶的最适 p H为 5 ,最适温度为 40℃ .
- 王征谢达平谭周进李立恒刘如石
- 关键词：黑曲霉单宁酶提纯
