唐文雅
- 作品数：7 被引量：17H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国家自然科学基金陕西省农业科技创新项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 腺病毒表达鸡GM-CSF及其对鸡骨髓细胞增殖活性的检测被引量：2
- 2012年
- 为了方便鸡粒细胞/巨噬细胞集落细胞刺激因子(GM-CSF)作为疫苗佐剂使用,用PCR方法扩增出鸡GM-CSF基因,将其连入人腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,将重组穿梭载体与腺病毒骨架重组后,获得重组腺病毒骨架载体,线性化后转染293SD细胞,获得能够表达鸡GM-CSF的腺病毒。将获得的重组腺病毒转导鸡成纤维细胞系DF1,细胞培养上清中,可以检测到GM-CSF刺激鸡骨髓细胞活性,为鸡GM-CSF进一步应用奠定了基础。
- 王兴龙郝华芳杜恩岐唐文雅张鹏陈胜利张渭东张淑霞党如意杨增岐
- 关键词：重组腺病毒活性检测
- 秦岭野鸟源新城疫病毒致病性与F、HN基因分子特征分析被引量：5
- 2013年
- 为研究新城疫病毒(NDV)在秦岭地区野生鸟群中的流行情况,在秦岭地区采集健康野鸟咽喉、泄殖腔拭子各252份,进行NDV的分离、鉴定,并对NDV分离株进行生物学特性研究和遗传进化分析。结果共分离获得5株野鸟源NDV,其致病指数MDT、ICPI和IVPI分别为60.0～76.8h、0.900～1.261、0.41～0.81;对F基因(47～420bp)进行遗传进化分析,5株分离株均属于基因VIb型,F蛋白裂解位点为112 RRQKRF117;HN基因氨基酸相似性为99.5%～99.8%,与鸽源基因VI型NDV相似性为91.4%～98.0%,与LaSota、F48E9相似性分别为87.1%～87.4%、89.0%～89.3%。上述结果表明,基因VIb型NDV在秦岭地区健康野生鸟类中流行,可能源于鸽源NDV,并具有强毒力的分子特征,但对鸡的表现为中等致病力,说明野鸟NDV具有独特的分子特征和致病性。
- 张渭东王丹阳唐文雅王兴龙姜振国陈胜利幕国辉刘海金贺生芳付向晶郝华芳刘阳坤杜恩岐杨增岐
- 关键词：F基因HN基因遗传进化分析
- 稳定表达新城疫病毒V蛋白禽源细胞系的建立被引量：1
- 2012年
- 为获得可以稳定表达新城疫病毒V蛋白的DF-1细胞系,以质粒载体为模板,用PCR方法扩增新城疫病毒V基因并引入酶切位点(EcoRⅠ和BamHⅠ),以同尾酶相连的方式与用EcoRⅠ和BglⅡ酶切的piggyBac转座子系统克隆质粒pTKL1-CMV-Puro-EGFP相连接,经酶切鉴定、测序分析正确后,用Lipo-fectamineTM2000将重组质粒pTKL1-CMV-Puro-EGFP-V和辅助质粒mPB共转染DF-1细胞,通过绿色荧光观察、嘌呤霉素筛选及蛋白表达的Western-blot检测,结果表明,稳定表达新城疫病毒V蛋白的DF-1细胞系已成功建立。证实piggyBac转座子系统能够用于稳定表达外源基因的禽源细胞系的构建,为piggy-Bac转座子系统在禽源细胞的应用和新城疫病毒V蛋白的研究提供了一定的参考资料。
- 唐文雅王兴龙张渭东杜恩岐陈胜利王丹阳党如意张淑霞杨增岐
- 关键词：PIGGYBAC转座子细胞系
- 稳定表达新城疫病毒V蛋白DF-1细胞系的建立
- 新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）可引起禽类的急性、高度接触性、致死性传染病，给养禽业生产和发展造成严重的危害，也给社会带来巨大的经济损失。长期以来NDV疫苗均是通过鸡胚生产，但这种传统...
- 唐文雅
- 关键词：PIGGYBAC转座子干扰素Β
- 文献传递
- 鸡IFN-β启动子荧光素酶报告载体的构建与活性检测被引量：2
- 2013年
- 构建并鉴定鸡β干扰素(IFN-β)基因启动子荧光素酶报告基因载体并进行转录活性分析。通过PCR方法从鸡基因组DNA中克隆鸡IFN-β基因启动子,亚克隆到含萤火虫荧光素酶报告基因pGL3-basic载体上,构建鸡IFN-β基因启动子荧光素酶报告基因载体pChIFN-β-luc;用脂质体法将构建的报告基因载体瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,并设置空白对照组和poly(I:C)处理组,检测荧光素酶的活性。经PCR扩增出鸡IFN-β基因启动子序列,双酶切及测序鉴定各重组体构建正确;转染后检测,pChIFN-β-luc具有转录活性,并且在poly(I:C)的刺激下其荧光素酶活性显著升高。本试验为进一步研究鸡IFN-β基因转录调控机制奠定了基础。
- 陈胜利唐文雅郝华芳王兴龙刘阳坤付向晶张鹏贺生芳杜恩岐杨增岐
- 关键词：启动子
- 1株猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因缺失毒株的基因组特征与演化分析被引量：6
- 2012年
- 为了解陕西猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异情况,对发病猪场进行PRRSV分离,采用RT-PCR方法对分离株NSP2基因和ORF5基因分别进行扩增,测序后进行序列分析。结果显示:得到1株PRRSV,命名为HZ1007株,属于美洲型;其NSP2 481位和533—561位存在30个氨基酸的不连续缺失,与高致病性PRRSV分子特征相似;GP5 85—95位氨基酸处出现了11个氨基酸的连续缺失;系统进化分析发现HZ1007与国内高致病性代表毒株HUN4、JXwn06、SY0608等亲缘关系较近,且与HUN4株相似性最高,为97.4%。本研究发现了GP5缺失型PRRSV,这在国内外尚属首例,且HZ1007株与高致病性PRRSV亲缘关系较近,在系统进化分析树上与高致病性毒株同属一个分支,其可能是高致病毒株新的变异型,其致病性和生物学特性需进一步研究分析。
- 付向晶王丹阳王兴龙张渭东宋祥军刘阳坤唐文雅慕国辉刘海金贺生芳杜恩岐杨增岐
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因
- 猪源副黏病毒HX01株分离鉴定、全基因测序与遗传变异分析
- 2012年
- 从陕西省户县某猪场患流感样症状病死仔猪肺脏分离得到1株副黏病毒,命名为猪源副黏病毒(PPMV)HX01株,对分离毒株鉴定后进行部分生物学特性研究和全基因测序分析。参考PPMV JL-1株基因组序列设计10对引物,对PPMV HX01株分段扩增并测序,将测序成功的各序列依次拼接得到全基因序列并进行序列比对。该病毒MDT为91.2h,ICPI和IVPI为0,EID50为10-10.25/mL,表明该毒株属于新城疫弱毒株。序列分析结果表明,PPMV HX01株(全基因序列GenBank登录号:JF795531)与NDV参考毒株全基因核苷酸同源性83.3%～99.8%,该病毒与基因Ⅱ型我国传统弱毒疫苗株La Sota全基因水平和各个基因编码开放阅读框的同源性均在99.5%以上,而与基因Ⅸ型国家标准强毒株F48E9和目前流行的基因Ⅶ型毒株亲缘关系较远。
- 陈胜利刘辉唐文雅郝华芳张渭东王兴龙杜恩岐张淑霞党如意杨增岐
- 关键词：新城疫病毒全基因组
