庄宇
- 作品数:6 被引量:10H指数:2
- 供职机构:南京工业大学生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 耐有机溶剂蛋白酶的突变体
- 本发明属于基因工程研究领域,涉及一种耐有机溶剂蛋白酶的突变体。本发明所述的五个突变改造的蛋白酶是由具有氨基酸序列为SEQIDNo.1的来源于铜绿假单胞菌的蛋白酶中氨基酸残基取代而产生的,所述的氨基酸突变包括第46、224...
- 何冰芳庄宇朱富成吴斌
- 新型耐有机溶剂蛋白酶产生菌的筛选及粗酶性质研究
- 天然有机溶剂耐受性蛋白酶为近年来发现的一类新型蛋白酶,具有在有机溶剂中稳定的天然特性。这类蛋白酶通常由耐有机溶剂极端微生物筛选获得。耐有机溶剂酶的发现及酶在有机介质中的催化作用的相关研究,大大拓宽了生物催化剂的应用范围。...
- 万茂华庄宇周云何冰芳
- 关键词:蛋白酶SERRATIA
- 来源于铜绿假单胞杆菌(Pseudomon asaeruginosa)所产蛋白酶PT121克隆表达及其在小肽合成上的应用被引量:2
- 2015年
- 【目的】基于前期筛选到的P.aeruginosa PT121所产有机溶剂耐受性蛋白酶,本研究对该蛋白酶进行克隆表达,研究了重组蛋白的酶学性质及小肽合成上的应用。【方法】参考文献中报道的相似蛋白酶pseudolysin设计引物从菌株PT121基因组中克隆到耐有机溶剂蛋白酶PT121基因las B。构建诱导表达重组质粒p ET22b-las B,于大肠杆菌中进行表达。考察蛋白酶PT121酶学性质及小肽合成上的应用。【结果】序列分析表明las B基因编码信号肽、前肽及成熟肽3个部分,成熟肽部分含有301个氨基酸,分子量约33 k Da,属于金属蛋白酶M4家族。通过破碎条件优化,一步法制备得到较为纯净的重组蛋白酶PT121,其比活力达7700 U/mg,该酶呈现了较高的热稳定性,p H稳定性及溶剂耐受性,与野生菌P.aeruginosa PT121所产蛋白酶性质一致。在50%DMSO体系中高效催化合成了多种小肽,其中阿斯巴甜前体(Cbz-Asp-Phe-NH2)产率高达91%。【结论】蛋白酶PT121基因在大肠杆菌中克隆表达为进一步研究相关催化机理及分子改造奠定了基础。
- 朱富成庄宇何冰芳
- 关键词:异源表达有机溶剂耐受性
- 耐有机溶剂蛋白酶的突变体
- 本发明属于基因工程研究领域,涉及一种耐有机溶剂蛋白酶的突变体。本发明所述的五个突变改造的蛋白酶是由具有氨基酸序列为SEQIDNo.1的来源于铜绿假单胞菌的蛋白酶中氨基酸残基取代而产生的,所述的氨基酸突变包括第46、224...
- 何冰芳庄宇朱富成吴斌
- 文献传递
- 基于分子动力学技术分析耐有机溶剂蛋白酶PT121的结构稳定机制
- 朱富成庄宇何冰芳
- 关键词:PSEUDOMONASAERUGINOSA分子动力学模拟
- 酶的定向进化研究及其在工业生物催化中的应用被引量:8
- 2011年
- 综合概括了各种蛋白质改造与微生物代谢途径改造的非理性定向进化技术的原理、特点,介绍了这些技术在高性能工业生物催化剂改造中的应用。
- 苏龙庄宇何冰芳
- 关键词:定向进化DNA改组易错PCR