李斌 作品数:7 被引量:16 H指数:3 供职机构: 大连工业大学 更多>> 发文基金: 军队医药卫生科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 化学工程 更多>>
麻疹病毒属病毒种特异性探针的设计 2010年 目的设计能检测麻疹病毒、犬瘟热病毒、牛瘟病毒、海豹瘟热病毒、海豚瘟热病毒和小反刍兽疫病毒的基因芯片探针,制备芯片用于以上病毒的种特异性检测。方法在ncbi网站下载上述病毒全部基因组序列信息,利用生物学软件CLUSTAL W对从GenBank中获得的6种病毒所有序列进行比对,获得每种病毒有意义的特异序列,以此作为设计oligo探针的备选序列,利用生物软件Primer Premier 5.0设计探针。选择最优化探针,制备基因芯片,并进行特异性验证。结果获得6条长度均一,退火温度相近,特异性良好的种特异性寡核苷酸探针。结论利用GenBank数据库和生物学软件Primer Premier 5.0设计病毒检测基因芯片探针,是一种快速、有效的方法。 朱晓光 刘冰 李斌 孙远 付玉 杨松涛 高玉伟 王铁成 夏咸柱 王承宇关键词:种特异性 探针 基因芯片 麻疹病毒属病毒检测基因芯片的建立 被引量:7 2010年 目的建立主要麻疹病毒属病毒(麻疹病毒、犬瘟热病毒、小反刍兽疫病毒、牛瘟病毒、海豹瘟热病毒、海豚瘟热病毒等)种特异性检测基因芯片。方法应用生物信息学方法从GenBank获得麻疹病毒属病毒的全部基因组序列,以Primer Premier5.0软件设计针对上述病毒的寡核苷酸探针并制备基因芯片,以上述6种病毒及犬副流感病毒、VERO细胞及健康犬组织等验证寡核苷酸芯片的特异性,以细胞毒和临床病料检测基因芯片的灵敏度、特异性和重复性,芯片制备后低温放置3、6、12个月后检验其检测稳定性。结果基因芯片检测到麻疹病毒属病毒种特异性信号,无杂信号及交叉信号,芯片方法的灵敏度为10-2TCID50,是PCR的100倍,病料检测与PCR相符率为100%。结论初步建立了麻疹病毒属病毒种特异性基因芯片,该方法灵敏度高,特异性强,适用于麻疹病毒属的流行病学调查和种特异性鉴定。 朱晓光 李斌 刘冰 杨松涛 高玉伟 王铁成 夏咸柱 王承宇关键词:基因芯片 种特异性 基因芯片技术在微生物学研究中的作用 被引量:4 2011年 基因芯片技术是20世纪90年代初新兴的分子生物学技术,具有高通量、高度并行性、灵敏度高、特异性强等优点。本文综述了基因芯片技术基本原理及其在微生物学方面的作用。 李斌 朱晓光 张仁舟 王承宇 夏咸柱关键词:基因芯片 微生物 室温固化半永久型脱模剂的研究 从上个世纪末到现在,世界上的橡胶和塑料产业持续以高速增长,其中我国已经是世界上橡胶、金属零构件、塑料的生产和消费大国,2010年生产塑料制品的能力已经达到5830万吨,并且还以每年10%以上的速度增长,橡胶年生产和消费量... 李斌关键词:室温固化 脱模剂 有机硅 有机氟 乳液 文献传递 H5N1型禽流感病毒核蛋白C端缺失削弱核蛋白间的相互作用 被引量:3 2009年 目的:克隆H5N1型禽流感病毒的核蛋白(NP)基因,将其定向插入双分子荧光载体,在细胞水平验证NP-NP的相互作用,进而确定NP-NP相互作用的关键区域。方法:根据双分子荧光互补(BiFC)实验的载体和NP基因序列设计引物,将NP的结构基因定向克隆到荧光载体上,得到重组荧光载体pBiFC-YC155-NP、pBiFC-YN155-NP、pBiFC-YC173-NP和pB-iFC-YN173-NP,瞬时转染293FT细胞,研究NP-NP相互作用;进一步对NP的C端进行缺失突变,然后定向克隆到pBiFC-YN173载体,令其分别与pBiFC-YC155-NP共转染293FT细胞,确定NP的C端在NP-NP相互作用过程中的地位。结果:构建了NP基因的BiFC载体pBiFC-YC155-NP、pBiFC-YN155-NP、pBiFC-YC173-NP和pBiFC-YN173-NP;将pBiFC-YC155-NP和pBiFC-YN173-NP、pBiFC-YC173-NP和pBiFC-YN173-NP共转染293FT细胞后出现了荧光;缺失实验表明,NP的C端是NP在体内相互作用形成寡聚体所必需的。结论:验证了H5N1型禽流感病毒NP在体内的相互作用,并初步证明NP的C端是NP形成寡聚体的必需片段,为进一步研究NP的作用奠定了基础。 李斌 周晓巍 张莹莹 孙玉梅关键词:禽流感病毒 核蛋白 禽流感病毒反向遗传系统的构建 禽流感病毒每年都会导致禽类很高的发病率和死亡率,造成严重的经济损失,同时种种迹象表明一些禽流感病毒可以跨种传播,近年来的H5N1亚型禽流感病毒直接感染人类后造成了很高的死亡率,对人类的健康乃至生命安全造成了极大的威胁。因... 李斌关键词:禽流感 文献传递 几种犬呼吸道病毒基因芯片检测方法的建立及初步应用 对犬而言,传染性疾病主要有消化道疾病和呼吸道疾病,而呼吸道疾病是一年四季的常发病,尤其春季、秋季、冬季以及季节交替时候多发,在临床上因其病因复杂,治疗周期长而备受人们关注。而犬呼吸道病毒传染病主要有犬瘟热病毒,犬副流感病... 李斌关键词:多重PCR 基因芯片 文献传递