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天仙子发根诱导及碳源、氮源和磷源对发根培养的影响被引量：2: 2016年; 利用发根农杆菌介导的遗传转化法,诱导天仙子发根.结合组织培养技术和高效液相色谱法,改变培养基碳源种类、硝态氮和铵态氮的比例和磷源的浓度,研究其对天仙子发根生长及莨菪碱和东莨菪碱质量分数的影响.结果表明:发根诱导中,C58C1的诱导效率最高,达到84.85%.蔗糖为碳源,发根干质量生物量积累最多,莨菪碱质量分数最高;果糖为碳源,东莨菪碱质量分数最高.WPM基本培养基中,保持总氮源浓度为15mmol/L,当NO_3^-与NH_4^+的比例为2∶1时,发根在生物量积累、莨菪碱和东莨菪碱质量分数上都达到最高;而当全部为NO_3^-时,发根干质量最少且莨菪碱和东莨菪碱的质量分数最低.高浓度KH_2PO_4(5.00mmol/L)时,发根的干质量最大,低浓度KH_2PO_4(0.31mmol/L)时,莨菪碱和东莨菪碱的质量分数最高.; 侯艳玲邱飞王辉王中平兰小中廖志华刘小强; 关键词：天仙子发根发根农杆菌碳源磷源

托品烷生物碱生物合成途径中三个新基因的发现与功能鉴定: 天然产物(Natural Products)是药物的重要来源，在治疗疾病、维护健康和改善生活质量等方面起到十分重要的作用。托品烷生物碱(Tropane Alkaloids，TAs)是一类具有独特托品烷骨架(Tropane...; 邱飞; 关键词：生物合成

颠茄WRKY类转录因子基因及其重组植物表达载体和应用: 本发明涉及一种颠茄WRKY类转录因子基因及其重组植物表达载体和应用，该基因对东莨菪碱生物合成途径特有基因启动子的激活作用，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，本发明中...; 廖志华陈敏杨春贤邱飞强玮

南方红豆杉DXS基因的克隆与功能分析被引量：8: 2018年; 目的从南方红豆杉Taxus chinensis获得紫杉醇生物合成途径关键酶1-脱氧-D-木糖醇-5-磷酸合成酶(1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase,DXS)基因(TcDXS)并进行生物信息学和表达模式分析以及亚细胞定位和功能鉴定。方法采用RACE技术获得TcDXS全长;利用qRT-PCR分析TcDXS在南方红豆杉不同部位的表达情况;采用亚细胞定位分析TcDXS在细胞中的位置;用颜色功能互补实验检测TcDXS功能。结果获得的TcDXS由3 031个核苷酸组成,包含了2 229 bp编码区,编码742个氨基酸,其蛋白相对分子质量为79 400,等电点(p I)为7.99;qRT-PCR检测表明TcDXS在南方红豆杉的嫩叶柄中表达量最高,其次是叶和皮,根和茎中的表达量较低;亚细胞定位结果表明,TcDXS定位在叶绿体中;功能互补实验结果表明,在共同转化p AC-BETA和pTrc-TcDXS的大肠杆菌菌落呈现出橘黄色。结论 TcDXS的克隆和功能分析为深入研究紫杉醇生物合成途径和实现其代谢工程奠定了基础。; 王辉王辉李忠玥邱飞兰小中邱飞兰小中; 关键词：南方红豆杉紫杉醇亚细胞定位

莨菪醛还原酶及其应用: 本发明公开了莨菪醛还原酶(hyoscyamine aldehyde reductase synthase，HAR)及其应用，具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸残基序列，如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；经原...; 廖志华陈敏杨春贤邱飞曾俊岚; 文献传递

拟南芥UGT74F2在催化苯乳酸合成苯乳酰葡萄糖中的应用: 本发明公开了拟南芥UGT74F2在催化苯乳酸发生糖基转移反应合成苯乳酰葡萄糖中的应用，经研究发现来源于拟南芥的UGT74F2能催化苯乳酸合成苯乳酰葡萄糖，且催化活性高于目前已报道的用于托品烷生物碱合成的AbUGT1，可用...; 曾俊岚邱飞赵腾飞张巧卓刘雪超廖志华; 文献传递

托品烷生物碱转运蛋白AbTAUP1及其应用: 本发明公开了托品烷生物碱转运蛋白AbTAUP1及其应用，托品烷生物碱转运蛋白AbTAUP1的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，或SEQ ID NO.8所示序列经一个或几个氨基酸残基的取代、突变或缺失且编码具有相同功...; 廖志华陈敏杨春贤曾俊岚邱飞; 文献传递

天仙子中参与托品烷生物碱生物合成的ArAT基因的克隆及功能鉴定被引量：1: 2017年; 托品烷类生物碱是临床上广泛应用的抗胆碱药物,其生物合成涉及到苯丙氨酸的转氨基反应。根据天仙子(Hyoscyamus niger)侧根和叶的转录组数据,筛选到3条功能注释为芳香族氨基酸氨基转移酶的基因,命名为HnArAT1、HnArAT2和HnArAT3。通过序列同源性分析,发现HnArAT3与颠茄的AbArAT4的氨基酸序列同源性最高,两者为直系同源。组织表达谱显示,HnArAT3基因在根中特异性表达,与其他3个合成途径基因(PMT、TRI和H6H)表达模式相同。用病毒诱导的基因沉默(VIGS)方法在天仙子植株中鉴定HnArAT3的功能,对感染了病毒的植株,用实时荧光定量PCR检测基因的表达量,HPLC法测定托品烷类生物碱的含量。结果表明,在pTRV2-HnArAT3干扰的植株中,HnArAT3基因的表达量有显著下降,3种托品烷类生物碱莨菪碱、山莨菪碱和东莨菪碱含量也有显著的降低。以上结果表明HnArAT3是天仙子中参与托品烷类生物碱生物合成的苯乳酸支路途径基因。HnArAT3基因的克隆为进一步研究托品烷类生物碱的生物合成和代谢调控奠定了基础,也为开展托品烷类生物碱的代谢工程研究提供了新的候选靶基因。; 李笑强玮邱飞陈敏兰小中廖志华刘小强; 关键词：天仙子

苯乳酸尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶的应用: 本发明公开了苯乳酸尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶(Phenyllactate UDP‑Glycosyltransferase，PLA‑UGT)基因的应用，苯乳酸尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶PLA‑UGT的氨基酸序列如SEQ ID ...; 廖志华陈敏杨春贤曾俊岚邱飞; 文献传递

具有催化莨菪碱发生脱甲基反应生成N-去甲莨菪碱的莨菪碱N-去甲酶及其应用: 本发明公开了具有催化莨菪碱发生脱甲基反应生成N‑去甲莨菪碱的莨菪碱N‑去甲酶及其应用，莨菪碱N‑去甲酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；编码所述莨菪碱N‑去甲酶的核酸序列如SEQ ID NO.3所示；经研究发现该...; 邱飞廖志华陈敏杨春贤孙秀丽

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邱飞