廖志华 作品数:201 被引量:999 H指数:18 供职机构: 西南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
萝芙木色氨酸脱羧酶蛋白编码序列 一种萝芙木色氨酸脱羧酶蛋白编码序列,属于基因工程领域。包括:编码具有色氨酸脱羧酶活性的多肽的核苷酸序列,而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.1中从核苷酸第154-1653位的核苷酸序列有70%的同源性;或者所述的核... 廖志华 陈敏 谌容文献传递 过表达HDR和ADS基因对青蒿素生物合成的影响 被引量:8 2014年 青蒿素是从草本药用植物黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离提取的一种含有过氧桥基团结构的新型倍半萜内酯,它是世界卫生组织推荐治疗脑型疟疾和抗氯喹恶性疟疾的特效药物。本研究采用过表达青蒿素生物合成途径中关键酶基因的方法,培育出青蒿素含量提高的转基因黄花蒿。采用根癌农杆菌介导遗传转化方法,潮霉素抗性筛选获得同时转化HDR和ADS两个基因的转基因黄花蒿;通过基因组PCR检测确认获得了6个共转化HDR和ADS基因的转基因株系。实时荧光定量PCR检测基因表达量,结果表明转基因株系中HDR和ADS基因表达量均高于非转基因植株(仅ah3株系ADS基因表达量没有显著性提高);HPLC测定青蒿素含量结果表明转基因株系中青蒿素含量均高于非转基因植株。青蒿素含量最高的转基因株系ah70中青蒿素含量为非转基因对照的3.48倍。本研究实验结果表明,过表达HDR和ADS基因在黄花蒿的代谢途径中具有提高青蒿素含量的作用,为进一步利用代谢工程技术培育青蒿素高产转基因黄花蒿提供了良好基础。 王亚雄 龙世平 曾利霞 向礼恩 林智 陈敏 廖志华关键词:黄花蒿 青蒿素 Cloning of H6H Gene from Atropa belladonna and Construction of the Efficient Plant Expression Vector 2011年 [Objective] The aim was to clone H6H gene from Atropa belladonna and construct an efficient plant expression vector.[Method] The coding sequence of H6H(Hyoscyamine 6β-hydroxylase)was cloned from Atropa belladonna with RT-PCR.Then,the sequence was subcloned into the reconstructed plant binary expression vector p2301 to construct the recombinant vector p2301-H6H,which was then introduced into Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 and Agrobacterium rhizogenes strain C58C1,respectively.[Result] The engineering bacteria p2301-H6H-LBA4404 and p2301-H6H-C58C1 which could be directly used in genetic improvement were obtained.[Conclusion] The present research provided basis for the increasing of alkaloid content of Atropa belladonna by plant genetic engineering technology. 王贵君 郑月 陈敏 廖志华红景天苷的生物合成途径及生物技术研究进展 被引量:10 2010年 红景天苷是景天科红景天属植物最为重要的药效成分,由于其具有多种重要的药用功效而成为当今天然产物研究的热点之一。在全面总结前人研究成果的基础上,综述了红景天苷生物合成可能的3条途径:苯丙烷类代谢途径、酪氨酸脱羧代谢途径和酪氨酸转氨代谢途径;利用红景天组织培养、细胞培养和其他生物进行红景天苷生物合成的方法:以及基因克隆与遗传转化在红景天苷生物合成中的作用与研究现状等相关内容。最后展望了相关研究工作的发展前景。 张祖荣 廖志华关键词:红景天苷 生物合成 AaPIF3对青蒿素生物合成基因及AaERF1的转录调控研究 被引量:2 2020年 AaPIF3是药用植物黄花蒿(Artemisia annua)中正调控青蒿素生物合成的一个bHLH转录因子,但其具体的调控机制并不清楚.综合采用分子生物学和生物化学方法研究AaPIF3调控青蒿素生物合成的机制,采用酵母单杂交(Yeast One-hybrid)技术研究AaPIF3与青蒿素生物合成途径中4个基因(ADS,CYP71AV1,DBR2和ALDH1)和AaERF1启动子的相互作用;采用实时荧光定量PCR技术检测AaERF1的表达量;采用双荧光素酶(Dual-Luciferase)技术研究AaPIF3对AaERF1的转录激活作用.结果表明,AaPIF3均不能与青蒿素生物合成途径中4个基因启动子中的顺式作用元件结合,但能与AaERF1启动子结合;过表达AaPIF3的青蒿中AaERF1的表达量为野生型对照的3.34~6.30倍;双荧光素酶实验表明,AaPIF3能显著提高AaERF1启动子活性,为对照的1.67倍.得出AaPIF3对青蒿素生物合成的调控是属于间接调控,其具体调控机制为AaPIF3通过直接转录激活AaERF1而参与青蒿素生物合成的调控. 扎西次仁 张巧卓 杨春贤 兰小中 廖志华关键词:黄花蒿 酵母单杂交 转录调控 RcTAT基因及其RNAi表达载体和应用 本发明公开了RcTAT基因及其RNAi表达载体和应用,RcTAT基因序列如SEQ ID No.12所示,将大花红景天TAT基因干扰表达后,大花红景天毛状发根中的生物活性物质酪醇和红景天甙的含量显著提高;表明RcTAT的表... 兰小中 廖志华 陈敏 权红 曾俊岚文献传递 一种从波棱瓜中提取具有抗菌活性组分的方法 本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明请求保护从藏药材波棱瓜子中提取具有抗菌活性组分的方法,该方法是利用溶剂从干燥粉碎的波棱瓜子中通过固液提取法提取出粗提物,浓缩得到浸膏,然后通过脱脂、浓缩、萃取得到具有显著抗菌效果... 陈敏 廖志华 兰小中 徐冰喜马拉雅紫茉莉正丁醇提取物的化学成分 被引量:10 2014年 对喜马拉雅紫茉莉(Mirabilis himalaica)正丁醇提取物进行研究,利用反相硅胶柱色谱、Sephedex LH-20、半制备HPLC进行分离,通过理化性质和UV、IR、MS、1 H-NMR和13 C-NMR等方法进行结构鉴定,分离鉴定5个化合物,分别为:腺苷(1),色氨酸(2),1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸(3),6′-O-(E)-feruloylsucrose(4),丁香树脂酚单-β-D-葡萄糖苷(5),化合物1-4均为首次从该植物中得到,通过还原力和DPPH自由基清除能力试验表明,化合物2、4、5仅有较弱的抗氧化能力。 邹妍琳 胡益杰 刘爽 令狐浪 兰小中 廖志华 陈敏关键词:正丁醇 紫茉莉科 化学成分 南方红豆杉DXS基因的克隆与功能分析 被引量:8 2018年 目的从南方红豆杉Taxus chinensis获得紫杉醇生物合成途径关键酶1-脱氧-D-木糖醇-5-磷酸合成酶(1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase,DXS)基因(TcDXS)并进行生物信息学和表达模式分析以及亚细胞定位和功能鉴定。方法采用RACE技术获得TcDXS全长;利用qRT-PCR分析TcDXS在南方红豆杉不同部位的表达情况;采用亚细胞定位分析TcDXS在细胞中的位置;用颜色功能互补实验检测TcDXS功能。结果获得的TcDXS由3 031个核苷酸组成,包含了2 229 bp编码区,编码742个氨基酸,其蛋白相对分子质量为79 400,等电点(p I)为7.99;qRT-PCR检测表明TcDXS在南方红豆杉的嫩叶柄中表达量最高,其次是叶和皮,根和茎中的表达量较低;亚细胞定位结果表明,TcDXS定位在叶绿体中;功能互补实验结果表明,在共同转化p AC-BETA和pTrc-TcDXS的大肠杆菌菌落呈现出橘黄色。结论 TcDXS的克隆和功能分析为深入研究紫杉醇生物合成途径和实现其代谢工程奠定了基础。 王辉 王辉 李忠玥 邱飞 兰小中 邱飞 兰小中关键词:南方红豆杉 紫杉醇 亚细胞定位 水分胁迫对中华芦荟部分药用成分含量的影响 被引量:14 2007年 研究了水分胁迫处理对药用植物中华芦荟的甙、多糖、总糖、可溶性糖、蛋白质及脯氨酸含量以及生物量的影响.结果表明:甙含量与土壤含水量呈极显著的负相关,水分胁迫增加了单位干质量叶片中的甙含量;叶片中的主要药用成分之一多糖含量明显下降,总糖的含量也不断减少;而可溶性糖和脯氨酸含量明显上升,与土壤含水量呈显著负相关;受到水分胁迫的中华芦荟与对照比较,整株、地上部分和根的鲜重均下降,并且胁迫强度愈大降低愈多.说明随着水分胁迫不断增加,中华芦荟次生代谢活跃,光合作用减弱,同化能力下降,从而增加了甙的含量,积累的碳水化合物总量不断减少,而在一定程度的水分胁迫处理中,可溶性糖和脯氨酸含量的增加与其增强植物抗性的生理功能密切相关.随着干旱失水,芦荟多糖含量及生物量的减少降低了芦荟的经济价值. 兰小中 杨春贤 陈敏 谈锋 廖志华关键词:中华芦荟 水分胁迫 药用成分