陈玉娟
- 作品数:11 被引量:45H指数:5
- 供职机构:北京工商大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家林业公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学更多>>
- 白假丝酵母环核苷酸磷酸二酯酶2的异源表达、纯化与酶学特性分析被引量:2
- 2020年
- 为获得白假丝酵母(Candida albicans)环核苷酸磷酸二酯酶2(phosphodiesterases 2,PDE2),以C.albicans基因组为模板,经聚合酶链式反应扩增获得目的基因,构建重组质粒pET28a-C.albicans pde2,转化至大肠杆菌BL21中,获得稳定表达的基因工程菌。所表达的蛋白通过亲和层析柱(Ni-NAT)、离子交换层析柱(Q-Sepharose)和分子筛层析柱(Sephacryl S200)逐步进行纯化。应用高效液相色谱方法测定纯化的PDE2蛋白(约62 kDa)对单底物及双底物的水解特性,证明PDE2在0.385 mg/mL质量浓度下,对0.4 mmol/L cAMP和cGMP的水解率达到60%~70%,且对底物cAMP具有更高的亲和力,并确定该酶具有较高生物学活性和稳定性,为该蛋白的晶体学解析及在C.albicans中的生理病理机制研究提供理论依据。
- 李赤霞陈滢张萌陈玉娟田元元王友升
- 关键词:白假丝酵母表达纯化高效液相色谱
- 1株耐氯霉素腐败微生物的16S rRNA基因序列与碳源代谢指纹图谱分析
- 2014年
- 从污染的化妆品中分离到1株具有氯霉素抗性的革兰阴性菌213#。通过16S rRNA基因同源性比较,表明分离菌与GenBank中洋葱伯克霍尔德(Burkholderia cepacia)标准菌株同源性为100%,通过Biolog GN2MicroPlate分析该病原菌对95种碳源的利用能力,发现分离菌与Biolog数据库中的B.cepacia具有最相似的特征代谢指纹。
- 王友升何欣萌张燕陈玉娟
- 关键词:RRNA基因序列
- 1株树莓果实采后病原真菌的rDNA ITS序列及碳源代谢指纹图谱分析被引量:10
- 2015年
- 为增强对树莓果实采后病害防治的针对性,从采后贮藏期间自然发病的"泼鲁德"树莓果实中分离到1株真菌菌株079#。通过形态学观察以及rDNA ITS序列分析确定为桃吉尔霉(Gilbertellapersicaria)。通过Biolog FF Micro Plate分析桃吉尔霉对95种碳源的代谢指纹图谱,发现培养168 h时其最适碳源有蔗糖、D-核糖、阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖醛酸、γ-氨基丁酸、D-苹果酸,癸二酸、琥珀酰胺酸、D-山梨醇、木糖醇、N-乙酰-D-半乳糖胺、L-天冬氨酸、L-丙氨酸、L-谷氨酸等64种,而不可利用碳源主要有N-乙酰-D-葡萄糖胺、N-乙酰-β-D-甘露糖胺、核糖醇、D-阿拉伯糖醇、D-纤维二糖、环式糊精、D-果糖、L-海藻糖、D-半乳糖、D-半乳糖醛酸、龙胆二糖、葡糖醛酰胺、m-肌醇、麦芽糖、β-甲基-D-半乳糖苷、D-阿洛酮糖等19种。
- 王友升张燕何欣萌陈玉娟
- 关键词:采后病害
- 一种蓝莓的减压贮藏保鲜方法
- 一种蓝莓减压贮藏保鲜方法,其中减压贮藏时的绝对压强为50-75kPa,贮藏温度为0℃。经过上述方法处理的蓝莓,保证了较高的好果率的同时,提高了还原型谷胱甘肽和蛋白质含量,大大延长了货架期。
- 王友升王贵禧李健何欣萌安琳梁丽松陈玉娟田元元张燕
- 文献传递
- 4株无花果病原真菌分离鉴定与碳源代谢指纹谱分析被引量:1
- 2023年
- 无花果果实皮薄多汁,采后易受微生物侵染。分离筛选采后贮藏期间无花果发病部位的病原真菌,结合形态学观察、真菌rDNA内转录间隔区(internal transcribed spacer, ITS)序列分析、系统发育树构建进行研究,并将分离得到的病原真菌回接至健康果实,发现健康果实出现与发病果实相同的病症。最终从无花果叶子和果实上分别分离到4株丝状病原真菌,其中179#为链格孢菌(Alternaria alternata)、180#为气味镰刀菌(Fusarium odoratissimum)、181#为内生炭疽杆菌(Colletotrichum endophyticum)和182#为总枝状毛霉(Mucor racemosus),其中气味镰刀菌、内生炭疽杆菌和总枝状毛霉为无花果中未见报道的病原真菌。利用Biolog微生物鉴定系统对4株病原真菌进行碳源代谢指纹谱分析,发现它们对60种碳源具有相似的代谢特征,包括L-阿拉伯糖、D-纤维二糖和α-环式糊精等56种可利用碳源以及N-乙酰-D-半乳糖胺、N-乙酰-β-D-甘露糖胺、L-海藻糖和D-乳酸甲酯4种不可利用碳源。研究结果旨在为无花果病原真菌的生物学特征以及采后病害防治的研究提供参考依据。
- 王珂姚婷丁凤兰丁凤兰陈玉娟张燕何欣萌
- 关键词:无花果病原真菌形态学观察
- 5株桃、李果实采后褐腐病菌鉴定、rDNA ITS序列与碳源代谢指纹图谱分析被引量:13
- 2012年
- 从采后贮藏过程中发病的桃、李果实中分离到5株丝状病原真菌。对其进行形态学特征观察以及核糖体rDNA ITS序列分析和95种碳源代谢指纹图谱分析。结果表明:5株病原真菌均为果生链核盘菌(Monilinia fructicola),其中091#和089#菌与Monilinia fructicola(FJ515894)的亲缘关系较近。5株褐腐病菌对D-果糖、麦芽糖、蔗糖等共56种碳源的代谢能力相同,包括51种最适碳源和5种不可利用碳源,其中Monilinia fructicola 091#与089#的代谢指纹图谱最接近,而Monilinia fructicola 086#、071#、072#的代谢指纹图谱最接近。因此利用rDNA ITS序列和碳源代谢指纹图谱均可区分桃、李果实5株褐腐病菌不同菌株之间的差异,且两种方法具有可比性。
- 王友升张燕陈玉娟
- 关键词:桃果实褐腐病菌RDNAITS序列分析
- 酿酒酵母环核苷酸磷酸二酯酶1的异源表达、分离纯化与活性检测被引量:1
- 2020年
- 制备获得高纯度酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)环核苷酸磷酸二酯酶1(phosphodiesterase 1,PDE1)蛋白,以pGM-T-S.cerevisiae基因组为模板,聚合酶链式反应扩增目的基因,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21中,并诱导表达。高压破碎菌体提取物先后通过亲和层析纯化系统(Ni-NAT柱)、离子交换纯化系统(Q-Sepharose柱)和分子筛纯化系统(Sephacryl S200柱)进行纯化,经酶活性测定显示,纯化后的蛋白活性达92%。研究结果可为将来该蛋白的晶体学分析和在酿酒酵母中的代谢调控提供前期基础。
- 陈滢李赤霞陈玉娟田元元张萌韩潆仪王友升
- 关键词:酿酒酵母表达纯化酶活性检测
- 1-甲基环丙烯对蓝莓果实品质与活性氧代谢影响的多变量解析被引量:11
- 2013年
- 主要利用多变量分析方法探讨1-甲基环丙烯(1-MCP)对蓝莓果实品质及活性氧代谢的影响。结果表明,在1℃贮藏期间及货架期期间,1-MCP可有效延缓蓝莓好果率下降、抑制呼吸速率、pH值、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的升高。在贮藏前期,15μL/L 1-MCP可显著促进蓝莓果实过氧化氢(H2O2)含量降低,而贮藏47d时,1-MCP有效延缓H2O2含量下降。主成分分析结果表明,在贮藏前期,5μL/L 1-MCP影响蓝莓果实多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)活性和MDA含量的变化,且在随后货架期期间,对蓝莓果实pH值、呼吸速率、GSH含量以及过氧化氢酶(CAT)活性的影响较为显著;贮藏后期,蓝莓果实POD活性和MDA含量主要受15μL/L 1-MCP影响,而在货架期后期,5μL/L 1-MCP对好果率和抗坏血酸过氧化物酶(APX)、脂肪氧合酶(LOX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性变化影响较大。偏最小二乘分析与通径分析的结果表明,APX、LOX和SOD活性是影响蓝莓果实好果率的关键因子。呼吸速率、MDA和蛋白质含量对好果率的影响主要通过CAT活性和GSH含量体现。H2O2含量则主要受CAT和SOD活性变化的影响,且MDA对蓝莓果实H2O2含量的影响主要通过GSH含量体现。
- 王友升蔡琦玮安琳张燕田元元何欣萌梁丽松王贵禧陈玉娟李健
- 关键词:1-甲基环丙烯蓝莓活性氧代谢
- 5株枣果实采后病原真菌分离鉴定及rDNA ITS区序列分析被引量:1
- 2022年
- 枣果实皮薄肉厚、细嫩多汁,不仅在采后运输中易损坏,也极易受微生物侵染而腐烂变质。对造成枣果实采后腐烂变质的病原真菌进行分离筛选,结合形态学观察、真菌rDNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)的序列分析构建进化树,同时进行菌株的回接及病斑病症的验证,最终从采后贮藏过程中自然发病的冬枣和骏枣果实上分别分离到3株(221^(#)、227^(#)、232^(#))和2株(229^(#)和230^(#))丝状病原真菌。经形态学初步鉴定菌株221^(#)和227^(#)为镰孢菌,229^(#)和232^(#)为葡柄霉,230^(#)为短柄霉属真菌,通过rDNA ITS区序列分析,鉴定221^(#)为木贼镰孢菌(Fusarium equiseti),227^(#)为变红镰孢菌(Fusarium incarnatum),229^(#)为番茄匍柄霉(Stemphylium lycopersici),230^(#)为产酶短梗霉(Aureobasidium proteae),232^(#)为葡柄霉(Stemphylium armeriae)。目前这5种病原真菌均未发现可导致枣果实采后病害发生的报道,其中Stemphylium armeriae未见引起植物病害的报道。通过挖掘出更多的引起枣果实病害的病原真菌种类,希望为枣果实病害生物防治措施的研究提供参考依据。
- 姚婷丁凤兰丁凤兰马国为陈玉娟张燕陈玉娟张燕
- 关键词:采后病害病原真菌形态学观察
- 减压处理对蓝莓果实品质影响的多变量分析被引量:6
- 2014年
- 利用多变量分析方法探讨了4种减压条件对蓝莓果实品质的影响.结果表明,减压贮藏的蓝莓果实的硬度、总酸、品质、色泽、香气和风味降低,固酸比略有升高.主成分分析的结果表明,贮藏29 d时,0.050 MPa处理对蓝莓果实的风味、固酸比、硬度、总酸的影响较为显著;贮藏49 d时,0.050 MPa处理和0.075 MPa对蓝莓果实色泽、风味、固酸比、硬度、总酸、品质评价、甜度、甜酸比有较大影响.偏最小二乘回归分析得知,风味和品质与甜酸比、酸度和固酸比呈显著正相关性,与香气、硬度、坚硬度、甜度和色泽呈显著负相关.运用通径分析可知,色泽、甜酸比、酸度、固酸比、总酸、甜度对品质和风味的直接影响最强.
- 何欣萌安琳陈玉娟张燕李健梁丽松王贵禧王友升
- 关键词:蓝莓