王金慧
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室更多>>
- 发文基金：广东省社会发展领域科技计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 南极冰藻GPx、GST和SAHH基因的克隆、定量分析及原核表达载体的构建
- 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)与谷胱甘肽硫转移酶(Glutathione S-transferase,GST)是谷胱甘肽抗氧化系统中的重要酶类,能够清除体内H2O2和许多有机氢...
- 王金慧
- 关键词：南极冰藻GST基因原核表达
- 文献传递
- 南极衣藻谷胱甘肽-S-转移酶基因的表达及其对大肠杆菌低温耐受性的增强作用
- 2013年
- 谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferase,GST,EC2.5.1.18)是生物体内一种重要的抗氧化酶,为阐明GST在南极衣藻(Chlamydomonas sp.ICE-L)中的具体地位,采用实时荧光定量PCR对不同温度下南极衣藻的GST基因的表达进行了分析;并构建了原核表达载体pET28a(+)-GST,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,通过平板培养法探讨了重组菌E.coli BL21(pET28a(+)-GST)对低温胁迫的耐受性。结果显示,GST在0℃时表达量最高,最高可达对照组的两倍多;pET28a(+)-GST重组表达载体在E.coli BL21中实现了高效表达,且主要以包涵体形式存在,经HisTrap HP柱分离纯化获得高纯度的GST融合蛋白,并通过SDS-PAGE及Western blot分析得以验证;对低温胁迫实验发现南极衣藻GST蛋白的表达可以提高重组菌E.coli BL21对低温的耐受性,说明GST基因对南极衣藻适应南极低温环境具有重要作用。
- 彭跃跃丁燏王金慧简纪常鲁义善刘莹
- 关键词：谷胱甘肽-S-转移酶
- 南极冰藻Chlamydomonas sp.ICE-L谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆及其生物信息学分析
- 王金慧
- 关键词：南极冰藻谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽硫转移酶硒代半胱氨酸
- 不同因素对牡蛎壳吸附尿素的性能及缓释性的影响被引量：7
- 2011年
- 采用紫外可见分光光度计法,在吸附温度、吸附时间、pH等不同参数条件下测定了牡蛎壳粉对尿素的吸附率及吸附后的缓释度。单因素试验结果表明:牡蛎壳粉对尿素吸附性较好的最佳吸附参数是,吸附温度为45℃、吸附时间为3 h、pH为8.5、牡蛎壳粉活化温度为700℃、活化时间为2 h;在最佳吸附参数条件下,牡蛎壳粉对尿素的最大吸附量为35.7 g/kg;牡蛎壳粉吸附尿素后其缓释性较好,25℃下静水中28 d内缓释度小于80%,尿素释放期约为35 d,释放期内日平均释放率较平稳。
- 胡世伟宋文东王金慧刘娟花马孝甜苗东亮
- 关键词：尿素吸附性缓释性
- 徐闻卤水中碳、氮及微量元素的分析被引量：1
- 2011年
- 用总有机碳分析仪测定分层卤水中的总碳与总有机碳含量。结果表明,上层卤水与中层卤水相比,总碳含量低,总有机碳含量高;上层卤水中总有机碳含量占总碳的67.35%,中层卤水总无机碳含量占总碳含量的99.88%。用微波消解-紫外分光光度法测得卤水中总氮含量为17.74 mg/L。用ICP与ICP-MS测定了卤水中14种微量元素,其中Ca含量最高,达到36.5 mg/kg,其次是Fe、Se和Li,含量分别为14.8mg/kg、8.1 mg/kg和4.9mg/kg,Hg的含量最低,其含量小于0.001 mg/kg。
- 胡世伟李世杰秦培文宋文东王金慧李晓菲
- 关键词：卤水总有机碳总氮微量元素
- 南极冰藻Chlamydomonas sp.ICE-L S-腺苷同型半胱氨酸水解酶基因的克隆及其生物信息学分析被引量：2
- 2011年
- S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase,SAHH)是一种细胞内广泛存在的酶,在调节生物体转甲基化反应中占据重要地位。本研究通过RT-PCR及RACE-PCR技术克隆了南极冰藻(Chlamydomonas sp.ICE-L)S-腺苷同型半胱氨酸水解酶全序列,命名为ICE-LSAHH。ICE-LSAHH全长1 844 bp,包括5′非编码区36 bp,3′非编码区344 bp,含有一个较长的poly(A)尾。开放阅读框1 461 bp,编码487个氨基酸。根据推导的氨基酸序列预测其分子量为53.0 kD,理论等电点为5.16。SignalP 3.0、TMHMM Server v.2.0、NetNGlyc 1.0和NetPhos 2.0预测结果显示,ICE-LSAHH蛋白不存在信号肽与跨膜区,含有1个N-糖基化位点及23个磷酸化位点。利用ClastalX 2.0及MEGA 5.0软件,以邻位相连法对南极冰藻及其他物种SAHH构建系统进化树,结果显示,ICE-LSAHH与杜氏盐藻(Dunaliella salina)、莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)、小球藻(Chlorella variabilis)等有较近亲缘关系。利用SWISS-MODEL程序和PyMOL Viewer软件成功模拟了ICE-LSAHH蛋白亚基的三维结构,该结构包括20个α-螺旋和12个β-折叠,且存在3个结构域:N端底物结合域、NAD结合域和C端域。可见,SAHH基因存在于南极冰藻并进行了有效的表达,该蛋白定位于细胞质,进一步证实SAHH是一个进化上比较保守的蛋白。
- 王金慧丁燏简纪常吴灶和
- 关键词：CHLAMYDOMONAS生物信息学
