林玲辉
- 作品数：23 被引量：25H指数：3
- 供职机构：邢台医学高等专科学校更多>>
- 发文基金：河北省高等学校科学技术研究指导项目河北省科技计划项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 幽门螺杆菌HtrA的表达、纯化及结晶尝试被引量：1
- 2022年
- 目的构建幽门螺杆菌原核表达载体,表达、纯化并筛选幽门螺旋杆菌HtrA蛋白的结晶条件,测定HtrA蛋白酶活性。方法通过PCR技术构建幽门螺杆菌HtrA蛋白基因重组表达质粒pET-28a-HtrA,在大肠埃希菌BL21(DE3)进行重组蛋白HtrA的原核表达;经Ni离子亲和层析、凝胶过滤层析纯化蛋白;通过Hampton Research结晶试剂盒筛选HtrA蛋白结晶条件。经SDS-PAGE和质谱鉴定后通过免疫荧光法测定HtrA蛋白酶活性。结果成功构建重组质粒pET-28a-HtrA,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)菌株进行HtrA蛋白可溶性表达,表达蛋白分子质量约为53 ku,与预期相符;使用AKTA pure纯化目标蛋白,SDS-PAGE分析蛋白纯度达95%,产量约11 mg/L;使用结晶机器人筛选HtrA蛋白的初始结晶条件为:0.1 mol/L甘氨酸,pH 9.0,0.2%二恶烷,10%聚乙二醇。重组HtrA具有蛋白酶活性,即能切割E-cadherin。结论利用蛋白表达、纯化和蛋白结晶技术筛选出幽门螺旋杆菌HtrA蛋白结晶条件,为其三维结构解析与功能研究奠定了基础。
- 田新利林玲辉李娜徐鹤郭菲刘威林雪霞
- 关键词：幽门螺杆菌HTRA蛋白酶E-CADHERIN
- 低分子壳聚糖对缺氧/复氧大鼠心肌细胞中ClC-3表达的影响
- 2016年
- 目的:研究低分子壳聚糖(LMCTS)对缺氧/复氧(H/R)损伤大鼠心肌细胞中氯离子通道3(ClC-3)表达的影响,探讨LMCTS对大鼠心肌细胞H/R损伤的保护作用及其与ClC-3通道的关系。方法:原代培养的大鼠心肌细胞分为空白对照组,模型组和200、400及600mg·L-1 LMCTS组。除空白对照组细胞不做任何处理、正常培养外,其余各组细胞均进行低压缺氧处理1h,之后在37℃条件下复氧24h,构建心肌细胞H/R损伤模型,其中模型组不加药物,正常培养;而不同浓度LMCTS组细胞在构建模型前分别给予200、400和600mg·L-1 LMCTS。采用RT-PCR法检测大鼠心肌细胞中ClC-3mRNA的表达水平;Western blotting法和免疫荧光法检测大鼠心肌细胞中ClC-3蛋白的相对表达水平。结果:RT-PCR法和Western blotting法检测,与空白对照组比较,模型组大鼠心肌细胞中ClC-3mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,不同浓度LMCTS组大鼠心肌细胞中ClC-3mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),其中以600mg·L-1LMCTS组心肌细胞中ClC-3mRNA和蛋白表达水平最低。免疫荧光检测,与空白对照组比较,模型组大鼠心肌细胞荧光强度明显增强;与模型组比较,不同浓度LMCTS组大鼠心肌细胞荧光强度明显降低。结论:大鼠心肌细胞中ClC-3表达水平与心肌细胞H/R损伤有关联,LMCTS可降低ClC-3表达水平,其可能通过降低ClC-3表达水平对大鼠心肌细胞H/R损伤发挥保护作用。
- 万鑫何建平张欢林玲辉张甜费瑜
- 关键词：心肌细胞缺氧复氧
- 阻断Notch信号对疫苗增强性免疫病理的作用
- 2017年
- 目的探讨阻断Notch信号对FI-RSV疫苗增强性免疫病理的调节作用。方法制备加入佐剂Al(OH)3的FI-RSV疫苗,肌注免疫C57BL/6小鼠2次,检测抗体;攻毒后,检测各组体重变化,并作肺组织切片及染色检查和细胞因子转录表达检测。结果免疫前各组血清IgG抗体水平无显著差异;免疫后,FI-RSV+Al(OH)_3组体重下降显著;病理切片PAS染色显示FI-RSV+Al(OH)_3和FI-RSV+Al(OH)_3+L-685,458组的粘液分泌均较明显,病理切片HE染色显示FI-RSV+Al(OH)_3和FI-RSV+Al(OH)_3+L-685,458组肺部均显示大量炎症细胞浸润,炎症反应较强,FI-RSV+Al(OH)_3组炎症反应倾向于肺泡壁,FI-RSV+Al(OH)_3+L-685,458组炎症反应倾向于气管壁和血管周;FIRSV+Al(OH)_3组肺组织RSV-N基因的表达量与FI-RSV+Al(OH)_3+L-685,458组比较差异无统计学意义(P>0.05),FI-RSV+Al(OH)_3组的IFN-γ、TNF-α、T-bet、IL-17、ROR-γt基因的表达量显著高于其他两组(P<0.05),FIRSV+Al(OH)_3+L-685,458组IL-4、IL-5、GATA-3基因的表达量显著高于其他两组(P<0.05)。结论 Al(OH)_3单独作为佐剂比添加L-685,458诱发Th1及Th17型优势应答和以肺泡壁反应为主的炎症反应强;Notch信号阻断后诱发的Th2型优势应答及以气管壁和血管周反应的炎症反应更强。
- 李宏勇韩艳娟田新利林玲辉刘建勋曾瑞红
- 关键词：呼吸道合胞病毒NOTCH信号佐剂疫苗
- 橘黄裸伞多糖的理化特性及体外抗氧化活性被引量：3
- 2018年
- 采用水提醇沉、Sevage法去蛋白制备橘黄裸伞粗多糖,通过DEAE-52层析柱对粗多糖进行分离纯化,得到三种组分(GSPS-Ⅰ、GSPS-Ⅱ、GSPS-Ⅲ),主要对GSPS-Ⅱ、GSPS-Ⅲ进行研究。GSPS-Ⅱ、GSPS-Ⅲ的多糖含量分别为84.12%和80.35%,通过扫描电镜(SEM)观察发现GSPS-Ⅱ呈现六面体状结构,GSPS-Ⅲ呈现不规则的砖块状结构;通过红外光谱(IR)和氢核磁共振谱(1H NMR)对其检测,结果表明GSPS-Ⅱ、GSPS-Ⅲ均具有糖类物质的吸收峰且二者均含有α-和β-糖苷构型异头氢;采用清除DPPH、超氧阴离子、ABTS自由基实验评价其抗氧化活性,结果表明这两种多糖对本实验所测自由基均表现出一定的清除效果。综上所述,从橘黄裸伞分离纯化的多糖组分GSPS-Ⅱ、GSPS-Ⅲ具有良好的抗氧化活性。
- 胡亚平张金秀赵立强林玲辉王立安
- 关键词：理化特性自由基抗氧化活性
- 具有抗病毒活性药物生产用原料筛选装置及其筛选方法
- 本发明公开具有抗病毒活性药物生产用原料筛选装置及其筛选方法，原料筛选装置包括将三叉苦根、叶分离输送的分料输送组件，所述分料输送组件包括第一支架，第一支架一端设有输送三叉苦根、叶的分层输送组件，分层输送组件包括第二支架，第...
- 宋晓华岳春景韩宗其代伟伟林玲辉
- 文献传递
- 一种医学微生物分离筛选及检测装置
- 本实用新型公开了一种医学微生物分离筛选及检测装置，包括分离箱，所述分离箱的顶部连通有加水管，所述加水管的内腔设置有分离滤网，所述分离箱正面的顶部固定安装有触摸屏，所述分离箱内壁一侧的底部固定连接有隔板。本实用新型通过设置...
- 田新利林玲辉李娜
- 文献传递
- 羧甲基壳聚糖银的急性和亚急性毒性研究被引量：7
- 2010年
- 目的:研究羧甲基壳聚糖银(CMCT-Ag+)的急性毒性、蓄积毒性及遗传毒性,为其临床应用提供安全保障。方法:按我国《食品安全性毒理学评价程序和方法》的要求,选用SPF级ICR小鼠,随机分为空白对照组(H2O)、CMCT-Ag+组及羧甲基纤维素钠(SCMC)组或环磷酰胺(CTX)组。采用5g.kg-1剂量给小鼠灌胃1次,观察14d,检测CMCT-Ag+的半数致死量(LD50),同时观察小鼠形态并计算肝、脾、胸腺脏器系数以评价其对脏器的损害;以10g.kg-1的总给药量每天2次(间隔4h)给小鼠灌胃,观察14d,测定小鼠最大耐受性;以5g.kg-1的LD50固定剂量连续20d灌胃给药,观察和记录动物中毒表现和死亡数,测定蓄积系数,同时观察小鼠形态并计算肝、脾、胸腺脏器系数以评价其对脏器的损害;以1.25、2.50和5.00g.kg-1浓度的CMCT-Ag+连续灌胃2次(间隔24h),6h后取骨髓,检测骨髓嗜多染红细胞微核数量。结果:CMCT-Ag+的LD50>5.00g.kg-1;最大耐受量为10g.kg-1;蓄积系数大于5;CMCT-Ag+对各实验组小鼠主要脏器均无明显损害。1.25、2.50和5.00g.kg-13个剂量组的微核率分别为3.3‰、1.8‰和1.3‰,与空白对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:CMCT-Ag+无毒,不能引起致突变作用,可应用于临床。
- 佟巨慧迟立超张颖丽付军权林玲辉费瑞
- 关键词：毒性微核率
- 低分子壳聚糖对缺氧复氧大鼠心肌细胞的保护作用
- 2016年
- 目的探讨低分子壳聚糖(LMCTS)对缺氧复氧大鼠心肌细胞的保护作用,并探讨其作用机制。方法原代培养大鼠心肌细胞,将其分为空白对照组、模型组及低、中、高LMCTS组。空白对照组正常培养,不予任何处理;模型组用真空缺氧处理1 h后复氧24 h;低、中、高LMCTS组分别加入含200、400、600μg/m L LMCTS的培养液,培养24 h后再用真空缺氧处理1 h后复氧24 h。ELISA法测定各组细胞上清液中炎症因子TNF-α、IL-6,Western blot法检测心肌细胞解偶联蛋白-2(UCP-2)表达。结果低、中、高LMCTS组心肌细胞存活率均较模型组升高(P均<0.01)。模型组心肌细胞上清液中TNF-α、IL-6水平高于空白对照组(P均<0.01),低、中、高LMCTS组均低于模型组,以高LMCTS组最低(P均<0.01)。模型组心肌细胞UCP-2表达较空白对照组升高,低、中、高LMCTS组较模型组降低,以高LMCTS组最低(P均<0.01)。结论 LMCTS对缺氧复氧心肌细胞具有保护作用,其机制与抑制炎症反应、降低UCP-2表达有关。
- 林玲辉卫茹胡亚平王卓李迎娟
- 关键词：壳聚糖缺氧复氧解偶联蛋白-2心肌细胞
- 龙平莱蛛（蜘蛛目，泰莱蛛科）的求偶和交配行为
- 2012年
- 泰莱蛛科属于简单生殖器类蜘蛛，为洞穴蜘蛛的主要类群。本实验首次在实验室条件下对泰莱蛛科蜘蛛龙平莱蛛Pinelema bailongensis的求偶和交配行为进行捕述：雄蛛可与多个雌蛛交配，雌蛛一般为单次交配。一次完整的交配进行2～8次交尾，交尾时间为0．27～5．03min。求偶行为主要涉及探足、腹震和拍足等动作。
- 林玲辉吴成琼高元奇费瑞
- 关键词：求偶交配
- 川芎嗪对慢性间歇性低氧所致大鼠肺血管功能改变的研究
- 王卓高彦珍申社林李迎娟林玲辉郭秋红
- 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征为临床常见病，可造成全身各个系统的综合性损伤。该项目利用慢性间歇性低氧大鼠模型，采用中药有效成分川芎嗪，观察其对慢性间歇性低氧大鼠肺动脉内皮损伤的保护作用，将可能为阻塞性睡眠呼吸暂停综合征提供新的...
- 关键词：
- 关键词：阻塞性睡眠呼吸暂停综合征川芎嗪中药
