周良
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
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- 人乳头瘤病毒16型E2蛋白真核载体的构建与表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白真核载体,为研究其基因疫苗免疫活性奠定实验基础。方法 PCR扩增HPV16 E2基因片段,将其连接到真核表达载体pcDNA3.1(+),双酶切及测序鉴定。将质粒pcDNA3.1(+)与pcDNA3.1(+)/HPV16 E2分别转染HeLa细胞,RT-PCR鉴定E2基因在HeLa细胞中的表达。结果 HPV16 E2基因片段插入到pcDNA3.1(+)相同酶切位点,即构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)/HPV16 E2;转染pcDNA3.1(+)/HPV16 E2的细胞,检测到HPV16 E2 mRNA。结论构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)/HPV16 E2能在HeLa细胞内有效表达。
- 周良陈杰唐双阳李薇余敏君朱翠明万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒16型E2
- HPV16 E2与IL-12联合基因疫苗的免疫效果初步研究
- 2012年
- 目的将HPV16E2与IL-12真核表达载体联合免疫小鼠,检测小鼠产生的特异性体液免疫和细胞免疫应答水平,为HPV16诱发的宫颈癌治疗性核酸疫苗的研制奠定实验基础。方法40只BALB/c小鼠随机分成PBS组、pcD-NA3.1(+)空质粒组、pcDNA3.1(+)/IL-12组、pcDNA3.1(+)/HPV16E2组以及pcDNA3.1(+)/HPV16E2+pcD-NA3.1(+)/IL-12联合组,每组8只,共免疫4次,每2周1次。于免疫前1d及第8周采血,分离血清,-20℃保存;颈椎脱臼处死小鼠,无菌取脾脏,制备脾细胞悬液。ELISA法测定小鼠血清HPV16E2IgG抗体水平及脾细胞培养上清IFN-γ、IL-4水平;MTT比色法检测脾淋巴细胞的增殖。结果免疫8周后,血清IgG抗体A450值E2组和联合组与PBS组和空质粒组比较差异有统计学意义(P<0.05);但在每个时间点,联合组与E2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。IL-12组、E2组、联合组脾淋巴细胞培养上清中的IFN-γ和IL-4含量与PBS组和空质粒组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合组与E2组比较IFN-γ含量差异有统计学意义(P<0.05),两组的IL-4含量差异无统计学意义(P>0.05)。IL-12组、E2组、联合组脾淋巴细胞SI值与PBS组和空质粒组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合组与E2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论HPV16E2单基因疫苗及其与IL-12联合基因疫苗能刺激小鼠产生特异性抗体,脾淋巴细胞培养上清IFN-γ含量升高,且联合基因疫苗优于E2单基因疫苗。
- 唐双阳李乐余敏君粟盛梅蔡恒玲周良万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒16型E2IL-12核酸疫苗
- 人乳头瘤病毒E2蛋白生物学活性及疫苗研究进展被引量：5
- 2011年
- 人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)能感染皮肤和粘膜的基底层上皮细胞,尤其与生殖系统感染相关密切。乳头瘤的形成与HPV E2蛋白密不可分,该蛋白质与细胞增殖及病毒的有丝分裂等有关。近年来,学者们利用E2蛋白的特性研制出各种E2蛋白相关的疫苗,有助于清除与HPV感染有关的早期病变,有效降低宫颈癌的发生。
- 周良唐双阳万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒E2蛋白疫苗
- HPV16 E2与IL-12联合基因疫苗的免疫效果初步研究
- 目的：
构建人乳头瘤病毒16型/(HPV16/)E2基因真核表达载体pcDNA3.1/(+/)//HPV16E2，将其与IL-12真核表达载体pcDNA3.1/(+/)//IL-12联合免疫BALB//c小鼠，检...
- 周良
- 关键词：人乳头瘤病毒16型E2IL-12核酸疫苗
- 文献传递
- GFP-HPV16 E5融合蛋白在HeLa细胞内的表达与定位被引量：3
- 2010年
- 目的研究GFP-HPV16 E5融合蛋白在HeLa细胞内的表达与定位。方法 PCR扩增HPV16E5基因片段,将其连接到真核表达载体pEGFP-C1,双酶切及测序鉴定,构建表达载体pEGFP-C1/HPV16 E5;将质粒pEGFP-C1/HPV16 E5和pEGFP-C1分别转染HeLa细胞,在倒置荧光显微镜下观察GFP-HPV16 E5融合蛋白在HeLa细胞内的表达与定位。结果 GFP荧光均匀分布在细胞浆和细胞核;GFP-HPV16 E5融合蛋白组荧光分布在细胞浆。结论 GFP-HPV16 E5融合蛋白能在HeLa细胞内表达且定位于细胞浆。
- 唐双阳陈杰李薇周良余敏君朱翠明万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒16型E5
- BRAF和RAS突变与颈部淋巴结转移的甲状腺乳头状癌预后因素的相关性研究
- 目的：检测BRAF V600E、N-RAS及K-RAS突变在颈部淋巴结转移的经典甲状腺乳头状癌（CPTC）中的发生率。探讨在仅有颈部淋巴结转移，而无远处转移的30例CPTC中，BRAF基因V600E突变状态与性别、年龄、...
- 周良
- 关键词：甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移BRAF基因RAS基因
