蔡东晖
- 作品数：3 被引量：11H指数：1
- 供职机构：苏州大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种改进的从细菌人工染色体中亚克隆DNA片段的方法
- 2008年
- 目的运用基于PCR的重叠区延伸法构建缺口修复载体,通过同源重组的方式从细菌人工染色体(BACs)中亚克隆DNA片段。方法用基于PCR的重叠区延伸法将线性化质粒骨架分子、较长的上游和下游同源臂(200～500bp)串联起来构建成缺口修复载体。将此载体电击转入含有BAC的EL350菌中,经热激诱导Red重组酶瞬时表达,使缺口修复载体与BAC发生同源重组。结果重叠区延伸法构建的两个缺口修复载体分别成功地从BAC中亚克隆得到目的DNA片断。结论该方法省去了酶切、连接、转化等繁琐的克隆步骤,大大缩短了实验周期,提高了实验效率,为基因组BAC测序过程中的缺口封闭及复杂的打靶载体构建提供了较为便捷的方法。
- 蔡东晖石建军叶荣陈学进
- 关键词：细菌人工染色体
- 兔HPRT基因和POU5F1基因的克隆及其打靶载体的构建
- 由于兔在生理，解剖方面比小鼠更加接近人类，所以兔作为疾病模型诸如肥厚性心肌病，脂蛋白代谢紊乱，动脉粥样硬化等方面有着小鼠无法比拟的优势。除心血管疾病外，兔子在肺部疾病，眼科疾病，药物毒性试验代谢疾病，获得性免疫缺陷综合征...
- 蔡东晖
- 关键词：基因改造同源重组打靶载体HPRT基因
- 文献传递
- 昆明小鼠胚胎成纤维细胞的分离与体外培养被引量：10
- 2007年
- 研究了昆明小鼠胚胎成纤维细胞的分离、培养和生长特征,建立了快速、稳定的优质饲养层细胞培养体系.从不同日龄的胎鼠均分离到胚胎成纤维细胞,但最佳分离时间为13.5~14.5d;三种分离原代胚胎成纤维细胞的方法中胰酶消化法效果最好,能在较短的周期内获得大量原代及传代细胞;MEF细胞形态以小梭形为主,呈漩涡状、火焰状生长;增殖速度较快,每1~2d可传一代,按1∶3比例常规传代;5代以内适宜制作饲养层用,5代以后细胞开始变形呈现典型的衰老特征.
- 盛利琴叶荣韩甫蔡东晖张焕相
- 关键词：胚胎成纤维细胞饲养层体外培养
