叶荣
- 作品数:36 被引量:229H指数:9
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪精液抑制素的提取与纯化及其生物活性的测定被引量:7
- 1996年
- 新鲜猪精液经乙醇沉淀,丙酮清洗,得抑制素粗提物,再经SephadexG-100凝胶过滤,收集蛋白质洗脱峰。采用小鼠hCG卵巢增重抑制法(改良斯蒂尔曼—波莱生物测定法)对其进行生物活性测定,粗品1000μg剂量组对性成熟前雌性小鼠卵巢增重的抑制作用极显著(P<0.01),第二峰下降部分200μg组的抑制效果显著(P<0.02)。表明从猪精液中可提取到具有生物活性的抑制素制品。
- 叶荣牛树理杨利国
- 关键词:抑制素猪精液纯化生物活性
- 牛卵巢卵母细胞体外成熟的研究被引量:15
- 2004年
- 研究了卵巢采卵方法以及卵巢保存温度和时间、性周期阶段、激素和培养基对牛卵母细胞体外成熟的影响.结果表明:从屠宰场获取的卵巢,先切剖或抽吸卵泡再切割卵巢,可显著提高可用卵母细胞数.卵巢保存时间在2 h以内最好,最长不超过6 h.30~39 ℃的生理盐水保存卵巢,卵母细胞的成熟率(63.9 %)和卵裂率(34.4 %)均显著高于2~8 ℃(16.7 %、0 %)和20~29 ℃(54.1 %、31.7 %)保存的.采集卵母细胞时卵巢所处性周期阶段(卵泡期、黄体期)对卵母细胞体外成熟的影响不大(成熟率分别为69.2 %、64.3 %).M199是牛卵母细胞体外成熟理想的培养基,M199 + 50 IU/mL LH+ 100 IU/mL FSH + 1μg/mL 17β-E2和M199 + 50 IU/mL GnRH+1 μg/mL 17β-E2都是牛卵母细胞体外成熟理想的培养系统(成熟率分别为69.4 %、67.5 %,卵裂率分别为35.4 %、42.7 %).
- 郭宪陈学进叶荣崔泰保姚军阎萍
- 关键词:卵巢卵母细胞体外成熟体外受精
- 低温对小鼠卵母细胞纺锤体损伤和发育潜力的影响被引量:2
- 2009年
- 为了评价低温对小鼠卵母细胞纺锤体损伤和发育潜力的影响以及损伤的可逆性,MII期卵母细胞在24℃室温或4℃环境下分别处理1、2、4或24h,并于37℃下恢复培养1或2h,复温或未经复温的卵孤雌激活后分析早期发育潜力,并对处理的卵通过免疫荧光细胞化学技术检测纺锤体的损伤和重建动态。结果显示纺锤体受低温打击的受损程度明显依赖于处理温度和时间,低温处理对纺锤体的损伤具有较强的可逆性,不论24℃或4℃,处理时间不超过4h的卵均能重建正常的纺锤体构像,但孤雌激活胚胎的早期发育潜力仍然受到明显的影响,而24h低温处理导致了纺锤体构像的不可逆破坏。对不同卵龄小鼠卵母细胞的研究发现卵龄大小不影响低温打击后的卵发育潜力。这些结果提示在以卵母细胞为材料的细胞工程技术的操作过程中应尽可能缩短室温操作时间。
- 张军超叶荣鲍柳君张焕相朱子玉
- 关键词:小鼠卵母细胞纺锤体孤雌激活
- 抑制素α(1~32)基因免疫对大鼠卵泡发育和生殖激素的影响被引量:29
- 2003年
- 选择 40只 3 0日龄雌性大鼠分为 4组 ,分别用含重组抑制素α(1~ 3 2 )基因真核表达质粒pcINH 0 μg(对照组 )、15μg(试验组 1)、2 5μg(试验组 2 )、40 μg(试验组 3 )的脂质体进行主动免疫 ,间隔 2 0d后用不含脂质体的重组基因质粒加强免疫 1次。结果发现 ,抗体阳性鼠占 50 % (13 / 2 6) ,但加强免疫 10d后的抗体P/N值没有升高 ,而且免疫剂量的增加并没有提高阳性鼠的比例 ;抗体阳性鼠卵巢上的成熟卵泡数比阴性鼠多 2 .3 ,但统计差异不显著 (P >0 .0 5)。首次免疫 10d后阳性鼠血浆FSH浓度显著升高 (P <0 .0 5) ;但血浆雌二醇水平无显著差异 (P >0 .0 5)。加强免疫 10d后血中促卵泡素水平没有升高。本试验结果证明 ,应用重组抑制素真核表达质粒免疫动物可以产生抗抑制素抗体。
- 茆达干杨利国叶荣姜勋平
- 关键词:基因免疫卵泡发育生殖激素影响因素免疫动物
- 抑制素及其在动物繁殖中的应用被引量:13
- 1996年
- 在家畜生殖内分泌研究中对垂体分泌促卵泡素(FSH)的调节一直为研究者所重视。自从1932年McCullagh 在牛睾丸提取物中发现一种水溶性物质对 FSH 分泌具有反馈性抑制并将此物质命名为'抑制素'以来,人们对抑制素的认识逐渐深入。特别是近十几年,由于蛋白质分离技术和 DNA 的序列分析及其分子杂交技术的发展,在抑制素的分子结构。
- 叶荣牛树理杨利国
- 关键词:家畜繁殖抑制素
- 猪精液抑制素主动免疫黄牛诱导超数排卵的研究被引量:27
- 1996年
- 为研究中和内源抑制素对排卵的影响,用猪精液抑制素粗品,对产后2 ̄5个月的25头母黄牛进行主动免疫。粗制品用福氏完全佐剂乳化后间隔20d免疫两次。在配种后第10d对11头发情母牛经直肠触摸卵巢,同时颈静脉采血。根据血清孕酮水平与排卵数之间的线性回归关系测定血清孕酮,采用直肠触摸黄体数推算排卵率。排2个以上卵的母牛占36%(4/11)。结果表明,用猪精液抑制素主动免疫黄牛可以提高其排卵率。
- 牛树理叶荣杨利国
- 关键词:抑制素精液主动免疫超数排卵黄牛
- 抑制素基因免疫对小鼠生殖的影响被引量:54
- 2002年
- 用编码抑制素 α(1~ 32 )的基因与 pc DNA3.1真核表达质粒进行重组 ,构建抑制素基因疫苗 p INH。将 30只 2周龄 ICR小鼠随机分为 3组 (每组 10只 ) ,试验 、 组分别经脂质体介导肌肉注射 p INH 15μg(10 0μL )、2 5μg(10 0μL) ,对照组注射免疫空载体 pc DNA3.115 μg(10 0 μL)。首次免疫后间隔 3周加强免疫 1次。小鼠经 p INH基因免疫后 ,用 EL ISA可从血浆中检测到抑制素抗体 ,表明 p INH可在活体肌细胞内表达 ,表达产物具有抑制素抗原性 ,能激活免疫系统产生抑制素抗体。抑制素抗体 P/ N>2视为阳性 ,阳性率为 30 % (6 / 2 0 )。抑制素抗体阳性小鼠与阴性小鼠的产仔数、初生重和窝重等没有显著差异 (P>0 .0 5 )。抗体阳性组首次免疫后 ,雌鼠血浆 FSH浓度略有升高 ,经过加强免疫后显著升高 (P<0 .0 5 )。由此可以看出 ,抑制素基因免疫可以诱导产生抗抑制素抗体 。
- 姜勋平杨利国刘桂琼茆达干叶荣
- 关键词:小鼠抑制素基因免疫产仔数初生重
- 昆明小鼠胚胎成纤维细胞的分离与体外培养被引量:10
- 2007年
- 研究了昆明小鼠胚胎成纤维细胞的分离、培养和生长特征,建立了快速、稳定的优质饲养层细胞培养体系.从不同日龄的胎鼠均分离到胚胎成纤维细胞,但最佳分离时间为13.5~14.5d;三种分离原代胚胎成纤维细胞的方法中胰酶消化法效果最好,能在较短的周期内获得大量原代及传代细胞;MEF细胞形态以小梭形为主,呈漩涡状、火焰状生长;增殖速度较快,每1~2d可传一代,按1∶3比例常规传代;5代以内适宜制作饲养层用,5代以后细胞开始变形呈现典型的衰老特征.
- 盛利琴叶荣韩甫蔡东晖张焕相
- 关键词:胚胎成纤维细胞饲养层体外培养
- 提高天山马鹿繁殖率的研究被引量:5
- 1996年
- 天山马鹿是我国优良鹿种之一,其产茸量和茸品质均居全国首位。近年来野生马鹿的资源破坏严重,人工饲养马鹿公母比例严重失调,在数量较少的母鹿中普遍存在发情期推迟,受配率低和空怀率高的现象,严重阻碍了鹿群的更新和扩大。本试验旨在通过对天山马鹿发情规律的研究,采用科学的繁殖方法以及生殖激素诱导母鹿发情的技术、达到提高天山马鹿繁殖率的目的。
- 陈学进叶荣潘怀玉保善
- 关键词:马鹿发情规律诱导发情天山马鹿繁殖力
- 饲养层体系的建立与胚胎干细胞的培养被引量:4
- 2007年
- 胚胎干细胞(ES细胞)是由早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分离、抑制分化培养获得的多潜能细胞。ES细胞的研究已在多种动物实验中获得了突破性进展。ES细胞在体外培养不仅要保持其增殖能力,而且要维持其未分化的状态。由于饲养层细胞能分泌白血病抑制因子(LIF)等抑制ES细胞分化的因子,目前,ES细胞的培养主要是以饲养层来维持其干细胞特性。本实验探讨了胎鼠成纤维细胞(MEF)的分离培养、传代及其作为饲养层细胞的处理条件,建立快速稳定的MEF培养体系,并在此基础上探索了小鼠ES细胞的适宜培养、传代条件。
- 盛利琴叶荣陈学进韩甫张焕相
- 关键词:饲养层细胞胚胎干细胞白血病抑制因子ES细胞原始生殖细胞鼠成纤维细胞