魏婕
- 作品数：36 被引量：52H指数：4
- 供职机构：新疆畜牧科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 口蹄疫病毒表位嵌合蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达被引量：3
- 2014年
- 为了将口蹄疫病毒(FMDV)中和表位展示在病毒样颗粒(VLP)表面,以猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白为骨架,用FMDV O/Mya-98/2010毒株G-H环替换PCV2自身中和表位,构建嵌合衣壳蛋白CaO。为分泌表达CaO蛋白,在芽胞杆菌穿梭质粒pHCMC05的多克隆位点中顺次插入枯草芽胞杆菌P43启动子和中性蛋白酶B分泌信号肽(nprBsp),构建分泌型大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭质粒p7257-P43。然后将合成的CaO基因插入p7257-P43质粒nprBsp的下游,构建分泌表达质粒p7257-P43-CaO。将该质粒转化枯草芽胞杆菌WB800,氯霉素诱导表达。上清经SDS-PAGE检测,嵌合蛋白CaO在枯草芽胞杆菌中得到表达。Western-blot证实,该蛋白具有反应原性。免疫电镜可观察到直径约15nm±2nm的VLP,表明嵌合蛋白在体外能有效组装。
- 任晓冰窦小龙魏婕苗书魁冉多良马文戈
- 关键词：口蹄疫病毒猪圆环病毒2型枯草芽胞杆菌
- 口蹄疫灭活疫苗对不同亚洲Ⅰ型病毒株的交叉保护效果
- 2011年
- 分别用亚洲Ⅰ型Asia-1 KZ/03毒株和AsiaⅠ/JSL毒株按口蹄疫灭活疫苗相关生产规程配制口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗免疫动物,检测2种毒株的攻毒保护效果。结果显示,用Asia-1 KZ/03株病毒配制的口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗用同源病毒株攻击,保护效果可达7.05PD50/头份,用异源病毒株Asia1/JSL/GSZY/06攻击,保护效果可达7.19PD50/头份;用AsiaⅠ/JSL株病毒配制的口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗对江苏毒同源毒株Asia1/JSL/GSZY/06攻击,保护效果可达7.29 PD50/头份。说明,用Asia-1 KZ/03病毒株制备的疫苗对Asia1/JSL/GSZY/06病毒具有良好的交叉保护效果,可达到同源病毒株制备疫苗的免疫效果。
- 黄炯李一经王力俭朱刚王延刘宏张莉薛英魏玉荣易中魏婕徐亚萍王莉君
- 关键词：口蹄疫灭活疫苗
- 牛O型口蹄疫AD10新型佐剂灭活疫苗免疫持续期试验
- 2011年
- 对自行研发的实验室条件下制备的牛O型口蹄疫AD10新型佐剂灭活苗进行了3个批次疫苗免疫持续期试验,同时设置现行常用的油佐剂灭活苗作为对照组。其评估方法为在首免后每间隔第15天采用液相阻断ELISA试剂盒检测血清中O型口蹄疫抗体水平,并选择在一定免疫时段进行攻毒保护试验以确认疫苗的免疫效果,真实评价牛O型口蹄疫AD10新型佐剂灭活苗免疫牛的免疫持续期和对口蹄疫的抗感染能力。试验结果表明,本次试验AD10佐剂免疫组与现行常用油佐剂组免疫抗体水平和免疫持续期大致相同,对幼畜的免疫程序应在首次免疫60d后进行第二次加强免疫,免疫效果可达到6个月的免疫持续期。
- 易忠符子华黄炯马文戈胡建军魏婕王延魏玉荣胡尔马西朱刚徐亚萍王宾
- 关键词：O型口蹄疫病毒灭活疫苗免疫持续期
- 口蹄疫病毒VP1蛋白病毒样颗粒表达系统的构建被引量：3
- 2014年
- 为制备Asia 1型口蹄疫病毒（FMDV）双层结构病毒样颗粒，选择牛病毒性腹泻病毒（BVDV）流行株BVDV JZ05-1核心蛋白p14的第169～270位氨基酸和 FMDV Asia 1/JS/CHA/05结构蛋白 VP1的第1～211位氨基酸，两者之间设计柔性肽连接，人工合成 p14-柔性肽-VP1融合蛋白编码序列，全基因长990 bp。合成基因与枯草芽胞杆菌表达载体 p7257-P43连接，构建成表达质粒 p7257-P43-P14-VP1。转化枯草芽胞杆菌 WB800，经筛选、鉴定，获得表达 p14-VP1融合蛋白的枯草芽胞杆菌。该重组表达菌在含有40μg/mL氯霉素的 LB中培养后，菌体超声破碎可检测到目的蛋白。Western blot 结果显示，该蛋白能特异性识别Asia 1型FMDV抗体，具有良好的反应原性。电镜观察显示，融合蛋白组装为直径约50 nm大小的病毒样颗粒（VLP）。
- 窦小龙任晓冰魏婕苗书魁冉多良马文戈
- 关键词：ASIA1型口蹄疫病毒病毒样颗粒融合蛋白枯草芽胞杆菌
- 绵羊痘病毒新疆株的分离及结构蛋白P32基因序列分析被引量：3
- 2015年
- 【目的】对绵羊痘病毒当地流行毒株的分离和其结构蛋白P32基因的克隆和序列进行分析,明确引起新疆本地绵羊流行痘病的病毒种类,掌握当前流行毒株的变异情况,为绵羊痘的预防控制及将来研制高效安全疫苗提供科学依据。【方法】将两例疑似患有羊痘的绵羊肺脏组织病料接种于MDBK细胞进行病毒分离,细胞病变组织经处理后通过电子显微镜观察分离病毒。以分离病毒基因组DNA为模板,通过PCR扩增绵羊痘病毒结构蛋白P32基因,并对目的基因进行克隆和基因序列和蛋白生物信息学分析。【结果】两例病料组织接种MDBK细胞后均产生明显的细胞病变,电子显微镜观察可见到约200 nm大小、椭圆形有囊膜的典型痘病毒粒子。对两株病毒表面膜结构蛋白P32基因PCR扩增均可获得与预期大小一致的约972 bp片段,氨基酸序列分析表明分离毒株SPV/Miquang/2013和SPV/Kuche/2013病毒P32基因与绵羊痘病毒参考株同源性分别达96.9%-99.4%和97.5%-100%,生物信息学分析发现SPV/Miquang/2013株P32蛋白有两个关键氨基酸位点发生变异,即第78位谷氨酸突变为赖氨酸,第293位异亮氨酸突变为苏氨酸。【结论】从疑似病例中分离到两株病毒,通过电镜观察及P32基因扩增测序,与其他羊痘病毒比对后鉴定分离毒株为绵羊痘病毒,分别命名为SPV/Miquan/2013和SPV/Kuche/2013。SPV/Miquan/2013的P32蛋白同其他绵羊痘病毒的两个氨基酸位点发生明显突变。
- 魏婕薛英苗书魁窦小龙任晓冰马文戈黄炯
- 关键词：绵羊痘病毒
- IPTG诱导浓度、时间对AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1蛋白表达的影响被引量：4
- 2009年
- 将口蹄疫病毒VP1基因插入原核表达载体pET-28a中,转化至大肠杆菌BL21。用不同的IPTG浓度与不同诱导时间诱导菌株表达VP1蛋白,分析不同IPTG浓度及不同诱导时间对蛋白表达量的影响,以确定最佳表达条件。结果表明,在一定范围内,随IPTG浓度的增高,表达量并不会随之增大;而在菌体对数生长期内,随诱导时间的延长,表达量会随之增大。最后确定当IPTG浓度为3 mmol/L,诱导表达到最长时间9 h时,VP1蛋白表达量最大。
- 魏婕易忠魏玉荣王海烽胡尔玛西符子华冉多良
- 关键词：口蹄疫病毒VP1蛋白IPTG
- 哨兵动物口蹄疫抗体及病原学检测报告被引量：2
- 2014年
- 2013年哨兵动物口蹄疫抗体及病原学检测结果表明,哨兵动物群体中不存在口蹄疫病畜或健康带毒畜,但是群体口蹄疫免疫抗体水平不高,需要强化免疫。
- 郭会玲易忠魏玉荣马文戈埃尼瓦尔.太外库力斯马依.伊斯拉木达力夏.孜乃提包拉提魏婕王延薛英黄炯姚刚
- 关键词：口蹄疫免疫抗体病原学
- 鸽新城疫病毒及危害被引量：2
- 2016年
- 鸽新城疫是由鸽Ⅰ型副粘病毒(PPMV-Ⅰ)引起的一种高度接触性传染病,该病传播迅速,流行期长,发病率与死亡率极高,严重危害了养鸽业的发展。就鸽Ⅰ型副粘病毒的病毒结构、分类地位2个方面的研究进行了简要综述,并且分析了鸽新城疫疾病的危害与防治中存在的问题,以供参考。
- 任芳金映红易忠魏玉荣魏婕苗书魁夏俊王杰米晓云
- 关键词：鸽新城疫鸽I型副粘病毒
- 环形泰勒虫表面抗原Tasp-Spag1基因串联表达及其蛋白生物信息学分析
- 2015年
- 研究环形泰勒虫表面抗原特性,以原核表达系统串联表达其表面抗原Tasp-Spag1,并对其蛋白进行生物信息学分析。通过PCR技术扩增Tasp-Spag1基因片段后构建重组质粒pET-28a-Tasp-Spag1,IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE、Western blot检测;运用生物信息学软件对Tasp-Spag1基因片段进行分析,并预测其编码蛋白的主要特性与抗原表位。结果显示,扩增得到Tasp-Spag1基因长度为729bp,原核表达后通过SDS-PAGE与Western blot检测显示,得到大小与预期分子质量相当的目的蛋白;生物信息学分析发现,此串联重组蛋白Tasp-Spag1具有236个氨基酸,属于不稳定的非分泌型、非跨膜亲水蛋白,分别具有33个与21个可能的糖基化与磷酸化位点,有三段低复杂性的结构域,并且含有Sorb、NL的同源区域,可能有10个B细胞表位优势区段与7个T细胞表位优势区段,具有两段交叉反应性表位肽。
- 任方易忠米晓云魏婕马文戈郭会玲苗书魁汪立群王延薛英黄炯魏玉荣
- 关键词：环形泰勒虫原核表达生物信息学
- 狂犬病病毒SRV_9株N、P、G和L蛋白基因的克隆及表达载体构建被引量：8
- 2009年
- 以狂犬病病毒RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆获取N、P、G及L蛋白编码基因核苷酸序列,应用定向克隆技术,构建真核表达载体pcDNA3.1-N、pcDNA3.1-P、pcDNA3.1-G及pcDNA3.1-L。经测序鉴定证实获取的N、P、G及L蛋白区全长核苷酸序列与文献报道的一致,并成功构建了其真核表达载体。
- 魏玉荣易忠符子华马素贞王晓萍简子健魏婕王海烽朱晶晶
- 关键词：基因序列分析表达载体构建
