周伟强
- 作品数：32 被引量：75H指数：5
- 供职机构：沈阳医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金沈阳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学更多>>
- 组织蛋白酶B对肿瘤血管生成的诱导作用被引量：1
- 2014年
- 肿瘤的发展与其侵袭程度密切相关。人体内参与肿瘤侵袭的蛋白酶主要有：基质金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶及组织蛋白酶（Cat）。组织蛋白酶是人体内的一类蛋白质水解酶，根据其催化中心的不同分又为半胱氨酸组织蛋白酶、天门冬氨酸组织蛋白酶、丝氨酸蛋白酶。其中半胱氨酸组织蛋白酶包括有木瓜蛋白酶家族和钙离子激活蛋白酶家族。木瓜蛋白酶家族主要存在于溶酶体内，故又称为溶酶体组织蛋白，包括CatB、D、H、S、L。
- 李康慧周伟强
- 关键词：组织蛋白酶B癌症血管生成
- 乳腺癌MCF-7细胞p21^(WAF1/CIP1)启动子区HDAC1高功能结合位点的研究被引量：5
- 2017年
- 目的研究乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)募集于p21^(WAF1/CIP1)启动子区调控其转录活性的特异性结合位点。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol·L^(-1)0.88μL SAHA(S组)、0.625 nmol·L^(-1)10μL Leptin(L组)处理24 h,对照组(B组)细胞培养在完全型RPMI 1640培养基中。各组细胞裂解液与HDAC1抗体孵育,收集纯化结合HDAC1抗体的DNA片段,应用Realtime PCR法检测p21^(WAF1/CIP1)启动子区从TSS到其上游(+2^-4 000 bp)f1~f10片段的DNA相对表达量并用2-ΔΔCT法分析。结果 B组中,HDAC1抗体在p21^(WAF1/CIP1)启动子区f1、f8片段有高亲和力,f8片段达最高。S组中,HDAC1抗体与p21^(WAF1/CIP1)启动子区f1~f10片段结合量明显低于对照组,f8片段达最低,而在L组此片段与HDAC1抗体结合量达最大值。结论乳腺癌MCF-7细胞增殖过程中,HDAC1可被招募至p21^(WAF1/CIP1)启动子区,该启动子区上游-2 800 bp至-3 200 bp DNA片段是与HDAC1高度结合的靶功能区。
- 邹丹周伟强
- 关键词：乳腺癌组蛋白去乙酰化酶1
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂抗肿瘤机制的研究被引量：1
- 2014年
- 机体细胞维持正常功能的前提是基因有序的转录调控,如果基因转录调控功能紊乱,细胞可能发生癌变。组蛋白乙酰化、去乙酰化修饰作为基因转录调控的关键机制之一,与肿瘤的发生、发展关系密切。真核细胞内组蛋白乙酰化酶（histone acetyltransferase,HAT）和组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,
- 王春胜周伟强
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂肿瘤
- SAHA在Leptin诱导的乳腺癌MCF-7细胞增殖过程中的调控作用被引量：6
- 2016年
- 目的为了阐明SAHA调控Leptin诱导的乳腺癌ER+细胞系MCF-7细胞增殖的分子机制,我们采用实时无标记细胞分析系统,动态监测Leptin对MCF-7细胞生长状况的影响。方法通过自动细胞分析仪Muse Cell Analyzer分析Leptin和SAHA对MCF-7细胞活力、细胞凋亡以及细胞周期产生的影响,并应用细胞凋亡抗体芯片测定Leptin和SAHA两种处理因素作用MCF-7细胞后相关凋亡通路分子表达变化的情况。结果低浓度Leptin对MCF-7细胞生长有诱导作用,其浓度为0.625 nmol·L^(-1)时作用效果最明显。细胞分析结果表明,SAHA能明显抑制Leptin诱导的MCF-7细胞增殖,经SAHA处理后MCF-7细胞活力明显下降,细胞凋亡率明显增多,细胞被大量阻滞于G_0/G_1期。凋亡抗体芯片筛查结果发现,SAHA可明显诱导MCF-7细胞内促凋亡因子Bax、Caspase-3的表达,并且与凋亡产生密切相关的TRAIL DR5、p21^(CIP1)蛋白的表达也明显上升,Claspin、Clusterin、XIAP、Survivin蛋白的表达明显下降,而Leptin对上述蛋白的表达具有相反作用。结论 Leptin、SAHA对乳腺癌ER^+细胞MCF-7的影响可能与乳腺癌细胞内凋亡通路激活有关,特别是与内源性线粒体凋亡通路引发的Caspase-3释放密切相关。
- 冯秀艳韩翰周伟强
- 关键词：乳腺癌MCF-7SAHA瘦素
- 乳腺癌MCF-7细胞p21^(WAF1/CIP1)启动子区雌激素受体α的高功能结合位点被引量：2
- 2017年
- 目的研究雌激素受体(ER)α募集于p21^(WAF1/CIP1)启动子区调控其转录活性的具体作用位点,明确辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)及瘦素(leptin)在调节p21^(WAF1/CIP1)启动子功能中的分子机制。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol/L的SAHA 0.88μL(SAHA组)、0.625 nmol/L的leptin 10μL(leptin组)处理24 h,对照组在完全型RPMI-1640培养基中培养细胞。应用染色质免疫共沉淀技术将各组细胞裂解液与ERα抗体孵育,收集纯化结合ERα抗体的DNA片段,应用实时PCR法检测p21^(WAF1/CIP1)启动子区从转录起始点到其上游(+2^-4 000 bp)f1~f10片段的DNA相对表达量并用2-ΔΔCt法分析。结果对照组中,与ERα抗体结合的f1、f2、f8片段DNA相对表达量较f9片段高出2倍以上(P<0.01)。与对照组比较,SAHA及leptin组f1~f10片段与ERα抗体结合能力均降低,其中SAHA组f8片段DNA相对表达量达最低值(P<0.01),且明显低于leptin组(P<0.01)。SAHA组中以f8片段为对照,其他片段与ERα抗体结合能力均较其升高(P<0.05或0.01)。leptin组中以f8片段为对照,其他片段与ERα抗体结合能力均较其降低,除f1外均有统计学差异(P<0.01)。结论乳腺癌细胞增殖过程中细胞增殖信号招募ERα至p21^(WAF1/CIP1)启动子区,且p21^(WAF1/CIP1)启动子区-2 800 bp^-3 200 bp区域存在与ERα高度结合的靶功能区。
- 邹丹冯秀艳周伟强
- 关键词：乳腺癌细胞P21^WAF1/CIP1雌激素受体
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂调控p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平影响乳腺癌MCF-7细胞周期被引量：11
- 2017年
- 目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)调控p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平,调节乳腺癌MCF-7细胞周期的分子机制。方法采用实时定量PCR、Western blot和DNA-Ch IP方法测定SAHA对乳腺癌MCF-7细胞周期调控系统的影响;应用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)技术探究SAHA调控p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平的情况。结果 SAHA明显影响乳腺癌细胞周期相关调控因子的表达;在针对p21^(WAF1/CIP1)基因功能的筛查中发现,SAHA可明显诱导p21^(WAF1/CIP1)mRNA和蛋白的表达,并且可调节p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平。结论 SAHA通过影响p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化程度调节乳腺癌MCF-7细胞周期的进程。
- 周慧周伟强
- 关键词：乳腺癌MCF-7SAHA乙酰化
- SAHA、TRAIL与乳腺癌细胞凋亡被引量：1
- 2016年
- 乳腺癌是影响女性身心健康的最常见恶性肿瘤之一。研究表明,组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)能够诱导乳腺癌细胞凋亡,并且SAHA和TRAIL的联合应用具有协同作用,SAHA可明显增强乳腺癌细胞对TRAIL作用的敏感性,因此SAHA和TRAIL的联合应用已成为治疗乳腺癌一种可喜的、有前景的治疗方法。
- 李静周伟强
- 关键词：SAHATRAIL乳腺癌细胞凋亡
- RTCA实时监控SAHA对乳腺癌MCF-7细胞生长状态的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:应用实时无标记动态细胞分析(RTCA)技术研究SAHA抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的情况。方法:采用RTCA系统动态监测不同剂量(0、0.5、1、2、5、10、20、50μmol/L)SAHA对乳腺癌MCF-7细胞生长的影响。结果:5、10μmol/L的SAHA孵育48 h后可显著抑制细胞的生长,为SAHA抑制MCF-7细胞生长的最佳实验剂量和作用时长;而相关剂量的DMSO无抑制作用。结论:RTCA系统可准确地监测SAHA抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的情况。
- 周伟强
- 关键词：乳腺癌MCF-7SAHA
- 实时无标记细胞分析系统与传统MTT法在测定乳腺癌细胞增殖中的比较被引量：7
- 2017年
- 目的:通过实时无标记细胞分析法与传统MTT法对乳腺癌细胞增殖进行监测以对比确定研究细胞增殖的最佳实验方法手段。方法:采用MTT法、实时无标记细胞分析法测定瘦素刺激乳腺癌MCF-7细胞增殖的效果。结果:MTT法和实时无标记细胞分析法结果均表明瘦素作用浓度为0.625 nmol/L、作用时间为24 h的条件下对乳腺癌MCF-7细胞有诱导生长的效果。但实时无标记细胞分析法能够实时监测细胞生长和增殖的动态生物学反应过程,观察效果更加直观、准确。结论:实时无标记细胞分析法可较好地弥补MTT法的缺点,成为一种新的研究细胞增殖的实验方法。
- 周慧周伟强
- 关键词：乳腺癌MCF-7MTT
- SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长被引量：1
- 2021年
- 目的研究SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的作用和机制。方法以人乳腺癌MCF-7细胞为研究目标,Muse细胞分析仪检测SAHA对细胞活力的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA对CTSV的mRNA及蛋白表达的影响,同时检测利用siRNA干扰技术敲除CTSV后的细胞CTSV表达水平;细胞免疫荧光法检测SAHA对LC3II分子的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA诱导自噬过程中相关ATG分子和LC3的mRNA和蛋白的变化;Bafilomycin A1抑制自噬,随后利用Western blot和Muse细胞分析仪分别检测p62蛋白水平和SAHA作用后的细胞活力。结果SAHA可以抑制MCF-7细胞的增殖,并促进CTSV的表达。CTSV-siRNA转染细胞后,CTSV的mRNA和蛋白水平均显著性降低。SAHA增加了LC3免疫荧光点的分布,与CTSV-siRNA共同作用可恢复由CTSV-siRNA敲减引起的细胞自噬减弱。SAHA在增强ATG4C和Beclin1表达的同时,LC3B也随之升高而mTOR则下降。抑制CTSV表达后也同时逆转了SAHA的效应。Bafilomycin A1阻断自噬后,被SAHA抑制的p62蛋白的表达和细胞活力显著增强。结论SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长。
- 周慧韩翰周伟强
- 关键词：乳腺癌SAHAMCF-7细胞LC3
