王孝波
- 作品数:7 被引量:3H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 日本血吸虫β-catenin基因、蛋白及用途
- 本发明公开了一种日本血吸虫基因,所述基因具有编码β-catenin蛋白的核苷酸序列,该核苷酸序列包含:编码SEQ ID NO.1氨基酸序列的DNA序列,或编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中缺失、添加、插入或取代一...
- 苑纯秀李红飞王孝波冯新港杨健美林矫矫
- 日本血吸虫Frizzled家族受体的克隆、表达及其生物学功能分析
- 血吸虫生长、发育、性成熟及产卵等生物学过程主要是由细胞间各种信号网络调控的。以前,本课题组首次克隆了与日本血吸虫Wnt信号途径相关的可能的配体SjWnt4和SjWnt10a、可能的受体SjFz5和SjFz7等基因、以及其...
- 王孝波
- 关键词:日本血吸虫WNT信号通路克隆表达
- 文献传递
- 日本血吸虫Wnt受体蛋白SjFz5在不同发育阶段的组织定位及mRNA表达水平分析被引量:2
- 2012年
- 为研究日本血吸虫(Sj)Wnt信号分子受体SjFz5(Frizzled5)在Sj生长发育中的作用,本实验对其在不同发育阶段的mRNA转录水平及组织分布进行了检测,并采用定量PCR方法比较SjFz5基因在Sj不同发育阶段间的mRNA水平差异。以7 d童虫cDNA为模板,扩增SjFz5基因编码胞外区CRD(Cystein rich domain)的基因片段,构建pET-SjFz5-CRD表达重组质粒进行原核表达。以纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并进行SjFz5蛋白的组织定位。结果显示:SjFz5基因mRNA在发育早期表达水平相对较高,其中7 d童虫中表达量最高,13 d和18 d童虫下调了约1/3。23 d及其后雌雄虫的表达水平继续下调,雄虫下调比雌虫略显缓慢。整个成虫阶段SjFz5 mRNA维持在一个相对较低的水平。免疫组化结果显示SjFz5蛋白在虫体组织中分布广泛,其中雌雄虫生殖器官组织中的分布最为明显。随着卵巢和睾丸的逐步发育,SjFz5蛋白的量也呈现增加的趋势。SjFz5 mRNA在7 d童虫内表达量最高,SjFz5蛋白在雌雄生殖器官组织中分布最为明显,提示其介导的Wnt信号通路可能参与调节童虫阶段的细胞增殖、器官分化,并可能调节两性生殖细胞的发育。
- 信彩岩王孝波冯新港高阳石耀军杨健美王立群苑纯秀
- 关键词:日本血吸虫WNT免疫组化
- 日本血吸虫Frizzled9基因、蛋白及用途
- 本发明公开了一种日本血吸虫基因,所述基因具有编码Frizzled(Fz)家族蛋白的核苷酸序列,该核苷酸序列包含:编码SEQ ID NO.1氨基酸序列的DNA序列,或编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中缺失、添加、插...
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- 日本血吸虫β-catenin基因、蛋白及用途
- 本发明公开了一种日本血吸虫基因,所述基因具有编码β-catenin蛋白的核苷酸序列,该核苷酸序列包含:编码SEQ ID NO.1氨基酸序列的DNA序列,或编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中缺失、添加、插入或取代一...
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- 文献传递
- 日本血吸虫Frizzled9基因、蛋白及用途
- 本发明公开了一种日本血吸虫基因,所述基因具有编码Frizzled(Fz)家族蛋白的核苷酸序列,该核苷酸序列包含:编码SEQ ID NO.1氨基酸序列的DNA序列,或编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中缺失、添加、插...
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- 文献传递
- 日本血吸虫β-catenin基因的克隆及在不同发育阶段的表达水平被引量:1
- 2011年
- 【目的】分析β-连环蛋白(β-catenin)在不同发育阶段日本血吸虫体内的表达特征,为研究Wnt/β-catenin信号通路对虫体发育的调控奠定基础。【方法】以7 d童虫cDNA为模板,通过RACE技术获得日本血吸虫β-catenin基因全长cDNA序列。采用实时定量PCR分析该基因mRNA在不同发育阶段日本血吸虫体内表达水平的变化。以含有多个抗原表位的β-catenin部分cDNA序列为模板,构建原核pET28a-β-catenin-310重组质粒,表达β-catenin蛋白。以纯化的原核表达产物为抗原,免疫BALB/c小鼠制备抗血清,以此抗血清为一抗,通过Westernblotting分析β-catenin蛋白在不同发育阶段日本血吸虫体内表达量的变化。【结果】β-catenincDNA(GenBank登陆号GU570442)序列全长2 354 bp,含完整的开放阅读框,编码671个氨基酸。β-catenin基因mRNA表达水平在虫卵中最高,23 d雌虫次之,在13 d童虫和23 d雄虫中也较高,约是23 d雌虫的一半,在其他发育阶段mRNA的表达水平相对较低。构建的重组质粒以包涵体形式表达β-catenin重组蛋白,该蛋白有很好的免疫原性。在日本血吸虫不同发育阶段β-catenin蛋白表达量的变化趋势与β-cateninmRNA表达水平的变化基本一致。【结论】不同发育阶段日本血吸虫β-catenin基因mRNA表达水平与β-catenin蛋白表达水平变化趋势基本一致;结合日本血吸虫发育特征,推测Wnt/β-catenin信号通路可能对虫体的器官分化、虫卵的形成及卵胚发育等过程起着重要的调控作用。
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- 关键词:日本血吸虫Β-CATENIN基因克隆表达WNT信号通路