鄢荣歆
- 作品数:3 被引量:7H指数:1
- 供职机构:大连工业大学生物与食品工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学农业科学更多>>
- 海刺参组织蛋白酶L基因的克隆、重组表达及活性鉴定被引量:6
- 2009年
- 通过RT-PCR和RACE PCR技术,从海刺参(Stichopus japonicus)肠中克隆得到编码组织蛋白酶L(SjCL)基因,其中全长cDNA 1 287 bp,5′非编码区(UTR)202 bp,3′UTR 87 bp,开放阅读框(ORF)999 bp,编码332个氨基酸(aa),包括组织蛋白酶L成熟肽316 aa和信号肽16 aa,分子质量预测为35.3 ku。用SjCL序列与相似物种海胆、海葵等进行对比,可知SjCL具有组织蛋白酶L所特有的氨基酸保守区域ERFNIN和GNFD,以及由Cys 139,His 278和Asn 299残基组成的保守活性位点。将编码SjCL基因克隆进原核表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a(+)-SjCL,转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞,再进行诱导表达、亲和纯化和透析复性,得到了纯化且具有活性的重组SjCL。酶活力检测结果表明,重组SjCL对组织蛋白酶L特异性底物Z-Phe-Arg-Nmec具有较高活性,而对组织蛋白酶B特异性底物Z-Arg-Arg-Nmec无活性。本实验对SjCL的cDNA序列进行了生物信息学分析并通过基因工程的手段表达出具有活性的重组SjCL,为进一步研究组织蛋白酶L在海刺参自溶过程中的作用提供理论基础。
- 鄢荣歆徐赛涛丛丽娜杨冠科朱蓓薇
- 关键词:组织蛋白酶LRT-PCR
- 不同品种大麦发芽过程中硫-甲基蛋氨酸及相关指标的跟踪检测被引量:1
- 2009年
- 采用氢火焰离子化检测器(FID)、顶空结合毛细管柱气相色谱对不同品种大麦的硫-甲基蛋氨酸(SMM)进行跟踪测定,同时对发芽期间SMM含量差异较大的品种的蛋白酶活力及相关指标(浸出率、α-氨基酸态氮、可溶性氮和总氮)进行跟踪检测。实验结果表明,发芽过程中,国产大麦SMM含量较高,Cervoise大麦SMM含量较低,国产大麦的蛋白酶活力、可溶性氮和总氮的含量高于Cervoise大麦,而浸出率和α-氨基酸态氮的含量则低于Cervoise大麦。
- 王芝梅窦少华郭继强赵长新鄢荣歆
- 关键词:大麦发芽蛋白酶活力
- 组织蛋白酶L的高效表达
- 海参是一种非常重要的水产经济动物,具有很高的营养和药用价值,海参的养殖及相关功能食品的开发日益受到关注。多种理化因素造成的海参自溶是新鲜海参保存、运输与加工过程中难以克服的主要问题。已研究证明,存在于海参体壁与肠中的一系...
- 鄢荣歆
- 关键词:海参组织蛋白酶L活性鉴定
- 文献传递