陈金武
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 人源EGF结构域蛋白及其应用
- 本发明通过体外抑菌活性检测了人源EGF结构域蛋白抗不同革兰氏阴性菌的最低抑菌浓度,证明了人源EGF结构域蛋白对革兰氏阴性菌具有明显的抑制作用,以便开发出一类治疗革兰氏阴性菌感染的新型药物。通过银染检测证明了人源EGF结构...
- 宋旭李灵陈金武马登佼
- 人凝血因子Ⅶ在CHO/DG44细胞中的表达被引量:1
- 2015年
- PCR法扩增FⅦ基因,构建重组表达质粒FⅦ-pOptiVEC,酶切、测序鉴定.脂质体法将FⅦ-pOptiVEC质粒转入CHO/DG44细胞,并用氨甲喋呤(MTX)进行分级加压筛选,获得高表达重组FⅦ蛋白的阳性细胞克隆.亲和层析法纯化FⅦ,并通过Western-blot检测蛋白表达情况.采用FⅦ促凝活性检测试剂盒(凝固法)检测FⅦ的凝血活性.结果表明筛选出的细胞克隆能稳定表达目的蛋白,MTX加压使其表达量明显升高.促凝活性检测结果证明获得的FⅦ蛋白具有凝血活性.
- 马登佼陈金武吴传芳
- 关键词:真核表达凝血活性
- 人凝血因子轻链蛋白及其应用
- 本发明通过体外抑菌活性检测了人凝血因子轻链蛋白抗不同革兰氏阴性菌的最低抑菌浓度,通过体内抑菌活性检测了人凝血因子轻链蛋白对革兰氏阴性菌的抑制作用,证明了人凝血因子轻链蛋白对革兰氏阴性菌具有明显的抑制作用,以便开发出一类治...
- 宋旭陈金武廖东升马登佼
- 文献传递
- 强化融合蛋白lhFⅦ-LDM对人肺腺癌细胞A549体内致瘤性的抑制
- 2014年
- 以人凝血因子Ⅶ(FⅦ)cDNA和编码力达霉素(LDM)辅基蛋白LDP的质粒(pETVH-LDP)为模板,通过PCR及搭桥PCR构建原核表达人凝血因子Ⅶ轻链(the light chain of FⅦ,lhFⅦ)和LDP融合蛋白lhFⅦ-LDP的重组质粒pET19b-lhFⅦ-LDP.重组质粒转化感受态表达菌株E.coli Rosetta-gami B(DE3)pLysS,诱导表达后亲和纯化,并以Western blot鉴定得到的融合蛋白lhFⅦ-LDP.将lhFⅦ-LDP与LDM的烯二炔发色团(AE)进行分子组装制备强化融合蛋白药物lhFⅦ-LDM.用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,co-IP)检测lhFⅦ-LDP与人肺腺癌细胞A549组织因子(TF)的结合特异性,并通过裸鼠移植瘤实验研究lhFVⅡ-LDM对A549细胞体内致瘤性的影响.结果显示,lhFⅦ-LDP能够与TF特异性结合,并且,强化融合蛋白lhFⅦ-LDM能够显著抑制A549细胞的体内致瘤性.
- 廖东升阳宇陈金武马登佼李灵
- 关键词:A549细胞体内致瘤性