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可复制型双质粒抗肾癌DNA疫苗及其构建方法与应用: 本发明公开了一种抗肾癌双质粒可复制型DNA疫苗及其构建方法与应用。该双质粒DNA疫苗活性成分为pSVK-G250FGB与pSVK-CAVE，其能够诱导小鼠机体产生针对hG250及mVEGFR2抗原特异性的体液免疫和细胞免...; 于继云阎瑾琦王宇殷小涛武帅朱晓明王籽橙杜芝燕; 文献传递

前列腺穿刺活检的阳性风险预测方法和装置: 本发明提供一种前列腺穿刺活检的阳性风险预测方法和装置，能够预测前列腺穿刺活检阳性的具体风险，以减少临床不必要的前列腺穿刺。在本发明的前列腺穿刺活检的阳性风险预测方法中，采集行前列腺穿刺活检的前列腺癌筛查患者的年龄、总前列...; 高江平李方龙殷小涛崔亮; 文献传递

β-hCG蛋白在大肠杆菌系统的表达、纯化及活性鉴定被引量：1: 2013年; 目的获得β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)融合蛋白β-hCG/GST并验证其抗原活性。方法利用PCR法扩增β-hCG全长基因,将其克隆至原核表达载体pET-42a中,构建重组质粒pET-42a-β-hCG,将该重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析,亲和层析法纯化融合蛋白,目的蛋白用Western blot法鉴定,ELISA检测纯化得到的融合蛋白的抗原活性。结果测序结果证实成功扩增出目的基因β-hCG;酶切和测序结果证实pET-42a-β-hCG原核表达载体构建成功;转化后可以成功诱导并纯化出大小与预期一致的蛋白;Western blot法及ELISA检测证实纯化后的β-hCG/GST融合蛋白具有良好的免疫原性。结论成功获得β-hCG/GST融合蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性,为以β-hCG为靶位的抗肿瘤主动免疫治疗研究奠定了基础。; 王伟殷小涛李云奇田仁礼吴昊阎瑾琦高江平于继云; 关键词：Β-HCG 原核表达蛋白纯化

过表达Sprouty2分子促进HEK293T细胞增殖与存活被引量：1: 2014年; 目的构建表达人Sprouty 2(SPRY2)基因的重组表达载体pDC315/hSPRY2,转染人胚肾(HEK)293T细胞表达目的蛋白,初步探讨其对HEK293T细胞增殖与存活的影响。方法构建hSPRY2重组腺病毒表达载体,体外转染HEK293T细胞,以Western blot法检测目的蛋白的表达,以CCK-8法检测SPRY2对HEK293T细胞增殖或去血清条件下细胞存活的影响。结果成功构建重组表达载体pDC315/hSPRY2,在转染的HEK293T细胞中检测到目的蛋白hSPRY2的表达,转染pDC315/hSPRY2组HEK293T细胞的增殖率及存活率均明显高于对照组即转染pDC315/EGFP组(P<0.05)。结论成功构建了hSPRY2重组表达载体,过表达hSPRY2可促进HEK293T细胞的增殖与存活。; 朱静潆杜芝燕王芳于继云田仁礼殷小涛张巍; 关键词：过表达增殖存活

人survivin蛋白的原核表达、纯化及抗原活性鉴定被引量：2: 2013年; 目的构建人肿瘤抗原survivin的原核表达载体,优化在大肠杆菌中的表达条件,并对survivin/His融合蛋白进行纯化和抗原活性鉴定。方法设计针对survivin基因序列的特异引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增人survivin全长基因序列(538 bp)克隆至原核表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a-survivin,并将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达survivin/His融合蛋白,并采用Ni亲和层析凝胶纯化重组蛋白。纯化后的重组蛋白经Western blot法、ELISA鉴定其抗原活性。结果重组表达载体经BamHⅠ和HindⅢ鉴定正确;IPTG诱导后经SDS-PAGE分析表明获得了相对分子质量(M r)24 000大小的重组蛋白;纯化后的蛋白纯度达到90%。Western blot法和ELISA检测证实纯化的survivin蛋白能够与特异性抗体发生反应,表明其具有良好的抗原活性。结论成功构建了原核表达载体pET28a-survivin,利用大肠杆菌表达系统实现了融合蛋白的可溶性表达并进行纯化,纯化后survivin蛋白经鉴定具备较高的抗原活性。; 殷小涛王伟田仁礼徐元基阎瑾琦张巍高江平于继云; 关键词：SURVIVIN 原核表达蛋白纯化活性检测

肿瘤基因疫苗的研究进展被引量：2: 2013年; 最近,美国FDA批准上市了第一个肿瘤治疗性疫苗,成为肿瘤治疗史上的一个里程碑事件。肿瘤免疫治疗领域目前正朝着发展新型疫苗技术方向前进,理想的肿瘤疫苗应该可以产生强大、持久和有效的免疫反应,同时疫苗的制造成本低廉,可以形成标准化生产工艺。本文中所提及的基因疫苗是在肿瘤多种免疫治疗方式中新出现的一种治疗方法。多项研究已经证明,肿瘤免疫基因治疗方式可以产生有效的免疫反应,获得很好的临床效果。在本综述中,我们简要概述当前肿瘤基因疫苗的发展现状及最新研究进展,探讨肿瘤基因疫苗的未来发展趋势。; 田仁礼殷小涛王伟高江平于继云; 关键词：基因疫苗肿瘤免疫治疗

稳定表达hSPRY/Luc的人膀胱癌细胞株裸鼠皮下移植瘤模型的建立被引量：2: 2017年; 目的建立稳定共表达人sprouty2(hSPRY2)基因和萤光素酶报告基因(luciferase,Luc)的J82人膀胱癌细胞株,并建立其裸鼠皮下移植瘤模型。方法通过PCR扩增hSPRY2及Luc全长基因,并分别构建慢病毒表达载体pCDH-hSPRY2和pLVX-Luc,包装慢病毒。用两种病毒上清同时感染人膀胱癌J82细胞,经嘌呤霉素、G418筛选出单克隆细胞株;采用细胞活体成像、免疫荧光细胞化学染色、Western blot法检测hSPRY2和Luc基因在单克隆细胞株中的表达。J82-hSPRY2/Luc细胞皮下接种BALB/c裸鼠建立移植瘤模型,通过活体成像检测肿瘤生长情况。结果筛选出J82-hSPRY2/Luc人膀胱癌细胞株,并通过活体成像、免疫荧光染色和Western blot验证了hSPRY2和Luc基因的共表达;通过活体成像动态观察到裸鼠皮下移植瘤的生长情况。结论成功建立了稳定共表达hSPRY2和Luc基因的J82-hSPRY2/Luc人膀胱癌细胞株以及可用于活体成像检测的裸鼠皮下移植瘤模型。; 殷小涛李方龙金一鹏殷朝阳齐思勇武帅王籽橙王琳于继云高江平; 关键词：膀胱癌萤光素酶活体成像

输尿管镜及辅助器械的发展现状与展望被引量：2: 2017年; 输尿管镜是泌尿外科"医工结合"最明显、紧密的技术之一。随着工科技术的进步和医学理论的更新,输尿管镜和相关辅助器械取得了较大创新与发展,出现了输尿管软镜、电子成像、钬激光、取石篮等技术和器械,显著提高了输尿管镜的工作能力,扩展了其在泌尿外科疾病诊疗中的作用。因此,本文对输尿管镜及其辅助器械的发展现状、以及未来可能的研究热点做一综述。; 殷小涛崔亮李建民高江平; 关键词：输尿管镜辅助器械机器人技术

肾嗜酸细胞腺瘤的诊断与治疗(附63例报告): 目的分析总结肾嗜酸细胞腺瘤患者的临床特征,提高对肾嗜酸细胞性腺瘤的诊断及治疗水平.方法及结果回顾性分析1997年5月～2014年5月我院收治的63例肾嗜酸细胞腺瘤患者的临床资料.其中男性患者31例(49.2％),女性...; 史立新殷小涛

单中心前列腺穿刺活检结果查询表的建立被引量：4: 2016年; 目的：综合利用PSA及其相关参数建立能够简便查询的前列腺穿刺阳性率查询表.方法纳入2009年7月至2015年3月在解放军总医院行前列腺穿刺活检的患者,收集前列腺体积、游离PSA（free PSA,fPSA）和总PSA（total PSA,tPSA）等临床资料.多因素Logistic回归分析预测前列腺癌的独立性影响因素,并利用相关因素建立前列腺穿刺阳性结果查询表.结果资料完整且病理结果为前列腺癌和前列腺增生的患者纳入研究,共1077例.根据PSA水平分为0~2.5、2.6~4.0、4.1~10.0、10.1~20.0和＞20.0 ng/ml 5组,前列腺癌检出率分别为20.9％、20.0％、37.3％、48.1％和80.2％,随着PSA水平的升高,前列腺癌检出率也明显升高.多因素Logistic回归分析发现tPSA、fPSA和前列腺体积均为前列腺癌的独立性预测因素,tPSA、fPSA百分比（free to total PSA,f/tPSA）和PSA密度（PSA density,PSAD）在前列腺癌和前列腺增生两组间存在显著差异（P＜0.05）,综合利用上述3个指标建立前列腺阳性穿刺查询表.结论本研究根据 tPSA、f/tPSA和PSAD建立的查询表为临床前列腺穿刺活检提供了一个简便实用的阳性率查询工具.; 李方龙殷昭阳李德维崔亮殷小涛金一鹏齐思勇许勇唐杰石怀银高江平张旭; 关键词：前列腺特异抗原前列腺肿瘤查询表

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殷小涛

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