郭吉星
- 作品数:11 被引量:6H指数:1
- 供职机构:石河子大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目兵团博士基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 绵羊肌肉生长抑制素MSTN原核表达及其纳米抗体文库的构建与鉴定
- 2014年
- 克隆绵羊肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因并在大肠杆菌中诱导表达,纯化重组蛋白免疫健康的双峰驼(Bactrian camel),分离其外周血淋巴细胞提取总RNA,利用RT-PCR扩增骆驼重链抗体IgG2、IgG3的可变区(VHH)基因片段,将VHH片段与pCANTAB5E连接后电转入大肠杆菌TG1构建纳米抗体文库。结果显示,纳米抗体文库容量为9.5×10~5,挑取部分克隆进行测序分析,所获得的纳米抗体文库具有良好的多态性,为进一步筛选绵羊MSTN的高特异性纳米抗体片段奠定了基础。
- 李尤简张国奇郭吉星陈新凯豆晓霞陈创夫盛金良
- 关键词:绵羊肌肉生长抑制素
- miR-127和miR-136在转基因克隆绵羊胎盘中的表达分析及其靶基因的鉴定被引量:1
- 2012年
- 克隆动物胎盘发育缺陷是造成动物克隆效率低下的一个重要原因。目前认为克隆胎盘发育异常通常是由于一些基因表达的异常所致,与表观遗传修饰有关。microRNA是一种重要的表观遗传修饰方式,对动物胚胎发育和胎盘的形成有着重要的调控作用。为研究miR-127和miR-136在克隆动物胎盘中的表达情况及其与克隆动物发育缺陷的关系,本实验运用荧光定量PCR分析了死亡克隆绵羊胎盘和同期普通绵羊胎盘组织中miR-127和miR-136的相对表达量,并鉴定了miR-127和miR-136的靶基因及靶基因在胎盘中的表达情况。结果显示,miR-127和miR-136在克隆绵羊胎盘中的表达量分别增加了3.1和2.8倍。EGFP荧光敲除实验证实,胎盘发育相关基因Rtl1是miR-127和miR-136的靶基因,同时定量PCR分析发现Rtl1基因在克隆绵羊胎盘中的表达量降低了3/5。结果说明,miR-127和miR-136在克隆胎盘中的异常表达可导致Rtl1基因的低表达,这很可能是导致克隆动物死亡的一个重要原因。
- 胡圣伟倪伟陈创夫赛务加甫务热力.哈孜郭吉星
- 关键词:克隆靶基因
- 绵羊肌肉生长抑制素原核表及其纳米抗体文库的构建与鉴定
- 研究目的:本研究以抑制绵羊肌肉生长抑制素(MSTN)的功能为出发点,通过制备MSTN 纳米抗体,探究一条有效促进动物肌肉生长的新途径.材料方法:(1)绵羊MSTN 的诱导表达,确定ELISA 包被抗原用量.利用IPTG ...
- 李尤简张国奇郭吉星陈新凯豆哓霞陈创夫盛金良
- 绵羊肌肉生长抑制素原核表及其纳米抗体文库的构建与鉴定
- 研究目的:本研究以抑制绵羊肌肉生长抑制素(MSTN)的功能为出发点,通过制备MSTN纳米抗体,探究一条有效促进动物肌肉生长的新途径。材料方法:(1)绵羊MSTN的诱导表达,确定ELISA包被抗原用量。利用IPTG在大肠杆...
- 李尤简张国奇郭吉星陈新凯豆哓霞陈创夫盛金良
- 文献传递
- 噬菌体展示anti-BVDV纳米抗体文库的构建
- 牛病毒性腹泻/粘膜病(Bovine viral diarrhea/mucosal disease)是由牛病毒性腹泻病毒引起的、主要发生于牛的一种急性、热性传染病,其临诊特征为黏膜发炎、糜烂、坏死和腹泻。本病呈世界性分布,...
- 肖红冉郭吉星张国奇李尤简盛金良陈创夫
- 关键词:牛病毒性腹泻蛋白表达噬菌体
- 一种MSTN纳米抗体、构建方法及其应用
- 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种MSTN纳米抗体、构建方法及其应用,构建绵羊MSTN基因表达产物的纳米抗体文库;通过噬菌体展示技术得到针对MSTN基因表达产物特异性纳米抗体;构建双价绵羊MSTN纳米抗体。本发明提供...
- 陈创夫盛金良吴鹏李尤简郭吉星
- 文献传递
- 肌肉生长抑制素促绵羊生长制剂的研究
- 肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN),又称GDF-8(growth differentiationfactor8),是体内广泛存在的一种糖蛋白,属于转化生长β(transforming growthfactor...
- 郭吉星
- 一种MSTN纳米抗体、构建方法及其应用
- 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种MSTN纳米抗体、构建方法及其应用,构建绵羊MSTN基因表达产物的纳米抗体文库;通过噬菌体展示技术得到针对MSTN基因表达产物特异性纳米抗体;构建双价绵羊MSTN纳米抗体。本发明提供...
- 陈创夫盛金良吴鹏李尤简郭吉星
- 新疆哈萨克绵羊MHCⅠ类基因第二、三外显子序列多态性分析被引量:3
- 2013年
- 为研究新疆中国哈萨克绵羊主要组织性抗原复合体Ⅰ类基因第二、三外显子的序列多态性,采用PCR和测序的方法对新疆伊犁地区36只哈萨克绵羊MHCⅠ类基因第二、三外显子进行了扩增和测序,并对序列进行了生物信息学分析。结果表明:哈萨克绵羊MHCⅠ类基因第二、三外显子序列具有丰富的多态性,碱基组成具有一定的不平衡性,并且经过了自然选择的作用,与数据库中牛的序列的进化分析显示了跨物种多态性。实验数据为深入研究绵羊MHCⅠ类基因的多态性及绵羊抗病新品种的选育提供理论依据。
- 刘志方吴长新张辉李蕊郭吉星肖红冉陈创夫
- 关键词:MHC聚合酶链式反应基因多态性
- 绵羊MSTN多克隆抗体的制备及细胞毒性分析被引量:1
- 2013年
- 目的:研究绵羊肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)多克隆抗体的安全性。方法:将绵羊MSTN成熟肽基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化至BL21(DE3)中;利用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,West-ern blotting鉴定其免疫原性;ELISA检测抗体效价;通过检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的水平研究其细胞毒性。结果:成功获得了330 bp的绵羊MSTN成熟肽基因,表达蛋白分子量约为33 kDa,纯度达90%以上;Western blot检测表明MSTN蛋白具有免疫原活性;ELISA检测证实制备的抗体可与抗原蛋白特异性结合,抗体效价为l:25 600,细胞毒性试验表明高浓度的多克隆抗体(200μg/mL)对肌肉细胞无毒害作用。结论:制备的绵羊MSTN多克隆抗体具有生物学活性,对肌肉细胞无细胞毒性,为促生长效果验证提供了安全保障。
- 郭吉星张辉胡圣伟李天森张文智贺志瑞张豫孙志华陈创夫
- 关键词:肌肉生长抑制素原核表达多克隆抗体细胞毒性