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高糖对肾小管上皮细胞PTEN蛋白表达影响被引量：2: 2015年; 目的观察高糖条件下肾小管上皮细胞第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)蛋白的表达变化,探讨其在肾小管纤维化病变中的作用及可能机制。方法体外培养大鼠肾小管上皮细胞株(NRK52E),随机分为对照组和高糖组,每组分别设2、12、24、48 h 4个时间点进行动态观察;采用免疫荧光细胞化学染色检测E-钙黏素(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达变化,Western blotting检测各组PTEN、磷酸化蛋白激酶B[p-Akt1(Ser473)]、E-caderin和α-SMA蛋白表达变化。结果与对照组比较,高糖组培养24、48 h时,PTEN、E-caherin蛋白表达量[分别为(1.15±0.13)、(1.10±0.13)和(1.23±0.11)、(1.22±0.11)]均减少(均P<0.05),而p-Akt1(Ser473)、α-SMA蛋白表达量[分别为(1.53±0.13)、(1.60±0.13)和(1.86±0.10)、(1.91±0.10)]均增多(均P<0.05);PTEN与E-cadherin蛋白表达量呈正相关(r=0.58,P<0.05),与α-SMA蛋白表达量呈负相关(r=-0.61,P<0.05)。结论高糖培养的肾小管上皮细胞中PTEN蛋白表达明显减少,可能通过PI3K/Akt信号通路参与了肾小管纤维化病变的发生发展过程。; 张昌志石明隽李霜王圆圆刘丽荣石春花严瑞郭兵; 关键词：肾小管上皮细胞高糖

PPARγ调控PTEN/AKT/FAK通路影响糖尿病肾病肾小管间质纤维化的机制研究: 背景：　　糖尿病肾病(DN)发病率逐年增高，发病机制复杂，病情进展则发生肾纤维化，治疗十分困难。目前对引起肾纤维化的信号通路及分子机制尚不完全清楚。PTEN基因编码的蛋白具有脂质磷酸酶和蛋白磷酸酶活性，是PI3K/AKT...; 严瑞; 关键词：糖尿病肾病肾小管间质纤维化基因调控

MG132对高糖条件下肾小管上皮细胞SnoN蛋白表达及纤维化效应的影响被引量：4: 2015年; 目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对高糖培养条件下肾小管上皮细胞核转录共抑制因子Sno N蛋白表达的影响,探讨MG132减轻高糖状态下肾小管纤维化病变的作用及可能机制。方法:将体外培养的NRK-52E细胞分为正常组(NG)、高糖组(HG)和不同浓度MG132预处理后高糖培养组(HG+MG132),采用免疫荧光双染的方法观察E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肾小管上皮细胞中的表达和分布,用Western blotting方法检测Sno N、Samd泛素化调节因子2(Smurf2)、Arkadia、E-cadherin、α-SMA和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)等目标蛋白的相对表达量。结果:与NG组相比,HG组肾小管上皮细胞E-cadherin和Sno N表达减少(P<0.05),而α-SMA、Col-Ⅰ、Smurf2和Arkadia表达增多(P<0.05);与HG组相比,不同浓度MG132预处理肾小管上皮细胞后高糖培养,可见肾小管上皮细胞中Sno N和E-cadherin蛋白表达显著上调(P<0.05),而α-SMA和Col-Ⅰ蛋白的表达显著下调(P<0.05),并且这种效应呈量效依赖性,但MG132预处理对Smurf2和Arkadia的表达无影响。结论:MG132可对抗高糖介导的肾小管上皮细胞的纤维化效应,其机制可能是通过减少Sno N蛋白的泛素化降解作用实现的。; 石春花石明隽王圆圆刘丽荣张昌志李霜肖瑛严瑞郭兵; 关键词：肾小管上皮细胞高糖 MG132

糖尿病小鼠肾组织中细胞焦亡发生的现象研究被引量：2: 2020年; 目的:观察糖尿病(DM)小鼠肾组织中是否发生细胞焦亡及相关蛋白表达变化。方法:以链脲佐菌素(STZ)复制DM C57BL/6J小鼠模型(DM组),并设立正常对照组(NC组);16周后处死小鼠,测量血清中血糖和血肌酐,采用HE、Masson染色观察两组小鼠肾组织的变化,应用Western blot法及Real Time-PCR检测活性半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、细胞焦亡关键蛋白Gasdermin-D(GSDMD)及其mRNA表达水平。结果:与NC组相比,DM组小鼠血糖及血肌酐升高,HE及Masson染色下见DM组小鼠肾组织中肾小球内基质沉积和胶原纤维增生,部分肾小管上皮细胞可见细胞肿胀、空泡变性、管腔扩张及基底膜增厚;DM组中活性Caspase-1、GSDMD的蛋白及mRNA表达较NC组增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:DM小鼠肾组织中可能发生由Caspase-1激活介导GSDMD触发的细胞焦亡。; 周兴艳李华柳茜罗欣月陈烨朱春玲严瑞; 关键词：糖尿病肾病血糖血肌酐

糖尿病小鼠肾组织中PPARγ和PTEN的表达被引量：2: 2017年; 目的:探讨糖尿病(DM)小鼠肾组织中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)和第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)在肾纤维化过程中的表达变化及可能机制。方法:用链脲佐菌素(STZ)复制DM小鼠模型,并设正常对照组(NC组),每组8只,饲养16周后处死小鼠取肾组织,采用HE和Masson染色观察肾组织形态变化,SP法检测肾组织中E钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,Western blot检测肾组织中PPARγ、PTEN、蛋白激酶B1(protein kinase B1,PKB1/Akt1)、磷酸化蛋白激酶B1[p-Akt1(Ser^(450))]蛋白的表达,qRT-PCR检测肾组织中PPARγ和PTEN mRNA的变化。结果:与NC组比较,DM组小鼠E-cadherin表达减少,α-SMA表达增多;DM组肾组织p-Akt1(Ser^(450))蛋白表达增加,PPARγ、PTEN蛋白及mRNA表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PPARγ可能通过调节PTEN转录水平减少PTEN的表达。; 刘玲伶严瑞王圆圆石明隽郭兵; 关键词：蛋白激酶类 PTEN蛋白

丹酚酸B对高糖培养肾小管上皮细胞转分化的影响及意义被引量：7: 2015年; 目的:探讨丹酚酸B对高糖诱导肾小管上皮细胞分化的影响及可能机制。方法:体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRK52E随机分为正常糖(NG)组、高渗(HM)组、高糖(HG)组和高糖+Sal B(HB)组,分别培养24 h;采用免疫酶细胞化学染色对NRK52E细胞进行鉴定,MMT法检测丹酚酸B对细胞生长活性的影响,免疫荧光细胞化学和Western blotting检测各组TGF-β1、E-caderin、α-SMA和Col-Ⅳ蛋白的表达。结果:与NG组相比较,HG组肾小管上皮细胞中TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅳ蛋白表达增多(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05);与HG组比较,HB组肾小管上皮细胞中TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅳ蛋白表达减少(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达增多(P<0.05)。结论:丹酚酸B对高糖诱导肾小管上皮细胞的上皮-间充质转化(EMT)有明显抑制作用,其机制可能是通过抑制TGF-β1的表达,改善了肾小管纤维化病变的发生发展。; 张昌志石明隽王圆圆刘丽荣肖瑛石春花严瑞郭兵; 关键词：肾小管上皮细胞高糖培养丹酚酸B 转化生长因子-Β1

吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏组织中干细胞标志物表达的影响: 2019年; 目的:探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)的特异性激动剂吡格列酮(PIO)对糖尿病大鼠(DM)肾脏组织中干细胞标志物CD24、CD133表达的影响。方法:将24只大鼠均分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)和吡格列酮喂养组(DP组),DM组和DP组用链脲佐菌素(STZ)复制DM大鼠模型,造模成功后DP组大鼠用PIO灌胃8周;3组大鼠饲养至16周时处死取肾组织,采用Western blot法检测肾组织中CD24、CD133、E钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Fibronectin蛋白的表达;qRT-PCR检测肾组织中CD24和CD133 mRNA的表达。结果:与NC组大鼠比较,DM组大鼠肾组织CD24、CD133蛋白及mRNA、Fibronectin、α-SMA蛋白表达增多,E-cadherin表达减少,差异有统计学意义(P<0.05);与DM组比较,DP组大鼠肾组织CD24、CD133蛋白及mRNA、Fibronectin、α-SMA蛋白表达均减少,E-cadherin表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:吡格列酮可能通过抑制EMT的发生,影响糖尿病肾组织纤维化程度及CD24、CD133的表达。; 张业严瑞李华刘畅周兴艳朱春玲; 关键词：肾脏纤维化 CD24 CD133 吡格列酮

水飞蓟宾对肾间质纤维化模型大鼠肾小管上皮-间充质转分化的影响被引量：1: 2018年; 目的:探讨水飞蓟宾对肾间质纤维化模型大鼠肾小管上皮-间充质转分化(EMT)的影响。方法:将36只8周龄雄性SD大鼠均分为假手术组(S组)、模型组(U组)、治疗组[水飞蓟宾200 mg/(kg·d)](D组),U组及D组均采用单侧输尿管梗阻复制大鼠肾间质纤维化模型,D组大鼠于术后第1天使用水飞蓟宾灌胃至处死前[200 mg/(kg·d)],S组和U组注射等量生理盐水灌胃;各组大鼠分别于术后第7天、第14天处死6只大鼠,免疫组化染色和Western Blot观察观察Ski、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅲ型胶原(col-Ⅲ)蛋白的表达,Pearson法分析Ski与TDI、TFI、TGF-β1、α-SMA、col-Ⅲ蛋白表达的相关性。结果:大鼠肾组织免疫组化染色和Western Blot结果显示,与S组比较,U组Ski、E-cadherin蛋白表达明显减少,TGF-β1、α-SMA、col-Ⅲ表达明显升高,第14天时变化更明显(P<0.05);与U组比较,D组大鼠肾组织中Ski、E-cadherin有所增加,但仅第14天差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、α-SMA、col-Ⅲ显著降低,第14天组更为明显(P<0.05);Pearson相关分析显示,Ski表达与E-cadherin表达呈正相关,而与TGF-β1、α-SMA、col-Ⅲ呈负相关(P<0.05)。结论:水飞蓟宾可能通过Ski影响EMT的发生。; 刘畅刘畅朱春玲严瑞; 关键词：肾间质纤维化 Α-平滑肌肌动蛋白水飞蓟宾

山茱萸对肾间质纤维化的保护作用及机制研究被引量：11: 2015年; 为评价山茱萸对肾间质纤维化的保护作用及其作用机制。36只5周龄体重相近的雄性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(U组)、山茱萸(300 mg/Kg)干预组(D组)。分别于术后第7 d、第14 d处死三组中的6只SD大鼠。观察肾组织病理改变和肾间质纤维化程度、YKL-40、β-catenin、Wnt4蛋白表达。结果显示D组各时间点肾小管间质损伤指数、肾间质纤维化指数、YKL-40、β-catenin均低于同期U组,D14组高于D7组(P<0.05﹚。而D组Wnt4和β-catenin、YKL-40蛋白表达量显著降低,与U组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。表明山茱萸对肾脏具有一定的保护作用。; 陈烨朱春玲严瑞刘晓霞宋文玉; 关键词：YKL-40 肾间质纤维化山茱萸

水飞蓟宾对肾间质纤维化的治疗作用及机制被引量：2: 2018年; 目的:研究水飞蓟宾对肾间质纤维化模型大鼠的保护作用及机制。方法:8周龄雄性SD大鼠36只,随机分成假手术组、模型组及治疗组,模型组及治疗组采用左侧输尿管梗阻方法复制肾间质纤维化模型,假手术组大鼠只做手术(不结扎输尿管),治疗组造模同时给予灌胃水飞蓟宾至处死前[200 mg/(kg·d)],假手术组和模型组注射等量生理盐水灌胃;各组大鼠分别于术后第7和14天处死(6只/组),取肾组织行HE染色观察大鼠肾组织病理改变、Masson染色以观察各组大鼠肾间质胶原的沉积,行免疫组化染色观察观察大鼠肾脏组织切片中Ski、转化生长因子-β1(TGF-β1)、smad3及纤维连结蛋白(FN)的表达;Western Blot检测肾脏组织匀浆中Ski、TGF-β1、smad3、FN蛋白表达水平,Pearson法分析Ski与TDI、TFI、TGF-β1、smad3及FN表达的相关性。结果:HE、Masson染色结果显示,假手术组大鼠肾小球、肾小管未见异常,模型组大鼠HE染色可见肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性及基底膜增厚,Masson染色肾小管、肾间质可见纤维阳性染色,第14天时更严重;治疗组各时点肾脏病变程度均较同期模型组减轻,模型组大鼠的TDI和TFI评分均高于假手术组,治疗组较模型组有所降低,第14天时变化更大(P<0.05);肾脏组织免疫组化结果显示,与假手术组比较,模型组SKi表达明显减少,TGF-β1、smad3及FN表达明显升高,第14天时变化更明显(P<0.05);与模型组比较,治疗组Ski有所增加,但仅第14天差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、smad3、FN显显著降低,第14天组更为明显(P<0.05);肾脏组织匀浆Western Blot结果显示,与假手术组比较,模型组SKi表达少明显减,TGF-β1、smad3、FN表达明显升高,第14天时变化更明显(P<0.05);与模型组比较,治疗组Ski显著增加,TGF-β1、smad3、FN显显著降低,第14天组时变化更明显(P<0.05);Pearson相关分析显示,Ski表达与TDI、TFI、TGF-β1、smad3、FN均呈显著负相�; 刘畅刘畅朱春玲严瑞; 关键词：肾间质纤维化 SKI TGF-Β/SMAD信号通路水飞蓟宾单侧输尿管梗阻

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严瑞

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