崔亚飞
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划四川省教育厅青年基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牦牛S100A12基因的克隆及其在生殖器官中表达情况的检测被引量：2
- 2013年
- 为了解S100A12基因在牦牛生殖器官中的表达情况,采用RT-PCR技术从牦牛脾组织中扩增S100A12基因序列,用半定量RT-PCR技术和免疫组织化学染色方法分别检测S100A12基因mRNA和S100A12蛋白在牦牛脾、淋巴结、乳腺及生殖器官中的表达。结果显示,克隆的牦牛S100A12基因序列片段大小为279bp,包含一个完整开放阅读框(ORF),推导编码92个氨基酸;S100A12mRNA和蛋白在脾中表达量相对最高,在睾丸、附睾、淋巴结、乳腺、卵巢中相对强表达,在阴茎、阴道、子宫(子宫角、子宫体和子宫颈)中相对弱表达。结果表明,S100A12mRNA和蛋白在牦牛生殖器官中均有不同程度的表达,提示其在牦牛生殖过程中可能发挥一定的作用。
- 曹随忠崔亚飞姚学萍雍康杨德英沈留红余树民刘宗平
- 关键词：牦牛
- 奶牛S100A12蛋白多克隆抗血清的制备被引量：2
- 2012年
- 为研究奶牛S100A12蛋白功能提供一种灵敏、高效的免疫学检测试剂,将纯化好的S100A12蛋白分别与弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂乳化制备成抗原,免疫新西兰大白兔制备S100A12多克隆抗血清,应用琼脂双扩散法、间接ELISA法和Western blot方法检测该抗体的效价及其特异性。结果表明,所制备的S100A12抗血清经琼扩法和间接ELISA法检测效价分别达到1∶8和1∶409 600,同时免疫印迹法证实该抗体能与S100A12蛋白特异性结合。本试验成功获得了特异性强、效价高的S100A12多克隆抗体,为进一步深入研究S100A12基因功能提供了有力工具。
- 崔亚飞姚学萍雍康李计尚余树民曹随忠
- 关键词：奶牛多克隆抗体
- 不同家禽卵黄对德国牧羊犬精液冷冻的影响被引量：5
- 2013年
- 为了探索不同家禽卵黄在德国牧羊犬精液冷冻中的应用效果,分别在精液冷冻稀释液中添加不同家禽(鸽、鸡、鸭、鹅和鹌鹑)和不同浓度(10%、15%、20%、25%和30%)的卵黄,并分别对冷冻前和解冻后的精子活率、顶体完整率和畸形率进行比较分析。结果:在德国牧羊犬精液冷冻稀释液中加入相同浓度的5种不同家禽卵黄,家鸽组冻后活率、顶体完整率和畸形率分别为(52.0±2.1)%、(54.3±3.7)%和(27.7±1.8)%,对德国牧羊犬精液冷冻有最佳的保护效果,其最佳浓度为20%。因此,鸽卵黄可替代鸡卵黄,作为冷冻稀释液的组成成分,用于德国牧羊犬的精液冷冻。
- 沈留红杨庆稳邓华学张传师雍康崔亚飞
- 关键词：卵黄德国牧羊犬冷冻
- 牦牛S100A12基因克隆及其在生殖器官中表达研究
- S100A12正常表达于中性粒细胞和角质细胞中,同时在淋巴细胞、单核细胞中低表达,是一种参与机体免疫防御或炎性反应的钙结合蛋白。S100A12蛋白属于S100蛋白家族中的一员,与炎症高度相关,能被特异性地分泌到炎性部位。...
- 崔亚飞
- 关键词：牦牛分子克隆半定量RT-PCR组织表达谱
- 文献传递
- 奶牛气管抗菌肽(TAP)基因乳腺特异性表达载体的构建与鉴定
- 2013年
- 【目的】构建奶牛气管抗菌肽(TAP)基因乳腺特异性表达载体。【方法】根据GenBank中牛TAP基因cDNA序列(GenBank号:NM_174776)设计引物,从奶牛乳腺组织中RT-PCR扩增TAP基因编码序列,将其克隆到pMD19-T(simple)载体中测序。重组质粒pMD-TAP经EcoRⅠ+KpnⅠ双酶切回收目的基因片段,亚克隆到携带增强型绿色荧光蛋白的通用型乳腺特异性表达载体pBLG-EGFP中,采用脂质体法转染奶牛乳腺上皮细胞(bMEC)、COS-7细胞,并注射泌乳家兔乳腺组织,荧光显微镜检测转染细胞中绿色荧光蛋白的表达,半定量RT-PCR检测家兔乳腺组织中TAP mRNA的表达。【结果】成功构建了乳腺特异性表达载体pBLG-EGFP-TAP,该载体可在bMEC中特异性地表达绿色荧光蛋白;半定量RT-PCR检测发现,转染pBLG-EGFP-TAP可显著提高家兔乳腺组织中TAPmRNA的表达水平。【结论】成功构建了乳腺特异性表达载体pBLG-EGFP-TAP,为进一步研究奶牛TAP基因的表达特性及利用基因工程技术防治奶牛乳房炎提供了重要材料。
- 曹随忠姚学萍崔亚飞杨德英雍康余树民刘宗平
- 关键词：奶牛乳房炎Β-防御素
- 抗真菌药安特芬的小鼠微核试验与精子畸形试验研究被引量：2
- 2011年
- 采用小鼠精子畸形试验和微核试验,对安特芬(特比萘芬)进行体内致突变性评价。微核试验:小鼠32只分4组(阴性组、阳性组、治疗量组、2倍治疗量组),连续两次灌胃,间隔24 h,末次灌胃6 h后处死小鼠,取股骨制成骨髓涂片,Gimsa染色,读取微核率;精子畸形试验:雄性小鼠32只分4组(阴性组、阳性组、治疗量组、2倍治疗量组),灌胃5 d,首次给药35 d后处死小鼠,取附睾制片,读取精子畸形率。试验结果显示,安特芬试验组小鼠微核发生率与阴性对照组差异不显著(P>0.05),而阳性对照组微核发生率极显著高于阴性对照组(P<0.01);安特芬试验组小鼠精子畸形率与阴性对照组差异不显著(P>0.05),阳性对照组精子畸形率极显著高于阴性对照组(P<0.01)。研究结果表明,新药安特芬在推荐剂量下无体内致突变作用。
- 卿佰春崔亚飞李晓林姚学萍余树民曹随忠
- 关键词：精子畸形试验微核试验安全性评价
- 奶牛S100A12基因克隆、原核表达及体外抗菌活性分析
- 2013年
- 克隆奶牛S100A12基因并在大肠杆菌中高效表达。采用RT-PCR扩增奶牛外周血白细胞中S100A12基因,构建原核表达载体pCold TF-S100A12,在大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达并纯化。SDS-PAGE和Westernblotting分析显示S100A12基因以融合蛋白形式表达,表达量占菌体总蛋白的46.7%,纯化的重组蛋白(80mg/L)。琼脂扩散法测定重组蛋白对乳腺炎主要致病菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性。结果显示:重组蛋白对大肠杆菌有抗菌活性,而对金黄色葡萄球菌无抗菌活性。本研究为S100A12蛋白抗体制备及基因功能研究奠定了基础。
- 曹随忠雍康姚学萍崔亚飞杨德英余树民刘宗平
- 关键词：奶牛乳房炎原核表达抗菌活性
