王晨宇
- 作品数：14 被引量：20H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 竞争性ELISA方法检测小鼠血清中的P53蛋白被引量：2
- 2011年
- 目的建立动物组织内P53蛋白的免疫检测分析方法,为P53生物药物的代谢分布研究提供检测手段。方法辣根过氧化物酶(HRP)标记抗P53蛋白单克隆抗体3P40,应用标记后的抗体及重组P53蛋白的检测,建立竞争性ELISA检测方法;应用此方法建立血清样品中P53蛋白标准曲线,测定腹腔注射P53后不同时间小鼠血清中P53浓度。结果利用亲和层析纯化的3P40,进行HRP标记,ELISA检测3P40HRP滴度可达1∶200 000;建立的竞争性ELISA方法可以检测PBST中P53蛋白,灵敏度达30 ng/ml,日内精密度较高,相对标准偏差(RSD)小于5%,体现较好的重复性;分别应用正常小鼠血清、PBST稀释的重组P53蛋白样品进行竞争性ELISA检测,结果显示小鼠血清成分对P53蛋白检测有一定的影响;应用血清制备P53蛋白的标准曲线,检测了腹腔注射P53蛋白后不同时间点小鼠血清样品中的P53蛋白浓度。结论进行了抗P53单克隆抗体3P40的HRP标记,建立了竞争性ELISA方法,可用于P53蛋白药物血药浓度检测。
- 武军华魏文清贾培媛王晨宇赵宇刘晶黄春倩王玉霞
- 关键词：P53蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附分析
- 双抗体夹心酶联免疫法检测不同样品中的蓖麻毒素被引量：6
- 2009年
- 目的应用酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测待测样品中的蓖麻毒素。方法用蛋白G亲和层析柱纯化蓖麻毒素单克隆抗体(4C13,3D74,5E4和5H6),以3D74及辣根过氧化物酶(HRP)标记的4C13建立的双抗体夹心ELISA对含有蓖麻毒素的多种样品进行检测。结果抗蓖麻毒素的单克隆抗体经亲和层析纯化后具有较高的蛋白纯度,应用HRP标记的4C13与3D74建立双抗体夹心ELISA,对于溶解于磷酸缓冲液中的蓖麻毒素标准品的检测灵敏度可达2.5μg·L-1;对于土壤、面粉、牛奶、咸菜汁、雪碧、可乐和腐乳汁中的蓖麻毒素样品检测的灵敏度为2.5～5.0μg·L-1;与磷酸缓冲液样品相比较,含有相同浓度蓖麻毒素的小鼠和人血清样品ELISA的阳性结果明显减弱。结论双抗体夹心酶联免疫法能够有效用于含有蓖麻毒素样品的检测分析。
- 郎立伟王玉霞王晨宇赵宇贾培媛傅风华
- 关键词：蓖麻毒素双抗体夹心酶联免疫吸附分析
- 淫羊藿多糖及其组分和它们用于疫苗佐剂的用途
- 本发明涉及淫羊藿的多糖提取物，具体地，本发明涉及从中药材淫羊藿叶中提取的淫羊藿总多糖及其其中的酸性糖组分和非糖组分，以及它们用于制备疫苗佐剂、疫苗制剂、疫苗组合物或抗体的用途。本发明还涉及包含所述淫羊藿总多糖及其组分的药...
- 王玉霞单俊杰朱婷贾培媛武军华赵修南刁玉林王晨宇段丹丹王佩瑞
- 文献传递
- GST-TAT-P53c融合蛋白的表达及对p53基因突变型肿瘤细胞的促凋亡作用被引量：1
- 2007年
- 目的研究P53蛋白C端(P53c)对p53基因突变型肿瘤细胞SW480的促凋亡作用。方法用人类免疫缺陷病毒TAT蛋白的蛋白转导域(TAT)将P53c运载进入肿瘤细胞,用氧依赖性降解区域(ODD)控制P53c在组织中的稳定性。通过PCR方法制备TAT-ODD-p53c(TOPc),TAT-p53c(TPc)及p53c基因,与pGEX4T载体连接后在大肠杆菌中表达谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-TAT-ODD-P53c(GST-TOPc),GST-TAT-P53c(GST-TPc)及GST-P53c等融合蛋白。免疫组化方法检测TAT蛋白运载融合蛋白穿过SW480细胞膜的作用,MTT法检测融合蛋白对SW480细胞活力的影响,流式细胞仪检测致SW480细胞凋亡作用。结果成功构建pGEX系列表达载体,并在大肠杆菌中可溶性表达。Western印迹结果表明,重组蛋白可以和GST单克隆抗体特异性结合。免疫组化显示GST-TPc,GST-TOPcm及GST-TOPc均能进入SW480细胞,GST-TPc能明显降低SW480细胞活性,导致SW480细胞凋亡。含ODD的融合蛋白在常氧环境中对肿瘤细胞有轻度促凋亡作用。结论TAT可以介导其融合蛋白跨越细胞膜。GST-TPc可引起p53突变型肿瘤细胞凋亡。
- 吴少平王玉霞武军华贾培媛王晨宇李前孙曼霁
- 关键词：蛋白质P53蛋白转导域
- 板蓝根总多糖及其组分和它们作为疫苗佐剂的用途
- 本发明属于医药技术领域，涉及一种板蓝根总多糖及其组分和它们作为疫苗佐剂的用途。具体地，涉及从中药材板蓝根中提取的板蓝根总多糖及其中性多糖组分和酸性多糖组分，以及它们作为疫苗佐剂或用于制备疫苗组合物的用途。本发明还涉及包含...
- 单俊杰王玉霞姜威武军华贾培媛朱婷赵修南刁玉林王晨宇
- Western印迹法分析蓖麻毒素在正常小鼠血清和肝组织匀浆中的稳定性被引量：2
- 2010年
- 以重组蓖麻毒素A链（rRTA）免疫家兔,制备的抗rRTA兔血清效价高,能达到1∶51200.以兔多抗血清为检测抗体,建立蓖麻毒素的Western印迹检测法,对蓖麻毒素检测灵敏度可达1 ng.含有蓖麻毒素的小鼠血清和肝组织匀浆（蓖麻毒素终浓度为0.67μg/mL）在37℃孵育0~4 h后,应用此法体外观察蓖麻毒素在正常小鼠组织样品中的稳定性,结果显示Western印迹可用于组织中蓖麻毒素的测定,蓖麻毒素可在小鼠血清和肝组织匀浆中稳定存在.
- 郎立伟王晨宇王玉霞陆丽娜傅风华
- 关键词：蓖麻毒素WESTERN印迹免疫分析
- 生物样品中蓖麻毒素检测方法的建立及蓖麻毒素在动物体内的分布与代谢研究
- 蓖麻毒素(Ricin)是从蓖麻种子中提取的一种核糖体失活蛋白,分子量约为66 KD,由A、B两个亚基组成,两亚基通过二硫键相连。蓖麻毒素性质稳定、毒性极强、制备容易、施毒简单、无特效药,这些特性使其成为最具威胁的潜在生化...
- 王晨宇
- 关键词：蓖麻毒素免疫组化
- 文献传递
- 板蓝根总多糖及其组分和它们作为疫苗佐剂的用途
- 本发明属于医药技术领域，涉及一种板蓝根总多糖及其组分和它们作为疫苗佐剂的用途。具体地，涉及从中药材板蓝根中提取的板蓝根总多糖及其中性多糖组分和酸性多糖组分，以及它们作为疫苗佐剂或用于制备疫苗组合物的用途。本发明还涉及包含...
- 单俊杰王玉霞姜威武军华贾培媛朱婷赵修南刁玉林王晨宇
- 文献传递
- TAT-P53融合蛋白的小鼠肝毒性
- 2012年
- 目的观察TAT类融合蛋白体内抗肿瘤的毒性。方法成功转染移植B16黑色素细胞瘤的C57小鼠ip给予P53,TAT-P53和TAT-常氧依赖性降解结构域(ODD)-P53蛋白5 mg·kg-1,共计12 d。全自动血液生化指标分析仪测定血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)活性、甘油三酯(TG)、血浆总蛋白(TP)、白蛋白(Al)、血糖(GLU)、尿素(UREA)、肌酐(Cre)和胆固醇(CHO)。结果与正常小鼠相比,模型组AST和ALT活性显著升高,TP水平降低。与模型组比较,给予P53和TAT-P53后,血清AST和ALT活性升高的现象没有明显改善,反而比模型组略有上升,TP水平降低的现象也无显著改观,但TG水平显著升高(P<0.01);给予TAT-ODD-P53融合蛋白后,AST和ALT活性升高的现象得到有效逆转,TP接近正常小鼠水平,同时没有发现TG显著升高的现象。与正常对照组比较,给予P53,TAT-P53和TAT-ODD-P53组Al,GLU,UREA,Cre和CHO无明显变化。结论 TAT-P53在体内具有潜在的肝毒性,但无肾毒性。
- 赵宇武军华贾培媛吴少平高珊王晨宇王玉霞
- 关键词：肝毒性天冬氨酸转氨酶丙氨酸转氨酶甘油三酯总蛋白
- 淫羊藿多糖及其组分和它们用于疫苗佐剂的用途
- 本发明涉及淫羊藿的多糖提取物，具体地，本发明涉及从中药材淫羊藿叶中提取的淫羊藿总多糖及其其中的酸性糖组分和非糖组分，以及它们用于制备疫苗佐剂、疫苗制剂、疫苗组合物或抗体的用途。本发明还涉及包含所述淫羊藿总多糖及其组分的药...
- 单俊杰王玉霞朱婷贾培媛武军华赵修南刁玉林王晨宇段丹丹王佩瑞
- 文献传递
