刘洋
- 作品数：13 被引量：101H指数：5
- 供职机构：江南大学食品学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程环境科学与工程医药卫生更多>>
- 解淀粉芽孢杆菌中温α-淀粉酶基因的克隆、表达与酶学性质分析被引量：2
- 2009年
- 以中温α-淀粉酶生产菌株Bacillus amyloliquefaciens M23基因组DNA为模板,PCR扩增得到了2.0 kb α-淀粉酶基因全长序列。该基因由上游启动子220 bp,结构基因1544 bp和终止序列320 bp构成。将无信号肽的α-淀粉酶结构基因amyQ,克隆入表达载体pET28a,转化E.coli BL21(DE3),经诱导,测定α-淀粉酶活性。结果表明:α-淀粉酶基因amyQ获得了活性表达,酶活力为2.297 U/mL,SDS-PAGE电泳结果显示出分子量约为58 kDa特异性蛋白质条带。酶学性质分析表明,重组α-淀粉酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH为6.5,在60℃保温15 min保持85%以上活性,超过15 min,酶迅速失活,在pH 5.5～10.0环境下稳定。水解产物分析表明:淀粉水解终产物主要为麦芽寡糖和糊精和少量葡萄糖。
- 刘洋沈微石贵阳王正祥
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌基因克隆酶学性质
- 黄曲霉毒素B_1与杂色曲霉素对HepG2细胞的联合毒性被引量：15
- 2014年
- 研究了黄曲霉毒素B1(AFB1)和杂色曲霉素(ST)对人肝癌细胞Hep G2的细胞毒性及其联合毒性。体外培养人肝癌细胞Hep G2,用不同浓度梯度的AFB1(0.1、1、5、10μmol/L)和ST(0.5、2.5、5、7μmol/L)单独和联合作用于Hep G2细胞24 h或48 h,分别测量细胞活性、ATP含量、DNA受损程度、线粒体膜电位,以及活性氧含量的变化,通过统计分析得到两种毒素对Hep G2细胞的联合毒性作用。结果显示,AFB1和ST对Hep G2细胞的IC50分别为16.989μmol/L和7.258μmol/L,细胞增殖力、ATP、DNA、线粒体膜电位、活性氧等指标的理论加和值与实际值无显著性差异(P>0.05)。同时,这两种毒素及其混合物对Hep G2细胞的作用终点均可分为3类:第一类为细胞增殖力的降低;第二类包括ATP含量、DNA含量变化;第三类为活性氧含量变化和线粒体膜通透性变化。表明AFB1和ST对Hep G2细胞的联合毒性作用为加和作用。
- 刘洋杜明张根义
- 关键词：黄曲霉毒素B1杂色曲霉素
- 太湖蓝藻培养单细胞蛋白的可行性被引量：6
- 2009年
- 以蓝藻原料为氮源发酵生产酵母单细胞蛋白,考察了碳源、维生素、微量元素、矿物质元素、培养温度、接种量、初始pH、通气量等对酵母产量的影响,优化了发酵条件,1 g/dL(干重)的蓝藻培养基最终使酵母产量达到6.2 g/L,并利用高效液相色谱法检测酵母产物胞内微囊藻毒素。结果表明,酵母中微囊藻毒素含量为390μg/kg。
- 李克朗张玲刘洋丁明波王武杨海麟
- 关键词：太湖蓝藻单细胞蛋白微囊藻毒素
- 博弈论视角下民间借贷法律问题的研究——以P2P模式为例
- 2017年
- 改革开放后,民间借贷逐渐复苏。几十年来,民间借贷一直在国家法律、法规框架之外艰难地生存和发展。P2P作为民间信贷代表性的模式,其立法呼声更是与日俱增,因此对于民间信贷立法的研究在现阶段市场经济社会中显得尤为重要。本文以P2P模式为例,对民间借贷的法律问题进行博弈分析。
- 刘洋潘云华
- 关键词：民间信贷P2P
- 嗜热菌来源的生淀粉酶分离纯化及其酶学性质被引量：12
- 2008年
- 从嗜热菌库中分离到两株能水解生淀粉的菌株173和174,通过扩增和测定两株菌的16S rDNA序列并进行比对结果表明,所分离两株菌属于Geobacillus属的细菌。液体摇瓶发酵菌株173、174,其产生的生淀粉酶(简称RSDE173、RSDE174)活力分别达14.5 U/mL和12.9 U/mL。通过生淀粉吸附-熟淀粉洗脱系统和TOYOPEARL HW-55F系统进行分离纯化,得到纯化的RSDE173和RSDE174,纯化倍数分别为50和29,活力回收率分别为34%和41%。有关RSDE173和RSDE174酶学性质研究显示,对熟淀粉水解的最适作用温度均为70℃,而对生淀粉水解则分别在50℃～60℃和40℃～60℃下表现出高水解活力;对不同底物的最适作用pH值均为5.0～5.5;它们对大多数试验离子的敏感性较低,但个别离子如Co^(2+)、Cu^(2+)对RSDE173或Cu^(2+)对RSDE174的酶活力有一定的抑制作用。纯化的这两种生淀粉酶对不同来源生淀粉的底物专一性并不相同。RSDE173底物专一性顺序为红薯淀粉>小麦淀粉>玉米淀粉>木薯淀粉>糯米淀粉;而RSDE174的糯米淀粉>小麦淀粉>红薯淀粉>玉米淀粉>木薯淀粉。RSDE173对生红薯淀粉有很好的降解,其水解糊化淀粉与生红薯淀粉的比值为1.48:而RSDE174优先降解生糯米淀粉,其相应比值为1.69。
- 董永存刘洋陈源源牛丹丹张梁石贵阳王正祥
- 关键词：嗜热菌生淀粉酶分离纯化
- 应用物联网技术提高食品安全的探究被引量：3
- 2017年
- 随着生活水平和质量的不断提高,人们对食品的安全要求也越来越高。但是与此同时,各类食品安全问题却不断暴露出来。2015年最新《食品安全法》的修订施行,更是表现出国家对食品安全问题的重视。物联网作为21世纪的新兴技术,在各项领域内均有较好运用,因此物联网在我国食品安全中的运用也应势而生。信息与生产结合的产业模式正在不断发展进步,物联网可以很好地解决食品安全问题,但是广泛运用还需要进一步的探索。
- 刘洋潘云华
- 关键词：食品安全物联网
- 多指标测定黄曲霉毒素B_1和伏马菌素B_1联合毒性被引量：1
- 2014年
- 目的:研究黄曲霉毒素B1(AFB1)和伏马菌素B1(FB1)对人肝癌HepG2细胞的联合毒性作用。方法:体外培养人肝癌细胞HepG2,用不同浓度梯度的AFB1(0.1、10、50、100μmol/L)和FB1(0.1、7、14、70μmol/L)单独和联合作用于HepG2细胞24h或48h,通过分别测量细胞活性、ATP含量、DNA受损程度、线粒体膜电位以及活性氧含量的变化,来分析这两种毒素对HepG2细胞的联合毒性作用。结果:SRB实验反应,混合毒素对于HepG2细胞抑制率的理论加和值与实际测量值大都接近于1,其他四个指标的理论加和值与实际值相比,无显著性差异(p>0.05),且两种毒素对细胞的混合毒效应均高于单独作用组。结论:黄曲霉毒素B1和伏马菌素B1对人肝癌HepG2细胞的联合毒性作用为相加作用。
- 杜明刘洋张根义
- 关键词：黄曲霉毒素B1伏马菌素B1HEPG2细胞联合毒性
- 解淀粉芽孢杆菌BamHI甲基转移酶基因克隆、功能鉴定与序列分析被引量：4
- 2009年
- 从解淀粉芽孢杆菌Baillus amyloliquefaciens CICIM B2125中克隆了BamHI甲基转移酶基因(bamHIM),并在大肠杆菌JM109中得到了成功表达。该基因含有1271bp的开放阅读框(ORF),编码423个氨基酸,成熟蛋白分子量为49kD。该基因在自身启动子引导下,表达了具有活性的BamHI甲基转移酶(M.BamHI)。该酶可以将BamHI位点的碱基甲基化。氨基酸序列分析表明该酶存在有NADB_Rossmann结构域。
- 刘洋沈微石贵阳王正祥
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌
- 中温α-淀粉酶的酶学性质研究被引量：41
- 2008年
- 通过盐析、DEAE-FF和Superdex-75,对Bacillus amyloliquefaciens M23产生的α-淀粉酶进行了纯化,得到电泳纯的α-淀粉酶,纯化倍数为29.61,活力回收率为20.06%。用SDS-PAGE测得该酶的分子量为58kD。该酶的最适反应温度为55℃,最适反应pH值为6.0。纯酶液在pH7.0～10.0缓冲液中室温放置24h,可保持80%以上活力。55℃保温15min,基本丧失活力,添加10mmol/L的Ca2+能显著提高酶的热稳定性。Ca2+、Mg2+和Co2+具有激活该酶活性的作用,EDTA抑制酶的活性。60℃,以可溶性淀粉为底物的Km,Vmax,分别为4.33g/L、1.19g/L·min。薄层层析结果表明该酶水解淀粉生成糊精和寡聚糖。
- 刘洋沈微石贵阳王正祥
- 关键词：BACILLUSΑ-淀粉酶纯化
- 植物乳杆菌CCFM8661调节小鼠胆汁酸肠肝循环并增加铅排泄
- 铅（Pb）暴露和毒性的管理仍然是全世界公共卫生的主要优先事项。在我们之前的研究中,益生菌菌株植物乳杆菌CCFM8661通过肠道隔离阻止了小鼠的Pb吸收。该后续研究旨在评估植物乳杆菌CCFM8661的额外保护机制,重点是其...
- 翟齐啸朱诗雅刘洋王晨屈定武赵建新张灏田丰伟陈卫
- 关键词：益生菌植物乳杆菌重金属铅肠肝循环
- 文献传递
