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马铃薯StmiR166b靶基因的鉴定及其表达分析被引量：4: 2019年; 为阐明马铃薯(Solanum tuberosum L.)StmiR166b的生物学功能,以栽培品种‘甘农薯2号’试管苗为试验材料,采用定量PCR技术检测StmiR166b及其靶基因StHB14、StHB15在不同组织中的差异表达;利用pRS300质粒为模板,通过over-lapping PCR技术克隆了包含StmiR166b-StmiR166b^*成熟体序列的前体结构,构建了其人工表达载体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化马铃薯获得了转基因植株。结果表明,StmiR166b及其靶基因StHB14和StHB15在马铃薯根、茎和叶中均有表达,在转基因株系L1、L3中靶基因不同程度地下调表达;与非转基因对照相比,转基因株系的株高和根长变短,生长受到抑制。; 武亮亮张宁张宁朱熙马瑞杨江伟杨江伟; 关键词：马铃薯

马铃薯泛素结合酶StUBC30基因生物信息学及表达模式分析: 马铃薯(Solanum tuberosum L.)是茄科茄属一年生作物,是仅次于小麦、玉米、水稻的第四大粮食作物,也是贫困地区实现脱贫的首选农作物之一.马铃薯在生长发育过程中易受到多种生物胁迫和非生物胁迫,其中干旱和盐碱...; 付学刘维刚张欢欢马瑞唐勋杨江伟晋昕张宁; 关键词：马铃薯生物信息学分析基因表达

MicroRNA介导的基因降解参与马铃薯品种抗旱能力差异的研究: 马铃薯是世界范围内最重要的粮食作物之一,干旱胁迫严重影响其生长和产量.植物对干旱胁迫的响应主要是通过调控相关基因的表达,从而产生一系列生化生理反应来适应干旱胁迫.然而,作物对响应干旱胁迫的敏感性随基因型不同而不同,这是由...; 杨江伟张宁朱熙马瑞姚磊武亮亮司怀军王蒂

马铃薯StNCED1基因过表达载体的构建及其遗传转化被引量：4: 2017年; 马铃薯块茎的休眠和发芽对于块茎生产和加工极为重要,延长块茎休眠期有助于降低块茎水分和养分的消耗,从而提高其应用价值。本研究用PCR方法从马铃薯中克隆了9-顺式-环氧类胡萝卜素双氧合酶(NCED)编码基因St NCED1,并构建了马铃薯块茎特异表达启动子CIPP驱动的St NCED1基因的植物过表达载体p BIC-St NCED1,然后通过根癌农杆菌介导法转化马铃薯栽培品种"陇薯3号"获得转化植株,经卡那霉素抗性筛选得到5株抗性苗,PCR检测证明St NCED1基因已整合到马铃薯的基因组中。qRT-PCR检测表明St NCED1基因在转基因植株试管薯中的表达量分别比未转基因的对照增加2.10~8.09倍。该研究有助于培育块茎休眠期延长的马铃薯新种质。; 马瑞张宁杨江伟朱熙姚磊武亮亮司怀军; 关键词：植物表达载体马铃薯块茎休眠期

马铃薯StMAPK3基因的克隆及其遗传转化: 2016年; 本研究以拟南芥AtMAPK3的核苷酸序列(Gen Bank accession No.NM_114433.2)作为查询序列进行BLAST搜索获得了马铃薯中的同源序列,将其命名为StMAPK3,其开放阅读框为1 122 bp,编码373个氨基酸。StMAPK3具有典型的促分裂原活化蛋白激酶的磷酸化位点TEY基序。从马铃薯栽培品种"大西洋"中克隆得到编码StMAPK3的基因序列,并构建了其植物表达载体p CPB-StMAPK3。用冻融法将重组质粒转入根癌农杆菌LBA4404中,然后再转化马铃薯栽培品种"大西洋"获得了转基因植株,为进一步明确MAPK在马铃薯信号转导过程中的作用提供帮助。; 朱熙刘雪马瑞姚磊武亮亮唐勋张宁司怀军; 关键词：促分裂原活化蛋白激酶马铃薯

马铃薯HD-Zip Ⅰ家族ATHB12基因的克隆及功能鉴定被引量：6: 2016年; HD-Zip I是一类植物特异转录因子,在植物应对外界逆境胁迫过程中有重要的调控作用。本研究从马铃薯栽培品种甘农薯2号中克隆了HD-Zip I转录因子ATHB12基因,其开放阅读框为759 bp,编码252个氨基酸残基。该基因位于马铃薯第1染色体,其启动子区含有ABRE、LTRECOREATCOR15和WBOXATNPR1等多种响应非生物胁迫(ABA、低温、脱水和高盐)的顺式作用元件。ATHB12基因在马铃薯根、茎和叶中均有表达,其根中表达量最高。q RT-PCR分析证实该基因的表达受聚乙二醇(PEG)、Na Cl和ABA诱导,受低温抑制。构建了由组成型表达启动子Ca MV 35S驱动的ATHB12基因的过表达载体,通过农杆菌介导法转化马铃薯获得了转基因植株。干旱处理后,转基因植株叶片中丙二醛含量显著低于非转基因植株(P<0.05),而脯氨酸含量显著高于非转基因植株(P<0.05);转基因植株根鲜重和干重均高于非转基因植株;说明马铃薯ATHB12基因可能参与了逆境胁迫的响应。; 武亮亮姚磊马瑞朱熙杨江伟张宁司怀军; 关键词：马铃薯 HD-ZIP 丙二醛脯氨酸

马铃薯miRNA164靶基因预测及amiRNA164表达载体构建被引量：3: 2016年; Micro RNAs(miRNAs)是内源性的调节基因转录后水平的一类小分子RNA。研究表明miRNA164/NAC在模式植物拟南芥中参与调控植物的生长发育以及对生物和非生物胁迫的耐受性,但目前在马铃薯中关于miRNA164/NAC的表达模式的研究尚未见报道。本研究利用马铃薯中已知的miRNA164序列,通过在线工具ps RNATarget对其靶基因进行预测得到3个靶基因。通过生物信息学分析发现,马铃薯miRNA164的3个靶基因均属于NAC转录因子家族的NAM亚家族,其调控模式与拟南芥中的类似,具有很高的保守性。为了进一步实验验证,利用人工miRNA(artificial miRNA,amiRNA)技术构建了马铃薯amiRNA164表达载体,有助于后期通过遗传转化方法研究miRNA164的调控机理。; 姚磊张宁杨江伟武亮亮朱熙马瑞司怀军; 关键词：马铃薯 NAC转录因子

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马瑞