尚卫娜
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 供职机构：浙江大学生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划浙江省科技厅资助项目浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 番茄斑萎病毒运动蛋白NSm在植物细胞和昆虫细胞内的定位被引量：3
- 2012年
- 【目的】研究番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)运动蛋白NSm的细胞定位。【方法】将NSm基因融合GFP后构建到植物双元表达载体pCHF3中,农杆菌介导浸润本氏烟叶片,同时将融合GFP的NSm基因利用Bac-to-Bac杆状病毒表达体系转染昆虫Tn细胞。在激光共聚焦显微镜下观察NSm-GFP在烟草表皮细胞和昆虫Tn细胞中的定位情况。【结果】观察发现与单独表达GFP在细胞壁周围和细胞核处均匀分布不同,NSm-GFP融合蛋白会在植物细胞内扩散,能够在细胞壁边缘定位,并且在胞间连丝处呈不连续的绿色荧光小点,偶尔成对出现在相邻的两个细胞之间;NSm蛋白在昆虫Tn细胞表面产生数量众多的管状结构并向外延伸。【结论】研究结果表明NSm能够特异性定位在植物细胞的胞间连丝处,并能在昆虫Tn细胞内表达,在细胞表面产生运动蛋白小管。
- 尚卫娜孟春梅郑宽瑜丁铭张仲凯洪健周雪平
- 关键词：番茄斑萎病毒NSM细胞定位
- 番茄斑萎病毒和番茄环纹斑点病毒细胞病理学及其运动蛋白的研究
- 番茄斑萎病毒属(Tospo virus)侵染植物,寄主范围广泛,危害严重,近年来在我国陆续有许多新种或新分离物报道。其中番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)是2008年报道的该属...
- 尚卫娜
- 关键词：番茄斑萎病毒NSM细胞定位
- 文献传递
- 感染番茄斑萎病毒和番茄环纹斑点病毒的植物叶片细胞病理变化观察被引量：5
- 2016年
- 应用透射电子显微镜观察比较了番茄斑萎病毒(TSWV)和番茄环纹斑点病毒(TZSV)感病植物叶片的细胞超微结构,发现两种病毒在病变细胞内的形态及细胞病理变化特征相似,但病毒含量及细胞受损程度存在明显差异。与TSWV相比,TZSV侵染细胞的病变程度更为严重,叶绿体产生大的囊泡,片层结构被破坏,线粒体也发生囊泡化,而TSWV侵染的细胞内线粒体保存相对完好。高压冷冻-冷冻置换制备的样品细胞病理结构与常规化学固定的相似,但对膜结构的保存更加良好。该结果从细胞病理学上证明了TZSV在田间对农作物造成的危害更加严重。
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- 关键词：番茄斑萎病毒细胞病理学高压冷冻透射电子显微镜
- 番茄斑萎病毒运动蛋白NSm的原核表达及抗体制备被引量：2
- 2015年
- 将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)运动蛋白NSm基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,利用大肠杆菌系统表达NSm蛋白,以Ni^(2+)-NTA agarose亲和柱纯化该蛋白与His组氨酸的融合蛋白,免疫家兔制备融合蛋白多克隆抗体。Western blot检测显示,该抗体与NSm重组蛋白以及普通烟病叶中的NSm蛋白具有特异性反应。采用该抗体对TSWV感染的普通烟叶片低温超薄切片进行免疫胶体金标记,透射电镜观察发现特异性金颗粒主要定位在病叶细胞的胞间连丝中,而健康烟草叶片组织中没有金颗粒特异性标记。结果表明,该抗体可用于研究NSm在细胞中的定位。
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- 关键词：番茄斑萎病毒
- 电镜超薄切片批量染色的新方法被引量：6
- 2016年
- 超薄切片染色是透射电镜生物样本制备中的关键环节。本文介绍了一种透射电镜超薄切片染色的新方法,利用简单自制的染色液防污存储与批量染色装置,可对超薄切片载网进行批量化染色,不但极大提高染色效率,而且减少了染色过程中染色液、样品的污染,达到染色液的重复利用,同时减少重金属对操作者的伤害和对环境的污染。
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- 关键词：超薄切片
