刘锦
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：陕西师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 适于AFLP分析的华中五味子DNA提取方法改进被引量：3
- 2009年
- 为获得适于AFLP分析的高质量DNA,采用改进的CTAB法从华中五味子硅胶干燥叶片中提取基因组DNA,即核裂解前加入4℃预冷的CTAB-free Buffer清洗试材,并在无水乙醇沉淀DNA前加入0.1体积3 mol/L NaCl.结果显示,改进CTAB法提取的DNA,主带清晰、无降解,OD260/OD280值在1.80~2.00之间,能被EcoR I和MseI完全酶切,AFLP分析条带清晰,多态性丰富,表明该方法获得的基因组DNA适于AFLP分析.
- 刘锦罗成顾蔚王喆之
- 关键词：华中五味子DNA提取CTAB
- 华中五味子AFLP反应体系的建立被引量：6
- 2009年
- 目的:建立一个适于华中五味子研究用的AFLP反应体系。方法:以华中五味子硅胶干燥嫩叶为试材,采用改良CTAB法提取到高质量DNA。通过琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳对MseⅠ/EcoRⅠ双酶切、连接、预扩增和选择性扩增过程中的关键因素进行分析。结果:双酶切6h,片段主要集中在250～2000bp;连接产物和预扩增产物最适稀释倍数均为10倍;预扩增产物经选择性引物E-ACT/M-CAT和E-ACA/M-CAG扩增,琼脂糖电泳检测其主带分别集中在250～375bp和500～750bp,6%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测及银染,条带清晰可辨。结论:该体系具有稳定性高、重复性好等优点,可用于华中五味子AFLP分析。
- 罗成刘锦顾蔚张琛王喆之
- 关键词：华中五味子AFLP
