李珍
- 作品数：21 被引量：67H指数：5
- 供职机构：南方医科大学生物技术学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广州市科技支撑计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程自动化与计算机技术理学更多>>
- 丹参酮ⅡA的临床应用与配伍禁忌被引量：8
- 2011年
- 回顾近年来文献,概述丹参酮ⅡA及其钠盐的临床应用与配伍禁忌。丹参酮ⅡA及其钠盐不仅对心脑血管系统疾病有重要的治疗作用,而且在抗肿瘤、抗感染性疾病、治疗糖尿病和肝肾疾病等方面也有新的临床应用。丹参酮ⅡA及其钠盐与喹诺酮类、氨基苷类、头孢菌素类抗生素等均有配伍禁忌。丹参酮ⅡA及其钠盐具有多方面的药理作用,值得进一步研究开发。临床应用丹参酮ⅡA时应尽可能单独使用,密切观察。
- 王羽伦李康侯连兵刘琴李珍
- 关键词：配伍
- IgE低亲和力受体基因的克隆、表达及初步鉴定
- 2010年
- 目的利用基因重组的方法建立IgE低亲和力受体(FcεRⅡ)基因的原核表达系统。方法用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞扩增FcεRⅡcDNA基因,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建原核表达载体FcεRⅡ-pGEX-4T-1,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta,诱导表达FcεRⅡ蛋白,通过割胶回收纯化,并用Western blot检测FcεRⅡ的表达。结果测序表明所扩增FcεRⅡcDNA基因,与已报道的序列一致。获得的重组蛋白经Western blot鉴定可以和人IgE特异性结合。结论成功构建了FcεRⅡ-pGEX-4T-1表达载体,获得了能和人IgE特异性结合的重组蛋白,为下一步FcεRⅡ单克隆抗体的制备及应用研究打下了基础。
- 尹晴陈白虹邱国真付琛颖董文其魏威李珍朱勇王萍
- 关键词：IGE
- 共轭亚油酸的抗氧化活性及其抗氧化剂筛选
- 目的考查共轭亚油酸的抗氧化活性并筛选对其活性有保护作用的抗氧化剂。方法采用连苯三酚体系考察共轭亚油酸及其乙酯的抗氧化性;运用气相色谱—质谱联用技术考察影响共轭亚油酸稳定性的因素,筛选保存共轭亚油酸适宜添加的抗氧化剂并考察...
- 杨得坡李杰梅曾晓晖李珍王冬梅冀军峰冀红斌
- 关键词：共轭亚油酸抗氧化抗氧化剂
- 文献传递
- 双羟基脂肪酸异构体的合成及谱学特征被引量：1
- 2011年
- 以共轭亚油酸甲酯为原料,与SeO2反应,经可能的新反应机制合成了4个新的双羟基衍生物,分别是9,10(erythro)-双羟基-11E-十八碳烯酸甲酯,10,11(erythro)-双羟基-12E-十八碳烯酸甲酯,11,12(erythro)-双羟基-9E-十八碳烯酸甲酯和12,13(erythro)-双羟基-10E-十八碳烯酸甲酯,采用半制备正相高效液相色谱进行分离纯化,用LC/MS-MS和NMR对化合物结构进行鉴定,分析化合物的化学位移变化规律和质谱裂解规律,阐明其谱学特征。
- 李珍杨得坡COLIN DUKE董文其
- 关键词：共轭亚油酸谱学特征
- 人IgE重链3-4区蛋白的表达、纯化及功能分析被引量：1
- 2009年
- 目的通过基因重组的方法表达IgE Cε3-Cε4区,鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRⅠ之间的相互作用,并用重组蛋白免疫小鼠制备血清。方法用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞调取IgE Cε3-Cε4cDNA片段,克隆至pET28a(+)构建原核表达载体IgE Cε3-Cε4-pET28a(+),将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达IgE Cε3-Cε4区蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白后,用免疫荧光方法鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRⅠ之间的结合能力,并用UniCAP 100全自动分析检测仪对重组抗原进行定量检测与鉴定;用表达蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗鼠血清,用Western-blot法对多克隆抗体进行鉴定。结果成功调取的人IgE Cε3-Cε4区基因与已报道的序列相一致;获得的IgECε3-Cε4区蛋白相对分子质量(Mr)同预期的结果相一致;IgE Cε3-Cε4能特异性结合人嗜碱性粒细胞表面的FcεRⅠ受体;通过UniCAP 100全自动分析检测仪能够检测到重组抗原并精确到国际单位;免疫鼠血清多抗能特异性结合天然人血清IgE。结论成功构建了IgE Cε3-Cε4-pET28a(+)表达载体,获得了能被人嗜碱性粒细胞表面的FcεRⅠα亚基特异性识别的IgE Cε3-Cε4区蛋白,并用天然人血清IgE鉴定了多克隆抗体,为下一步单克隆抗体的制备打下了基础。
- 付琛颖曲戎梅邱国真魏威林志斌王萍王文敬李珍董文其
- 关键词：IGE
- 生物技术专业本科生培养模式的改革探讨
- 2011年
- 本文就生物技术专业的本科人才的创新教育、跨校合作、就业单位与学校合作、职业规划指导等方面进行改革探讨。
- 李珍陈铙欣董文其
- 关键词：生物技术
- 重组人源细胞珠蛋白单抗制备及检测方法建立被引量：2
- 2011年
- 目的制备重组人源细胞珠蛋白(recombinanthumanCytoglobin,rhCygb)单克隆抗体,并建立检测该蛋白双抗体夹心ELISA法,为下一步研究rhCygb药代动力学做准备。方法用纯化的rhCygb免疫BALB/c小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法获得抗rhCygb的单克隆抗体杂交瘤细胞,间接ELISA法筛选制备单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法。结果筛选获取了稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过抗原表位相加法实验获得5株表位不同的细胞株,Western-blotting验证能与rhCygb特异性结合,间接ELISA法验证其不与本实验室制备的其它PET28a-BL21蛋白及BL21裂解液发生交叉反应。本方法灵敏度为1.25ng/ml,在浓度为10～1250ng/ml时,线性关系良好,相关性达0.9931,实验内和实验间平均变异系数分别为6.2%和10.92%。结论成功建立了灵敏度好、特异性高的双抗体夹心法,为下一步研究rhCygb药代动力学奠定了基础。
- 汤金萍魏威王萍李珍李莹董文其
- 关键词：单克隆抗体ELISA双抗体夹心法
- HIV-1核心抗原p24基因的表达、纯化及应用研究被引量：2
- 2013年
- 目的在原核系统中表达全长HIV-1 p24抗原,对其抗原性进行鉴定,探讨其对HIV早期诊断的价值。方法利用PCR技术从含有HIV-1 gag基因质粒PTM-1中扩增p24蛋白基因,通过酶切消化后连接到表达载体pET28a上,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导,表达p24抗原。通过ELISA和Western blotting(WB)法检测表达产物的免疫反应活性及特异性。结果PCR产物和构建的重组质粒pET28a-p24经双酶切均显示约690 bpDNA片段,与预期p24抗原全基因片段大小一致。SDS-PAGE电泳可见纯化蛋白为1条相对分子量约26×103Mr的外源表达蛋白带,与预期大小一致。ELISA及WB实验证实表达的p24抗原具有较好的活性及特异性。时间分辨荧光免疫双抗体夹心法显示与市售p24抗原线性一致。结论构建了HIV-1 p24/pET28a原核高效表达系统,表达产物与市售的p24抗原具有相似的抗原性。
- 刘华琴李鹏吴英松李珍魏威董文其王萍
- 关键词：HIV-1基因表达时间分辨荧光免疫分析
- 基于条件互信息量的随机蕨特征匹配算法被引量：4
- 2012年
- 为解决随机蕨属性组合独立性假设导致分类器性能降低的问题,提出了一种基于条件互信息量的随机蕨特征识别方法,通过已知类别属性组合之间的互信息量最大化,将关联度大的特征属性划分为一个蕨丛,并建立朴素贝叶斯模型,训练分类器。此特征属性选择方法改进了随机蕨离线训练机制,有效提高了分类器的性能,显著改善了随机蕨特征匹配算法的有效性。结合实例及仿真分析,验证了所提算法在保证实时性的同时提高了特征匹配的精确度。
- 李珍江贵平
- 关键词：视觉跟踪条件互信息
- 半固体培养基法制备单抗的可行性研究被引量：5
- 2010年
- 目的建立稳定的甲基纤维素半固体培养基一步法筛选和克隆化杂交瘤细胞的方法。方法常规细胞融合后,用甲基纤维素半固体培养基重悬细胞沉淀,通过优化甲基纤维素半固体培养基中甲基纤维素、血清及L-谷氨酰胺三种成分的浓度,建立稳定高效的杂交瘤细胞克隆化方法。并进行有限稀释法和甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞的对照实验。阳性克隆扩大培养,ELISA检测后冻存,再次复苏后ELISA检测呈阳性为稳定杂交瘤细胞株。结果甲基纤维素三种浓度中,甲基纤维素浓度1.0%和1.2%时获得的杂交瘤细胞团个数约为甲基纤维素浓度1.25%时的2倍。而甲基纤维素浓度1.2%时细胞团固定效果较甲基纤维素浓度1.0%更好。通过对梯度稀释的SP2/0细胞培养后,选择半固体培养基中使用的胎牛血清浓度(25%),在半固体培养基中含4mmol/LL-谷氨酰胺比含2mmol/LL-谷氨酰胺得到多近一倍的杂交瘤。得到的5株阳性杂交瘤在扩大培养、冻存复苏后抗体分泌稳定,得到5株稳定阳性杂交瘤细胞株。有限稀释法和甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞对照实验显示半固体培养基法可节省一半时间。结论建立了稳定的甲基纤维素半固体培养基一步法筛选和克隆化杂交瘤细胞的方法。该法缩短了克隆化的时间,节省了人力和材料,不需要添加饲养细胞和细胞因子,是一种稳定高效的杂交瘤细胞克隆化方法。
- 刘帆王萍魏威李珍朱勇董文其
- 关键词：杂交瘤克隆
