徐华荣
- 作品数：10 被引量：16H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 陕北白绒山羊KAP9.2基因腺病毒载体的构建及包装被引量：2
- 2014年
- 研究旨在构建能够表达KAP基因家族角蛋白相关蛋白9.2(KAP9.2)基因的腺病毒载体,为研究KAP9.2在绒山羊绒毛生长中的功能奠定基础。通过外科手术采集陕北白绒山羊皮肤组织,采用酚/氯仿法提取其基因组,设计引物,通过PCR技术扩增KAP9.2基因。通过酶切连接构建pAdTrack-KAP9.2穿梭载体。将该穿梭载体经Pme I线性化后与pAdEasy-1载体共转化到BJ5183细菌中进行重组,经过卡那霉素抗性筛选获得重组腺病毒载体pAdEasy-KAP9.2。将pAdEasy-KAP9.2经Pac I酶切线性化后转染HEK293人胚肾细胞,培养7d后收集细胞,反复冻融破碎细胞,离心收集病毒。在病毒扩增4次后,采用LaSRT法测定其滴度。最终测得病毒滴度为1.34×108 GFU/mL。研究成功包装KAP9.2基因重组腺病毒颗粒。
- 徐华荣郭杨赵志东李托张智英王昕
- 关键词：重组腺病毒陕北白绒山羊
- HEK293T细胞中验证靶向猪ApoE基因TALEN活性
- 2018年
- 为研究载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)基因功能以及构建转基因猪疾病模型,利用TALEN(Transcription activator-like effector nuclease)在线设计工具及TALE质粒文库,组装特异性敲除猪ApoE基因的TALEN,并在HEK293T细胞中利用双荧光报告系统检测其活性。结果表明,共转染TALEN质粒及报告载体的试验组细胞检测到明显的绿色荧光信号,仅转染报告载体的对照组则没有信号。试验结果显示,TALEN可以在HEK293T细胞中工作,成功构建了靶向敲除猪ApoE基因的TALEN。
- 徐华荣雒志新李托王昕
- 关键词：APOETALEN基因敲除
- 猪ApoE基因ZFNs构建及其在真核细胞中活性验证被引量：2
- 2016年
- 研究旨在构建并筛选能够特异性敲除猪ApoE基因的ZFNs,为研究ApoE基因的功能,构建转基因猪模型提供技术支持。利用CoDA(Context-dependent assembly)方法设计并筛选能特异性靶向结合猪载脂蛋白E(ApolipoproteinE,ApoE)基因的锌指蛋白,与非特异性核酸酶FokⅠ组装成锌指核酸酶ZFNs(Zinc-finger nucleases),然后在酵母系统及HEK293细胞上对组装的ZFNs的靶向切割能力进行验证。结果在酵母及HEK293细胞中检测到ZFNs的活性,表明成功构建了靶向敲除猪ApoE基因的ZFNs。
- 徐华荣李托王昕
- 关键词：APOE基因
- 一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用
- 本发明公开了一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用，以酵母菌株作为宿主细胞，宿主细胞中转染有shRNA干扰载体，该shRNA干扰载体上设有启动子-shRNA-miR30的元件排列。该口服重组酵母能够穿...
- 张智英张龙邵斯旻徐坤李欣憶徐华荣
- 文献传递
- 羊绒生长期、休止期陕北白绒山羊皮肤组织中KAP9.2和Hoxc13基因的表达被引量：11
- 2012年
- 【目的】研究角蛋白相关蛋白9.2基因(KAP9.2)和Hoxc13基因在羊绒生长不同阶段皮肤组织中的表达量对产绒量的影响,为羊绒生长的调控机理研究奠定基础。【方法】以陕北白绒山羊为研究对象,以奶山羊作为对照,利用qRT-PCR方法,检测羊绒生长期和休止期高产、低产绒量陕北白绒山羊皮肤组织中KAP9.2和Hoxc13基因的表达量。【结果】对于KAP9.2基因,在羊绒生长期高产绒量陕北白绒山羊的相对表达量极显著低于低产绒量陕北白绒山羊(P<0.01),而在羊绒休止期高产绒量陕北白绒山羊的相对表达量却显著高于低产绒量陕北白绒山羊和奶山羊(P<0.05);对于Hoxc13基因,在羊绒休止期高产和低产绒量陕北白绒山羊的相对表达量极显著高于奶山羊(P<0.01)。高产和低产绒量陕北白绒山羊皮肤组织中KAP9.2和Hoxc13基因在生长期、休止期平均相对表达量的变化趋势相似,均表现为生长期极显著低于休止期(P<0.01)。【结论】KAP9.2对绒毛生长有抑制作用;Hoxc13对KAP9.2基因的表达可能具有调控作用。
- 赵志东徐华荣屈雷杨莹王昕
- 关键词：羊绒生长期陕北白绒山羊
- TALE重复单元四聚体库的构建方法、TALEN表达载体的构建方法及其应用
- 本发明TALE重复单元四聚体库的构建方法、TALEN表达载体的构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。所述四聚体库的构建包括构建TALE单个重复单元、构建TALE单体质粒以及在T4DNA连接酶缓冲液中加入TALE单体质粒...
- 张智英张志强李铎辛颖麻丽霞王昕张涛徐华荣
- 文献传递
- 奶牛FGF2基因的单核苷酸多态性序列及其检测方法
- 本发明奶牛FGF2基因的单核苷酸多态性序列及其检测方法，属于基因工程技术领域，所述奶牛FGF2基因的单核苷酸多态性序列包括：奶牛FGF2基因第一内含子第11646位为A或G的单核苷酸多态性序列。所述检测方法为以奶牛基因组...
- 王昕张智英张婷婷李托赵志东徐华荣
- 文献传递
- 靶向敲除猪ApoE基因的ZFN及TALEN的构建与活性验证
- 传统的基因组修饰技术中常用的是同源重组和逆转录病毒介导法，由于这些方法存在效率低、特异性差、病毒整合到基因组等问题，制约了其在研究中的应用。锌指核酸酶（Zinc-finger nucleases，ZFNs）技术是一种能够...
- 徐华荣
- 关键词：TALEN
- 文献传递
- 长链非编码RNA及其在医学、家畜方面的研究进展被引量：1
- 2012年
- 长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)是一类转录本长度超过200 nt的RNA分子,没有或少有编码蛋白的能力。LncRNA参与编码基因表达调控的表观遗传机制,能够直接调控靶基因的转录与蛋白的降解等,在基因组印记、转录调控及人类疾病等方面有着广泛功能。作者着重对LncRNA的特点、分类、作用机制及其在医学和家畜方面的研究进展作一综述,最后对LncRNA在家畜方面的研究与应用进行展望。
- 李托徐华荣王昕
- 关键词：长链非编码RNA转录调节人类疾病家畜育种
- 一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用
- 本发明公开了一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用，以酵母菌株作为宿主细胞，宿主细胞中转染有shRNA干扰载体，该shRNA干扰载体上设有启动子-shRNA-miR30的元件排列。该口服重组酵母能够穿...
- 张智英张龙邵斯旻徐坤李欣憶徐华荣
