龙飞
- 作品数：4 被引量：28H指数：2
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院陆伯勋食品安全研究中心更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 金黄色葡萄球菌基因组DNA提取方法的比较研究被引量：22
- 2008年
- 目的:对金黄色葡萄球菌DNA不同提取方法进行评价。方法:采用4种不同金黄色葡萄球菌DNA提取方法,比较提取得率和质量,对提取的DNA进行PCR扩增并评价效果。结果:在DNA提取之前加入70%乙醇可有效处理细菌细胞,增加细胞对裂解液的敏感性,再用溶菌酶处理能很好地被消化,获得了一种快速、简洁和有效的提取方法。结论:这是一种适用于金黄色葡萄球菌和其它病原细菌的有效提取方法(方法4),可用于金黄色葡萄球菌和其它病原细菌的分子生物学操作和快速诊断技术。
- 唐俊妮龙飞史贤明周锐
- 关键词：金黄色葡萄球菌基因组DNA
- 基于活菌内标的单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR方法的建立
- 单核细胞增生李斯特菌/(Listeria monocytogenes/)是一种重要的食源性致病菌,广泛的分布于自然界,人体感染后的死亡率高达20/%-30/%。在美国每年约有2500起由单核细胞增生李斯特菌引起的食品中毒...
- 龙飞
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR假阴性
- 文献传递
- 单核细胞增生李斯特菌菌膜形成突变株的筛选被引量：3
- 2009年
- 通过对功能和调控基因的研究,探讨单核细胞增生李斯特菌菌膜的形成机制,建立防治该细菌污染食品的方法。使用电转化的方法,将携带转座子Tn917的质粒pTV1-OK转化到单核细胞增生李斯特菌中,诱导转座,获得1 880个突变株,加上前期构建的突变株,使突变库增加到2 200株。使用96孔细胞培养板对随机挑选的1 000余株突变株进行菌膜培养,结晶紫染色后测OD595值。以此值作为菌膜形成量的筛选依据,最终挑选出菌膜形成能力变小的突变株8株,目标突变获得率约8‰。对筛选的菌膜形成量变小的突变株进行荧光显微观察,证实该8株突变株菌膜形成能力弱于野生菌株。通过PCR验证,这8株突变株的基因组中插入了Tn917,这可能是它们的表型发生变化的原因。
- 马瑜丹朱欣娜龙飞史贤明
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌TN917
- 单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒的研制被引量：1
- 2011年
- 目的:建立一种用于单核细胞增生李斯特菌快速检测的荧光定量PCR试剂盒。方法:根据本课题组前期工作基础,针对单核细胞增生李斯特菌hly基因序列设计TaqMan探针和引物,建立荧光定量PCR检测方法,将反应试剂组装成试剂盒,并对该试剂盒的各项参数进行评价。结果:特异性试验表明,组装的试剂盒对8株单核细胞增生李斯特菌标准菌株的检测均呈阳性反应,对6株其它种的李斯特菌及13株食品(环境)中常见的非李斯特污染菌(如沙门氏菌、金黄色葡萄球菌)呈阴性反应。该试剂盒的基因组DNA检测灵敏度为3.94fg/反应(约合1.34CFU/反应)。该试剂盒批内平均变异系数为2.2%,批间变异系数为1.9%,具有良好的重复性;同时稳定性强,反复冻融处理对其无明显影响;可在-20℃下避光保存1年。结论:该试剂盒具有特异性强、灵敏度高、重复性好、稳定性强等优点,可应用于单核细胞增生李斯特菌的快速检测。
- 张丹丹龙飞王大鹏施春雷史贤明
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒
