公共文化服务平台

重组细胞高产型H3N2猪流感病毒株的拯救: 为拯救出一株能够在动物传代细胞中高水平复制的 H3N2亚型猪流感疫苗株, 本研究利用反向遗传操作技术,将 A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)毒株的 PB1、PA、 NP、M、NS 基因和 A/PR/8毒株...; 杨涛刘明刘春国张云刘大飞陈浩; 文献传递

数字时代的技术与社会:多维技能变迁的挑战与应对策略: 2024年; 一、引言。每一次技术革命都伴随社会变革及人类劳动技能的重塑。19世纪工业革命时期,机械化生产的诞生及其大规模运用显著解放了生产力,机器开始替代工人。技术进步革新了生产工具,转变了生产方式,提高了生产效率,但也引发学者对机器自动化所导致的工人去技能化趋势的担忧。; 臧雷振温宇涵陈浩; 关键词：技能化工业革命时期机械化生产

H1亚型猪流感病毒血凝素基因在昆虫细胞中的表达及其间接ELISA方法的初步建立被引量：9: 2008年; 根据GenBank发表的H1亚型猪流感HA基因序列设计引物,扩增出HA基因片段,将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,筛选阳性重组转座载体pFastBacGP67B-H1,转化含有杆状病毒穿梭载体(bacmid)的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体获得重组转座子(rBacmid-H1),在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBV-H1),再感染细胞,收获目的蛋白。通过血凝试验、免疫印迹法、免疫组化分析表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物学活性。利用表达的蛋白作为猪流感间接ELISA的抗原,初步建立H1亚型猪流感的间接ELISA检测方法,并对内蒙古、辽宁和黑龙江等地送检的93份猪血清进行了检测,阳性率为31.18%,为研制开发快速、准确、简便的H1亚型猪流感鉴别诊断试剂盒奠定基础。; 万春和刘明刘春国张晓霁杨涛刘大飞陈浩齐金龙乔传玲; 关键词：血凝素基因间接ELISA

重组H5N3亚型禽流感细胞毒灭活疫苗免疫佐剂效果的评价被引量：1: 2009年; 为评价佐剂对疫苗免疫效果的影响,本试验以反向遗传学技术拯救的重组H5N3亚型禽流感病毒为种毒,对国产矿物油以及赛比克公司提供的MontanideTM ISA 70MVG(简称70M)和MontanideTM ISA 206 VG(简称206)3种佐剂制备的灭活疫苗进行了SPF鸡免疫攻毒试验。结果表明国产矿物油佐剂组与70M佐剂组都能对SPF鸡100%保护,206佐剂组仅能保护40%,攻毒的SPF鸡发病,但不死亡;从抗体水平上比较发现70M佐剂组稍好于国产矿物油佐剂组,但两组之间差异不显著,而这两组与206佐剂组差异极显著。这3种佐剂组免疫鸭均能够诱导产生较高的抗体水平,70M佐剂组优于国产矿物油佐剂组和206佐剂组,但3者差异不显著。用70M系的8种佐剂MontanideTM ISA 70 essai Mi(i=1-8)(简称70Mi)佐剂乳化的疫苗免疫SPF鸡,结果表明70M佐剂组效果最好,攻毒后免疫鸡不排毒,而且无临床症状;统计学分析显示70M佐剂组与所有70Mi佐剂组差异均显著。这些结果表明70M佐剂可以作为新型疫苗佐剂用于禽流感疫苗的制备。; 刘春国刘明万春和陈浩李洪涛孙恩成杜金玲刘大飞; 关键词：禽流感 H5N1亚型细胞苗佐剂

H5N1亚型高致病性禽流感病毒NP基因在昆虫细胞中的表达及其表达产物的生物学活性被引量：3: 2008年; 根据GenBank上登录的H5N1亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)核蛋白(NP)基因序列设计引物,通过PCR扩增出A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)毒株的NP基因片段,将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,将筛选的阳性重组转座载体pFastBacGP67B-NP转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,构建了杆状病毒表达载体,获得了重组转座子(rBacmid-NP),在脂质体介导下转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBv-NP)。SDS-PAGE分析、Western-blotting检测、免疫组化分析和ELISA试验结果表明,分子质量约为54 ku的重组核蛋白得到了高效表达,该表达蛋白具有良好的生物学活性。; 万春和刘明刘春国杨涛刘大飞齐金龙陈浩杜金铃李洪涛; 关键词：禽流感病毒核蛋白基因

H5N1亚型高致病性禽流感病毒单链抗体的构建: 禽流感/(AI/)是由正黏病毒科流感病毒属A型流感病毒/(Avian Influenza virus,AIV/)引起的禽类烈性传染病,被世界动物卫生组织/(OIE/)列入OIE疫病名录/(OIE-Listed disea...; 陈浩; 关键词：禽流感单克隆抗体单链抗体; 文献传递

H5N1亚型禽流感病毒HA基因核酸疫苗的构建及免疫效果研究被引量：1: 2008年; 采用RT-PCR技术扩增了高致病性禽流感病毒A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)HA基因,然后将其克隆到真核表达载体pCI-neo中,获得重组质粒pCI-HA。在脂质体介导下转染Vero细胞,单抗免疫组化IPMA结果表明,HA蛋白在VeroE6细胞上大量表达。pCI-HA质粒在有或无脂质体佐剂存在下以50μg剂量免疫接种Balb/c小鼠和SPF鸡,对照组只接种50μgpCI-neoDNA,各组以相同剂量加强免疫两次,每次免疫间隔3周。每次免疫前采集血清用ELISA检测抗体效价。最后一次免疫后3周用106EID50的高致病性流感病毒A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)进行攻毒试验。免疫组小鼠抗体效价与对照组相比明显升高,但脂质体佐剂免疫组与非脂质体免疫组小鼠抗体效价差异不显著,基因免疫组小鼠能够抵抗H5N1高致病性禽流感病毒的致死性攻击。该核酸疫苗虽然能够诱导SPF鸡产生抗体应答,但抗体产生缓慢,效价较低。; 陈浩刘明刘春国杨涛李洪涛杜金玲孙恩成; 关键词：禽流感病毒 HA基因核酸疫苗免疫效力

亚麻雨露沤麻快速脱胶菌株筛选与: 陈浩; 关键词：亚麻雨露沤麻脱胶菌株生物制剂

H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立及高产细胞型疫苗株的拯救被引量：5: 2009年; 【目的】建立H1N1亚型猪流感病毒反向遗传学操作系统及拯救出能够在动物传代细胞中高水平复制的H1N1亚型猪流感疫苗株。【方法】利用反向遗传操作技术,对猪流感病毒广东分离株进行拯救。【结果】首次成功拯救出全部片段均来自于亲本株的猪流感病毒rH1N1,并且成功拯救出了具有高度细胞适应性毒株re-LM株,研究结果表明二者均具有良好的遗传稳定性。rH1N1经MDCK细胞连续传代培养后,血凝价最高仅为1:64;而re-LM的血凝价最高可以稳定在1:1024,表明该毒株具有细胞繁殖高产的特性。用该重组病毒制备油乳剂灭活苗免疫2月龄仔猪,首免2周即可检测出HI抗体,平均效价在1:32以上,三免后2周HI抗体平均效价达到1:512,说明其有良好的免疫原性。【结论】H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的成功建立为猪流感病毒致病机理、传播机制及病毒基因功能的研究奠定了基础;重组细胞高产型猪流感病毒株的拯救为H1N1亚型猪流感疫苗的研制开辟了新的途径。; 刘大飞刘明刘春国杨涛万春和陈浩齐金龙杜金玲李洪涛孙恩成刘大程; 关键词：猪流感 H1N1亚型反向遗传操作技术

重组细胞高产型H3N2猪流感病毒株的拯救被引量：8: 2007年; 为拯救出一株能够在动物传代细胞中高水平复制的H3N2亚型猪流感疫苗株,利用反向遗传操作技术,将A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)毒株的PB1、PA、NP、M、NS基因和A/PR/8/34毒株的PB2基因作为内部基因与猪流感病毒A/Swine/Henan/S4/01(H3N2)毒株的HA、NA基因进行重组,成功拯救出了具有高度细胞适应性毒株rH3N2株,该毒株接毒MDCK细胞60h后,血凝价可以达到1∶512,表明该毒株具有高度适应细胞繁殖特性,为H3N2亚型猪流感病毒细胞培养型疫苗的研制奠定了基础。; 杨涛刘明刘春国张云刘大飞陈浩童光志; 关键词：猪流感 H3N2亚型反向遗传操作技术

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

陈浩

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

陈浩

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈